人體及動物生理學(xué)實驗_第1頁
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文檔簡介

1、1,人體及動物生理學(xué)實驗,2,實驗?zāi)夸?3,實驗?zāi)夸?4,實驗一人體及動物生理學(xué)實驗常用儀器、設(shè)備及器械的使用,實驗?zāi)康摹⒁?、實驗報告的書寫、實驗室?guī)則;常用生理實驗技術(shù)、生理儀器的使用。,5,生理學(xué)實驗?zāi)康?使學(xué)生正確使用生理學(xué)的基本實驗儀器,初步掌握基本操作技術(shù);使學(xué)生了解獲得知識的基本方法和初步分析整理實驗結(jié)果的能力,并借以驗證和鞏固理論課的某些基本理論。在實驗過程中培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)的思維方法、實事求是的科學(xué)態(tài)度和嚴(yán)

2、謹(jǐn)?shù)膶W(xué)風(fēng)。通過實驗逐步培養(yǎng)學(xué)生具有敏銳的觀察力和分析能力以及獨立思考和解決問題的能力。同時培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)新意識、科學(xué)素養(yǎng)和科研能力。 通過書寫實驗報告,提高學(xué)生分析、歸納問題及文字報答能力。,,6,實驗要求,實驗前,學(xué)生必須認(rèn)真預(yù)習(xí)實驗指導(dǎo),了解實驗的目的要求、實驗設(shè)計原理、簡要的操作步驟和注意事項,還應(yīng)復(fù)習(xí)與本實驗有關(guān)的理論部分,以提高實驗的目的性和主動性,達(dá)到進(jìn)一步鞏固有關(guān)理論知識的效果。,7,實驗中:,應(yīng)認(rèn)真聽講,按教師要求進(jìn)行

3、各項實驗操作。仔細(xì)觀察、認(rèn)真記錄實驗中出現(xiàn)的各種生理現(xiàn)象,并對引起生理現(xiàn)象的原因、意義進(jìn)行分析和思考。實驗用器材、物品要擺放整齊,便于操作。注意保持實驗桌面的清潔衛(wèi)生,隨時清除污物。實驗桌上不得放置與實驗無關(guān)的物品。愛護(hù)儀器和實驗動物,注意節(jié)約實驗材料。不經(jīng)教師許可,不得動用他人或他組的儀器用品,公用物品在使用完后應(yīng)放回原處,以免影響他人使用。遵守實驗室規(guī)則。實驗結(jié)束前請教師審查實驗結(jié)果。如有錯誤,及時補救。未經(jīng)教師許可,學(xué)生不

4、得擅自終止實驗或離開實驗室。,8,實驗后:,應(yīng)將實驗用具整理就緒,放回原處。所有手術(shù)器械、手術(shù)桌和其它手術(shù)用品擦洗干凈,儀器用干布擦干凈。實驗用具如有破損或缺少,及時報告指導(dǎo)教師。做好實驗室的清潔衛(wèi)生工作。按教師要求妥善處理實驗動物,不可自行處理。尤其不能將為處死的動物隨手丟棄。實驗后,關(guān)閉水源、電源,經(jīng)教師允許放可離開實驗室。整理實驗記錄,按教師要求書寫實驗報告并及時交給教師批閱。如發(fā)現(xiàn)不合格要求的經(jīng)指明問題,退回重寫。,,9,

5、實驗報告的書寫,實驗報告是對實驗的全面總結(jié);是理論聯(lián)系實際和應(yīng)用知識的重要環(huán)節(jié),是對學(xué)生撰寫科學(xué)論文能力的初步培養(yǎng),可為今后的科學(xué)研究打下良好的基礎(chǔ)。 實驗報告要文字簡練、條理清楚、觀點明確、字跡清楚,正確使用標(biāo)點符號。實驗報告有一定的格式: 內(nèi)容要求:實驗題目、實驗?zāi)康摹嶒炘?、實驗器材、實驗步驟、實驗結(jié)果、分析討論、結(jié)論。 重點強調(diào)實驗結(jié)果的處理和分析討論內(nèi)容。,,,10,實驗報告有一定的格式:,姓名、班級、指導(dǎo)教

6、師、學(xué)號、組別、日期實驗序號及實驗題目、實驗室、室溫、氣壓、濕度、同組人、日期實驗題目實驗?zāi)康?實驗原理實驗器材實驗步驟實驗結(jié)果 分析及討論 結(jié)論,,11,實驗結(jié)果是實驗報告中最為重要的部分,應(yīng)將實驗過程中所觀察到的現(xiàn)象經(jīng)過處理后的原始資料進(jìn)行真實、正確、詳細(xì)地描述。

7、有記錄曲線的應(yīng)進(jìn)行合理的剪切、歸類、在實驗報告的適當(dāng)位置進(jìn)行粘貼,并加以標(biāo)注和必要的文字說明,如曲線的序號、名稱;施加刺激(藥物)的標(biāo)記。有的實驗結(jié)果是數(shù)據(jù),可繪制成圖表進(jìn)行表達(dá)。,實驗結(jié)果,,,12,,圖5 洋蔥液對家兔離體小腸平滑肌收縮活動的影響,,13,表1 不同濃度洋蔥液對家兔離體小腸平滑肌活動的影響,* p﹤0.05有顯著意義; ** p﹤0.01有非常顯著意義,14,討論和結(jié)論,討論和結(jié)論是實驗報告中最具有創(chuàng)造性的工作

8、部分,是學(xué)生獨立思考、獨立工作能力的具體體現(xiàn),因此應(yīng)該嚴(yán)肅、認(rèn)真,不能盲目抄襲書本和他人的實驗報告。進(jìn)行實驗結(jié)果的討論,首先要判斷實驗結(jié)果是否為預(yù)期的,然后根據(jù)已掌握的課堂理論或查閱資料所獲得的知識,對實驗結(jié)果進(jìn)行有針對性的解釋、分析,并指出其生理意義。如果出現(xiàn)和預(yù)期的結(jié)果相矛盾的地方,也應(yīng)分析其產(chǎn)生的原因。,15,實驗結(jié)論,實驗結(jié)論是從試驗結(jié)果中進(jìn)一步歸納出來的一般性、概括性的推理,即對本次實驗所能驗證的概念、原理或理論的簡明總結(jié)

9、。結(jié)論應(yīng)與本次實驗的目的相呼應(yīng)。結(jié)論的書寫要簡明扼要,概括性強,不必要再羅列具體的結(jié)果,所引用的課外參考資料應(yīng)注明出處。,,16,實驗室規(guī)則,遵守紀(jì)律,因故外出或早退應(yīng)向老師請假。進(jìn)實驗室必須穿實驗服。實驗時應(yīng)嚴(yán)肅認(rèn)真,不進(jìn)行與實驗無關(guān)的活動。實驗者必須先熟悉儀器使用要點,儀器損壞或失靈,應(yīng)請老師修理或調(diào)換。違章操作致使儀器損壞者,應(yīng)按章賠償。實驗器械,用后洗凈擦干,如數(shù)歸還。若有損壞或遺失,應(yīng)及時報告,酌情賠償。愛護(hù)公物,節(jié)

10、約器材、藥品和動物。實驗物品不得擅自帶離實驗室。實驗結(jié)束,將本組實驗器材和桌凳收拾干凈,將動物尸體及污物投放指定處。實驗室由各組輪流打掃,保持整潔。,,17,四、生理學(xué)實驗常用儀器、設(shè)備的使用,生理學(xué)常用刺激器材及使用方法 1.刺激器(刺激參數(shù)—刺激強度、時間、頻率) 2.刺激電極 3.鋅銅弓 生理學(xué)常用記錄器材及使用方法 ※ 1.生物機能實驗信號采集處理系統(tǒng)(BL-420) P25-26 2.打印

11、機 3.多導(dǎo)生理記錄儀 其它: 1.萬能支臺 2.張力換能器 3.血壓換能器 4.記滴器,,,18,生物機能實驗信號采集處理系統(tǒng)(BL-420),掌握開機與關(guān)機、實驗工作界面進(jìn)入與退出的操作方法;掌握通道的選擇輸入方法與不同生理信號的輸入方法;掌握選擇掃描速度的方法并認(rèn)清橫坐標(biāo)表示的時間信號;掌握控制掃描開關(guān)(開、暫停與停止實驗)的方法,并學(xué)會保存實驗記錄、反演記錄、剪輯、復(fù)制實驗結(jié)果的方法;學(xué)習(xí)刺激器參數(shù)設(shè)置中,

12、各項刺激參數(shù)的調(diào)節(jié)方法與刺激標(biāo)記的使用方法;學(xué)習(xí)編輯實驗標(biāo)記的方法;學(xué)習(xí)生理信號的顯示與記錄方法。,,19,五、生理學(xué)實驗常用手術(shù)臺、手術(shù)器械的使用方法,1.手術(shù)臺:兔、狗、鼠,20,2.手術(shù)器械的種類及使用(實驗指導(dǎo)P4-8),(1)手術(shù)刀:主要用于切開皮膚或臟器。 執(zhí)刀方法----執(zhí)弓式、執(zhí)筆式、握持式、反挑式(2)手術(shù)剪:主要用于剪皮膚或肌肉等粗軟組織。 分類:尖頭剪、鈍頭剪,直剪、彎剪,剪毛剪,

13、眼科剪(3)手術(shù)鑷:主要用于夾持或牽拉切口的皮膚或肌肉組織。 分類:分大、中、小、眼科鑷,圓頭、尖頭,直頭、彎頭,有齒、無齒。 持鑷姿勢:類似于執(zhí)筆式。(4)金冠剪:可用于剪開皮膚、內(nèi)臟、肌肉、骨骼及繩線等。持剪姿 勢同一般手術(shù)剪。(5)毀髓針(6)玻璃分針:專用于分離神經(jīng)與血管的工具。尖端圓滑,直頭或彎頭。 持玻璃分針的姿勢同執(zhí)筆式。(7)止血鉗:

14、直止血鉗、彎止血鉗(8)其他:持針器、咬骨鉗、顱骨鉆、縫針、動脈夾等,21,六、生理學(xué)實驗常用溶液及配制方法,1.常用鹽溶液:(P210) 生理鹽水(兩棲類6.5~7.0、哺乳類)、任氏液、 臺式液、洛(樂)氏液 2.常用動物麻醉藥物劑量和使用方法 (P8-10)局部麻醉:0.5%~1.0%鹽酸普魯卡因、2%鹽酸可卡因全身麻醉:乙醚、2%~3%戊巴比妥鈉、20%~25%氨基甲酸乙酯(烏拉坦)、苯巴比妥鈉3.常用抗凝

15、劑的配制: 肝素、草酸鈉、檸檬酸鈉,22,七、動物實驗的基本操作技術(shù),1.常用動物的捕捉方法 2.常用動物麻醉方法: 靜脈注射、腹腔注射、肌肉注射 3.常用動物的固定方法: 背位(仰臥位)固定法、腹位(俯臥位)固定法、蛙類固定法 4.常用手術(shù)的基本操作 (1)手術(shù)切口與止血 (2)手術(shù)結(jié) (3)頸部手術(shù) (4)腹部手術(shù) (5)股部手術(shù)5.采血技術(shù),,23,坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備

16、刺激強度與骨骼肌收縮的關(guān)系 骨骼肌單收縮的分析骨骼肌收縮的總和與強直收縮,實驗二,24,[目的要求],1.學(xué)習(xí)坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備方法。 2.觀察不同的刺激強度和頻率與骨骼肌收縮形式之間的關(guān)系。,25,腓腸肌由許多肌纖維組成,刺激腓腸肌時,不同的刺激強度會引起肌肉的不同反應(yīng)。當(dāng)刺激強度小時,不引起肌肉發(fā)生收縮反應(yīng),此時的刺激為閾下刺激。當(dāng)全部肌纖維同時收縮時,則出現(xiàn)最大的收縮反應(yīng)。這時即使再增大刺激強度,肌肉收縮的力量也不再

17、隨之加大??梢砸鸺∪獍l(fā)生最大收縮反應(yīng)的最小刺激強度為最適刺激強度。,[實驗原理1](刺激強度與骨骼肌收縮的關(guān)系),26,[實驗原理2](骨骼肌收縮的總和與強直收縮),給具有興奮性的肌肉一個短促的閾刺激,肌肉就發(fā)生一次迅速的收縮,稱為單收縮。若給予兩個或兩個以上的閾刺激時,可因刺激的頻率不同而呈現(xiàn)不同的收縮形式。如果兩個或多個刺激的間隔大于該肌肉單收縮的全部時間,則引起波型上互相分開的兩個或多個單收縮;若后一個刺激落在前一次收縮的舒

18、張期,就會形成兩個或多個單收縮不同程度的總合,其收縮幅度比單收縮高。在一定范圍內(nèi),刺激間隔越小,收縮幅度就越高,稱為復(fù)合收縮。若多個刺激引起波型呈鋸齒狀的收縮曲線,稱不完全強直收縮,若多個刺激間隔進(jìn)一步縮小,使后一個刺激落在前一個收縮的收縮期內(nèi),肌肉就處于完全持久的收縮狀態(tài),產(chǎn)生一個沒有舒張期的持續(xù)的收縮曲線,叫做完全強直收縮。,27,[實驗器材],1.藥品與器材 任氏液。蛙板,玻璃板,蛙類手術(shù)器械1套(粗剪刀、組織剪、眼科剪各1

19、把,大、小鑷子各1把,探針1根,玻璃分針2根),培養(yǎng)皿,鋅銅弓,絲線,圖釘,污物缸,肌動器,張力換能器;BL-420生物機能實驗系統(tǒng)。 2.實驗對象 蟾蜍。,28,[方法步驟] 1.制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本①破壞腦和脊髓-圖A ②剪去軀干上部及內(nèi)臟-圖B ③剝皮 、洗手及器械、分離兩腿 ④制作坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本-圖C.D⑤用鋅銅弓檢查標(biāo)本興奮性,A,B,C,D,29,2.將標(biāo)本固定在肌動器內(nèi),連接張力換能器

20、。3.打開電腦,進(jìn)入BL-420生物機能實驗系統(tǒng)。實驗項目→神經(jīng)肌肉實驗→ ①刺激強度與反應(yīng)的關(guān)系 ②骨骼肌單收縮的分析 ③骨骼肌收縮的總和與強直收縮,,,30,,,31,,,,32,①刺激強度與反應(yīng)的關(guān)系,打開實驗項目選擇,進(jìn)入《刺激強度與反應(yīng)的關(guān)系》項目調(diào)節(jié)刺激裝置的設(shè)置啟動波形顯示圖標(biāo),,33,②骨骼肌單收縮的分析,選用單

21、刺激方式,調(diào)節(jié)刺激強度,使肌肉收縮幅度適中 將實驗用通道的掃描速度調(diào)快,啟動刺激開關(guān)。 當(dāng)顯示通道出現(xiàn)一個單收縮曲線時,立即點擊暫停圖標(biāo) 測量單收縮的三個時程:潛伏期、收縮期和舒張期。,,34,③骨骼肌收縮的總和與強直收縮 (刺激頻率與反應(yīng)的關(guān)系),打開實驗項目選擇,進(jìn)入《刺激頻率與反應(yīng)的關(guān)系》項目 調(diào)節(jié)刺激裝置的設(shè)置 啟動波形顯示圖標(biāo),,35,[結(jié)果] 1.刺激強度與反應(yīng)的關(guān)系(閾下刺激、閾刺激、遇上

22、刺激、最大刺激),,36,2.骨骼肌的單收縮,,圖 骨骼肌單收縮的分析,,37,3.單收縮、不完全強直收縮、完全強直收縮,38,,,圖 刺激頻率與反應(yīng)的關(guān)系,39,[注意事項]1.實驗過程中經(jīng)常用任氏液濕潤標(biāo)本,以防干燥。2.股骨不可保留過短,否則標(biāo)本不好固定。3.分離神經(jīng)須用玻璃分針,不能用金屬器械。4.避免過長時間地連續(xù)刺激標(biāo)本,以防標(biāo)本疲勞。,40,[思考題],1.為什么要用任氏液濕潤標(biāo)本?2.鋅銅弓為什么能夠檢驗神

23、經(jīng)肌肉的興奮性?,,41,坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備神經(jīng)干復(fù)合動作電位的引導(dǎo)、傳導(dǎo)速度的測定,實驗三,42,[目的要求],學(xué)習(xí)蛙坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備。觀察坐骨神經(jīng)干復(fù)合動作電位的波形,并了解其產(chǎn)生的基本原理。了解動作電位在神經(jīng)干上的傳導(dǎo),學(xué)習(xí)測定其傳導(dǎo)速度測定的方法。,43,[實驗原理1],神經(jīng)干在受到有效刺激后,可以產(chǎn)生動作電位,標(biāo)志著神經(jīng)發(fā)生興奮。如果在神經(jīng)干另一端引導(dǎo)傳來的興奮沖動,可以引導(dǎo)出雙向的動作電位,如在兩個引導(dǎo)電極之

24、間將神經(jīng)麻醉或損壞,則引導(dǎo)出動作電位即為單向動作電位。神經(jīng)細(xì)胞的動作電位是以“全或無”的方式發(fā)生的。坐骨神經(jīng)干是由很多不同類型的神經(jīng)纖維組成的,所以,神經(jīng)干的動作電位是復(fù)合動作電位。復(fù)合動作電位的幅值在一定刺激強度下是隨刺激強度的變化而變化的。,,,44,圖 神經(jīng)干雙相動作電位,,45,雙相動作電位,,46,[實驗原理2],神經(jīng)干受到有效刺激興奮以后,產(chǎn)生的動作電位以脈沖的形式按一定的速度向遠(yuǎn)處擴布傳導(dǎo)。不同類型的纖維其傳導(dǎo)興奮的速度

25、是各不相同的。測定神經(jīng)纖維上興奮的傳導(dǎo)速度(v),在遠(yuǎn)離刺激點的不同距離處分別引導(dǎo)其動作電位,兩引導(dǎo)點之間的距離為S,在兩引導(dǎo)點分別引導(dǎo)出的動作電位的時相差為Δt 。再按照公式即可計算其傳導(dǎo)速度:v=s/Δt,47,,動作電位傳導(dǎo)速度的測定,,,,,,-,+,,,,,S,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,Δt,,刺激器,輸入通道,R1- Rr1+ R2- R2+,,,48,圖 神經(jīng)沖動傳導(dǎo)速度的測定

26、,49,[實驗器材],1.儀器與材料:生物信號處理系統(tǒng)、解剖針、手術(shù)剪、眼科剪、圓頭手術(shù)鑷、尖頭手術(shù)鑷、玻璃分針、神經(jīng)屏蔽盒及連接導(dǎo)線,棉花、蛙板、燒杯。2.藥品:任氏液3.動物:蟾蜍,50,,,51,,,52,[方法步驟],1.坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備① 毀腦脊髓 ② 剪除軀干上部及內(nèi)臟 ③ 剝皮(之后洗凈雙手和用過的全部手術(shù)器械)④ 完成坐骨神經(jīng)干標(biāo)本 分離兩腿游離坐骨神經(jīng) 完成坐骨神經(jīng)標(biāo)本,53,圖 蛙坐骨神經(jīng)干

27、標(biāo)本,54,神經(jīng)干標(biāo)本盒刺激電極與生物信號處理系統(tǒng)的刺激輸出相連。 神經(jīng)干標(biāo)本盒兩對引導(dǎo)電極分別接微機生物信號處理系統(tǒng)1、2通道。,RM6240C微機生物信號處理系統(tǒng),神經(jīng)干標(biāo)本盒。,S+ S- E R1 - R1+ R2- R2+,2.連接實驗裝置,55,3.實驗觀察,打開電腦,進(jìn)入生物機能實驗系統(tǒng)。實驗項目→神經(jīng)肌肉實驗→ ①神經(jīng)干動作電位記錄與觀察

28、 ——雙相動作電位的觀察 儀器參數(shù):1、2通道時間常數(shù)0.02s、濾波頻率1KHz、 靈敏度5mV,采樣頻率:100KHz, 掃描速度:0.2ms/div。刺激方式:單刺激, 刺激幅度1.0V,刺激波寬0.1ms,延遲2ms, 同步觸發(fā)。 ②測定神經(jīng)干

29、動作電位的傳導(dǎo)速度。,56,圖 神經(jīng)干雙相動作電位,,,[實驗結(jié)果],1.神經(jīng)干雙相動作電位,57,圖 神經(jīng)沖動傳導(dǎo)速度的測定,2.神經(jīng)沖動傳導(dǎo)速度的測定,58,[注意事項],標(biāo)本剝制過程,盡量減少神經(jīng)的損傷;刺激參數(shù)設(shè)置要合理,過大會損毀神經(jīng)。雙刺激的參數(shù)要一致。,59,[結(jié)果],觀察和記錄神經(jīng)干動作電位并對其產(chǎn)生原理進(jìn)行分析;測出動作電位傳導(dǎo)的速度,60,解釋在一定范圍內(nèi)神經(jīng)干動作電位的振幅隨刺激強度而改變,是否與單個神經(jīng)纖維

30、動作電位的“全”或“無”定律相矛盾?,[思考題],,61,實驗四,血細(xì)胞計數(shù)紅細(xì)胞溶解,62,[目的與要求],1.掌握紅細(xì)胞和白細(xì)胞人工計數(shù)的方法和原理。2.學(xué)習(xí)測定紅細(xì)胞滲透脆性的方法,理解細(xì)胞外液滲透壓對維持細(xì)胞正常形態(tài)與功能的重要性。3.觀察紅細(xì)胞溶血現(xiàn)象,63,[實驗原理],將一定量的血液經(jīng)一定倍數(shù)的等滲鹽水稀釋后,置于血細(xì)胞計數(shù)板的計數(shù)室內(nèi),計數(shù)一定容積溶液內(nèi)的紅細(xì)胞或白細(xì)胞,然后再推算出1立方毫米或1L血液內(nèi)的各種細(xì)胞

31、數(shù)。紅細(xì)胞在高滲氯化鈉溶液中,會失去水分發(fā)生皺縮;在低滲氯化鈉溶液中,會因過多水分進(jìn)入紅細(xì)胞而膨脹,甚至破裂,使血紅蛋白釋出,此即紅細(xì)胞溶解。紅細(xì)胞對低滲溶液具有不同的抵抗力,這種抵抗力與紅細(xì)胞表面積/體積有關(guān),也即紅細(xì)胞有不同的滲透脆性,表面積/體積比值小者抵抗力小(滲透脆性大);反之,抵抗力大(滲透脆性?。?。,64,[實驗器材],1.儀器與材料:顯微鏡,血細(xì)胞計數(shù)板,蓋玻片,一次性定量毛細(xì)取血管(10μl、20μl),消毒棉球,

32、擦鏡紙,5ml小試管(12支),試管架,移液管(1ml及2ml),滴管,玻璃棒,細(xì)耳球。2.藥品:紅細(xì)胞稀釋液、白細(xì)胞稀釋液,蒸餾水, 171mmol/L氯化鈉溶液 ,肝素鈉。3.動物:家兔,65,[方法步驟],1.血細(xì)胞的計數(shù)①采血及稀釋 紅細(xì)胞:2.00ml稀釋液+ 0.01ml血液 稀釋倍數(shù):200 白細(xì)胞:0.38ml稀釋液+ 0.02ml血液 稀釋倍數(shù):20②清洗計數(shù)板并熟悉計數(shù)

33、板及計數(shù)室的結(jié)構(gòu)③計數(shù)方法 ◆稀釋血液滴入計數(shù)室后,須靜置2—3分鐘,然后低倍鏡下計數(shù) ◆計數(shù)時應(yīng)循一定的路徑以免遺漏或重復(fù)。 ◆對于分布在劃線上的血細(xì)胞,依照“數(shù)上不數(shù)下, 數(shù)左不數(shù)右”的原則進(jìn)行計數(shù) ④計算:,,,66,67,,,68,2.紅細(xì)胞溶血——滲透脆性的測定,取小試管10支,編號后,按下表制成不同濃度的NaCl 溶液。向每一試管中各加一滴血,混勻(切勿用力震蕩),室溫

34、下放置2小時后觀察結(jié)果 觀察結(jié)果:,,,69,[實驗結(jié)果],1.記錄5個中方格中紅細(xì)胞數(shù),并根據(jù)公式換算出每立方毫米血液中紅細(xì)胞數(shù)。 紅細(xì)胞數(shù)/mm3 = 5個中格紅細(xì)胞數(shù)×100002.記錄四個大方格中白細(xì)胞數(shù),并根據(jù)公式換算出每立方毫米血液中白細(xì)胞數(shù)。 白細(xì)胞數(shù)/ mm3 = 4個大方格白細(xì)胞數(shù)×503.仔細(xì)觀察各小試管中上下溶液的顏色、透明度等,根據(jù)現(xiàn)象判斷出紅細(xì)胞的最小

35、抵抗和最大抵抗的氯化鈉溶液濃度并記錄。,70,[注意事項],1.血液加入試管后,須充分搖勻,但動作要輕。2.計數(shù)室內(nèi)細(xì)胞分布要均勻。 紅細(xì)胞:各中方格間數(shù)目相差不超過20個; 白細(xì)胞:各大方格間數(shù)目相差不超過8個。3.混懸液滴入計數(shù)室時,液量要適當(dāng)。4.所用吸管、試管、計數(shù)板等必須十分干凈。,71,[作業(yè)],1.計算結(jié)果,并分析哪些因素可能會影響血細(xì)胞計數(shù)的準(zhǔn)確性?2.判斷紅細(xì)胞最大脆性和最小脆性,并結(jié)合實驗

36、現(xiàn)象說明根據(jù)?,,72,實驗五,血紅蛋白含量測定ABO血型鑒定,73,[目的要求],1.掌握測定血紅蛋白含量的基本方法 ——比色法 2.學(xué)習(xí)鑒定血型的基本方法。3.觀察紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象,掌握ABO血型鑒定的原理。,74,[實驗原理1],測定血紅蛋白量的方法很多,常用比色法。比色法即沙利氏比色法。其原理是在一定量血液中加入少許鹽酸,酸不僅使紅細(xì)胞膜破壞,而且使原來位于紅細(xì)

37、胞的亞鐵血紅素轉(zhuǎn)變成高鐵血紅素(酸化血紅素),后者呈較穩(wěn)定的棕色。將其用蒸餾水稀釋后與血紅蛋白測定計的標(biāo)準(zhǔn)色進(jìn)行目測比色,即得每100ml血液所含的血紅蛋白克數(shù)或百分率。,75,血型通常是指紅細(xì)胞的血型,是根據(jù)存在于紅細(xì)胞膜外表面的特異性抗原(鑲嵌于紅細(xì)胞膜上的特異性糖蛋白)來確定的,這種抗原或稱凝集原是由遺傳基因決定的。血清中的抗體或稱凝集素,可與紅細(xì)胞膜上不同的相應(yīng)抗原結(jié)合,產(chǎn)生凝集反應(yīng),最后發(fā)生紅細(xì)胞溶解。由于這種現(xiàn)象在臨床上

38、在輸血前必須進(jìn)行血型鑒定,以確保安全輸血。在血型系統(tǒng)中最重要的是ABO血型系統(tǒng),其次為Rh系統(tǒng)。,[實驗原理2],76,ABO血型鑒定原理,據(jù)受試者紅細(xì)胞上是否含有凝集原和所含凝集原種類的不同,可將血型分為A、B、AB和 O四種基本血型。見下表:,77,[儀器與材料],血紅蛋白計、0.1mol/L鹽酸溶液、一次性20μl定量毛細(xì)取血管、滴管、玻璃棒、蒸餾水、家兔顯微鏡、載玻片、一次性刺血針、消毒牙簽、玻璃棒、鑷子、標(biāo)準(zhǔn)血清(A、B、O

39、型)、生理鹽水、75%酒精棉球、,78,[方法與步驟],(一)血紅蛋白測定1.熟悉血紅蛋白計的組成及結(jié)構(gòu)2.取0.1mol/L鹽酸至血紅蛋白稀釋管的刻度10處(用百分率計算的那一側(cè)刻度值)。3.用一次性毛細(xì)取血管吸血至刻度20μl,并將其注入血紅蛋白稀釋管的鹽酸液內(nèi),反復(fù)洗滌吸管多次,搖勻放置十分鐘,使鹽酸與紅細(xì)胞及其內(nèi)部的血紅蛋白充分作用。4.比色:將稀釋管插入標(biāo)準(zhǔn)比色架兩色柱中央的空格中,并用滴管向稀釋試管內(nèi)逐滴加入蒸餾水并

40、及時混勻,直至顏色與標(biāo)準(zhǔn)玻璃的色柱的顏色相同為止,此時稀釋管上液面的讀數(shù)即100ml血液中血紅蛋白的克數(shù)。,79,(二)ABO血型鑒定,1.取一載玻片,并在左中右位置上方用蠟筆依次注上A、B和AB字樣。2.用滴管分別依次吸抗A血清、抗B 血清和抗AB血清各一滴,分別滴在載玻片A、B和AB的下方。3.采血:常規(guī)消毒,穿刺采血部位并采血。4.將血液分別與抗A血清、抗B血清和抗AB血清混勻,在室溫下靜止數(shù)分鐘后觀察凝集結(jié)果。,80,觀察

41、結(jié)果:,81,[注意事項],1.一定要準(zhǔn)確掌握進(jìn)入稀釋管內(nèi)的血液量(20µl)。2.蒸餾水需逐滴加入,多做幾次比色,以免稀釋過量。3.凝血現(xiàn)象的觀察需一定的的時間,必要時需在顯微鏡下觀察。,82,[作業(yè)],1.得出實驗結(jié)果,并分析哪些因素可能會影響血紅蛋白數(shù)量的準(zhǔn)確性?2.判斷你的血型,并說出你的根據(jù)?,,83,實驗六,蛙心起搏點的觀察期前收縮與代償間歇,84,[目的要求],1.學(xué)習(xí)暴露蛙類心臟的方法,熟悉心臟結(jié)構(gòu)。

42、2.觀察心臟起搏點以及各部分的自律性高低和心臟的興奮性傳導(dǎo)順序。3.學(xué)習(xí)在體蟾蜍心跳曲線的記錄方法。4.觀察心室在收縮活動的不同時期對額外刺激的反應(yīng)。5.了解期前收縮與代償間歇產(chǎn)生的原因。,85,[實驗原理],1.兩棲類動物的心臟為兩心房、一心室,心臟的起搏點是靜脈竇。靜脈竇的自動節(jié)律最高,心房次之,心室最低。正常情況下,心臟的活動節(jié)律服從靜脈竇的節(jié)律,其活動順序為:靜脈竇、心房、心室。 兩棲類動物的心臟解剖2.斯氏結(jié)扎:3

43、.心肌細(xì)胞的生理特點是具有興奮性、自律性、傳導(dǎo)性、收縮性。心肌細(xì)胞興奮性的最大特點是有效不應(yīng)期特別長(收縮期,舒張早期),86,87,88,[實驗器材],1.器材:生物信號處理系統(tǒng),張力換能器,刺激電極,蛙類手術(shù)器械,蛙心夾,絲線,萬能支架2.藥品:任氏液3.動物:蟾蜍,89,[方法步驟],(一)蛙心起搏點的觀察(看錄像) 1.破壞腦脊髓 。 2.仰臥位固定于蛙板上。 3.打開胸腔暴露心臟 ,觀察心臟的結(jié)構(gòu) 。

44、 4. 斯氏結(jié)扎,記錄結(jié)果。,,表 斯氏結(jié)扎后各部位波動頻率(次/分鐘),90,,91,圖 蟾蜍心臟的背面觀和腹面觀,,92,1. 破壞腦脊髓 2.仰臥位固定于蛙板上。3. 打開胸腔暴露心臟4. 蛙心夾于心臟舒張期夾住心尖 5. 連接實驗裝置,如圖6. 選擇合適的刺激強度 ;分別在心室舒張的早期、中期和晚期給予單個刺激,觀察心跳曲線的變化。,(二)蟾蜍心室的期前收縮與代償間歇,,,93,,,94,[實驗結(jié)果],95,,

45、96,,,97,1. 蟾蜍毀髓時要徹底。2. 實驗過程中,應(yīng)經(jīng)常用任氏液濕潤心臟。3. 刺激電極要與心室肌接觸良好,應(yīng)避免短路。4. 心跳曲線的上升支應(yīng)代表心室收縮,下降支代表心室舒張,如相反則應(yīng)將換能器倒向。5. 先用刺激電極刺激蟾蜍的腹壁肌肉,以檢測強度是否適宜。,[注意事項],98,[思考題],1.正常情況下,為什么靜脈竇是蟾蜍心臟的起搏點?它對潛在起搏點如何控制?2.每次結(jié)扎后會出現(xiàn)什么現(xiàn)象,為什么? 3.如何證實心

46、肌有較長的不應(yīng)期?心肌的較長不應(yīng)期有何生理意義?4.期前收縮后一定出現(xiàn)代償間歇嗎?為什么?5.代償間歇是怎樣產(chǎn)生的?6. 為何心肌有期前收縮而骨骼肌不會出現(xiàn)?,,99,實驗七蛙類離體心臟灌流,100,[目的要求],1.學(xué)習(xí)斯氏離體蛙心灌流法。2.了解心肌的生理特性 3.觀察鈉離子、鉀離子、鈣離子及腎上腺素(Adr)、乙酰膽堿(Ach)等對離體心臟活動的影響。,101,[實驗原理],心臟具有自動節(jié)律性收縮的特性,可用人工灌流的

47、方法,研究心臟活動的規(guī)律及特點;還可觀察灌流液成分的改變對離體心臟活動的影響。心肌細(xì)胞生理特性表現(xiàn)為:興奮性、傳導(dǎo)性和自動節(jié)律性、收縮性。,102,心肌細(xì)胞電生理特性產(chǎn)生的離子基礎(chǔ)1.心肌的興奮性(1)靜息電位水平------細(xì)胞外K+濃度改變: ?高K+:致細(xì)胞內(nèi)外K+濃度梯度減小,靜息電位水平降低,動作電位幅度減小,興奮性增大。 ? 低K+:細(xì)胞外K+降低致細(xì)胞內(nèi)外K+濃度梯度增大,靜息電位絕對值增大,膜呈超極化

48、狀態(tài),興奮性降低。 (2)Na+通道的性狀------與其興奮時興奮性周期性變化有關(guān)。,103,2.心肌的傳導(dǎo)性主要取決于動作電位0期去極化的速度和幅度(Na+和Ca2+)可能的解釋是:強的局部電流擴布的距離大,可以使距興奮部位更遠(yuǎn)的下游部位受到局部電流的刺激而興奮,故興奮的傳導(dǎo)較快。,104,3.心肌的自動節(jié)律性(1)最大復(fù)極化電位水平------ 復(fù)極3期K+外流增加,導(dǎo)致最大復(fù)極化電位絕對值增大,自率性減慢。(2

49、)4期自動除極速度------ ① 遞減性K+外流; ② 進(jìn)行性增強的內(nèi)向離子流(主要為Na+) (取決于竇房結(jié)P細(xì)胞的自動去極化電位)4.心肌收縮性:依賴細(xì)胞外Ca2+濃度。,105,[儀器與材料],1.動物:蟾蜍。2.器械:斯氏蛙心套管、套管夾、支架、雙凹夾、滑輪、燒杯、常用手術(shù)器械、蛙板、蛙心夾、計算機采集系統(tǒng)、張力傳感器、滴管、培養(yǎng)皿(或小燒杯)、污物缸、紗布、棉線、3.藥品:任氏液、0.65%NaCl、5%NaCl、2%

50、CaCl2、1%KCl、1:5000腎上腺素、1:10000乙酰膽堿、300U/ml肝素。,106,[方法與步驟],1.連接實驗裝置:2.離體蛙心的制備 ——斯氏蛙心插管法,將插好離體心臟的套管固定在支架上,并與張力換能器相連3.啟動生物信號采集處理系統(tǒng)實驗項目→蛙心灌流 →開始實驗,107,4.實驗觀察,⑴記錄正常心搏曲線。⑵改用0.65%NaCl溶液灌流,并做好加藥標(biāo)記,觀察心搏變化。待曲線出現(xiàn)明顯變化時

51、,立即吸去套管中的灌流液,同時做好沖洗標(biāo)記,并用新鮮任氏液清洗2—3次,待心搏恢復(fù)正常。⑶向套管內(nèi)加2—6滴5%NaCl溶液,做好加藥記號,觀察心搏曲線的頻率及振幅變化。當(dāng)曲線出現(xiàn)明顯變化時,應(yīng)立即吸去套管中的灌流液,同時做好沖洗標(biāo)記,并用新鮮任氏液清洗2—3次,待心搏恢復(fù)正常。,108,,⑷同法向套管內(nèi)加入1—3滴2%CaCl2溶液,觀察并記錄心搏曲線的變化。當(dāng)出現(xiàn)明顯變化時,立即更換任氏液,待心搏恢復(fù)正常(如果恢復(fù)遲緩,可多次沖洗

52、)。⑸向套管中加1—2滴1%KCl溶液,記錄心搏曲線的變化。當(dāng)心搏曲線變化時,用同法更換灌流液,待心搏恢復(fù)正常。,109,,⑹同法記錄套管中加入1—2滴的1:5000腎上腺素后心搏曲線的變化。⑺同法記錄套管中加入1—2滴的1:10000乙酰膽堿后心搏曲線的變化。5.整理記錄,110,,注意事項:1.換液時切勿碰套管,以免影響描記曲線的基線,同時保持灌流液面一致。,,111,實驗八,蛙類心臟收縮與電興奮的關(guān)系,112,【目的要

53、求】,了解心臟電活動與機械活動的時相關(guān)系。,心臟收縮的機械活動,與心臟興奮的產(chǎn)生、傳導(dǎo)和 恢復(fù)過程中的生物電變化,是兩個不同的生理過程。 心臟收縮的機械活動可以通過心搏曲線記錄下來,而心臟的生物電變化可以通過心電圖表現(xiàn)出來。 同時記錄心臟的機械活動和電變化,可以清楚地觀察到兩個生理過程之間的聯(lián)系。,【基本原理】,113,114,【動物與器材】,蟾蜍 常用手術(shù)器械、蛙板(或蠟盤)、蛙心夾、計算機采集系統(tǒng)、張力傳感器、支架、雙凹夾、滴

54、管、滑輪、兩個針形插入電極、小燒杯、紗布、棉線、橡皮泥 任氏液。,115,【方法與步驟】,1.打開計算機采集系統(tǒng),接通張力傳感器輸入通道。2.取一只蟾蜍,暴露心臟。用蛙心夾夾住心尖部,將蛙心夾上的系線繞過滑輪與張力傳感器相連。調(diào)節(jié)滑輪位置,使心臟不離開體腔且能記錄心搏曲線。調(diào)節(jié)掃描速度與心搏曲線的幅度適中。 3.將引導(dǎo)心電的兩個電極夾,分別夾住刺入上下肢皮下的針形電極。接通動物心電輸入通道,觀察心電信號。如果信號不大,可調(diào)節(jié)顯示器

55、增益,直到出現(xiàn)明顯的心電圖信號。4.調(diào)節(jié)兩個通道的掃描速度一致。用比較顯示方式,仔細(xì)觀察心電圖的P波與心房收縮波、QRS波群與心室收縮波在時間上的相關(guān)性。,116,,,117,將蛙心夾取下,記錄正常蛙心電圖 將心臟連同靜脈竇一并快速剪下,并將蛙心放入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中,繼續(xù)記錄,是否有心電圖? 將蛙心從培養(yǎng)皿中取出,立即放回蛙心原來的位置,繼續(xù)描記,是否有心電圖?再將蛙心倒放,如何? 再將蛙心放入培養(yǎng)皿中,并將引導(dǎo)電極的鱷魚夾

56、按順序夾住盛有任氏液的培養(yǎng)皿邊緣,注意使鱷魚夾 接觸到培養(yǎng)皿中的任氏液,記錄心電圖,倒轉(zhuǎn)蛙心,又如何?,118,蛙的心搏曲線與心電圖同步記錄,心搏曲線,心電圖,,,119,【思考題】,根據(jù)實驗結(jié)果,分析心電圖相應(yīng)波形早于心臟收縮及各間期的意義?,120,實驗九,人體動脈血壓測定;心音聽診;呼吸通氣量的測定,121,[目的要求],1.學(xué)習(xí)并掌握間接測量人體血壓的原理和方法,觀察某些因素對動脈血壓的影響。2.學(xué)習(xí)心音聽診的方法,識別第

57、一心音與第二心音。3.掌握呼吸通氣量的測定方法。,122,[實驗原理1],通常血液在血管內(nèi)流動時并沒有聲音,但當(dāng)外加壓力使血管變窄形成血液渦流時,則可發(fā)生聲音(血管音)。因此,可以根據(jù)血管音的變化來測量動脈血壓。測定人體動脈血壓最常用的方法是使用血壓及間接測壓。測壓時,用壓脈帶在手臂或手腕(腕式血壓計)加壓,當(dāng)外界壓力超過動脈的收縮壓時,動脈血流完全被阻斷,此時在動脈處聽不到任何聲音。當(dāng)外加壓力等于或稍低于動脈內(nèi)的收縮壓而高于舒張壓時

58、,則在心臟收縮時,動脈內(nèi)可有少量的血流通過,而心室舒張時卻無血流通過。血液斷續(xù)的通過血管時,會發(fā)出聲音。故恰好可以完全阻斷血流的最小外加壓力(即發(fā)生第一次聲音時的壓力)相當(dāng)于收縮壓。當(dāng)外加壓力等于或小于舒張壓時,血管內(nèi)的血流連續(xù)通過,所發(fā)出的音調(diào)會突然降低或消失。在心臟舒張時有少許血流通過的最大管外壓力(即音調(diào)突然降低時的壓力)相當(dāng)于舒張壓。,123,[實驗原理2],心音是由心臟瓣膜關(guān)閉和心肌收縮引起的振動所產(chǎn)生的聲音用聽診器在胸膛前聽

59、診,在每一心動周期內(nèi)可以聽到兩個心音。第一心音:音調(diào)較低(低頻為25—40次/S)而歷時較長(0.12s),聲音較響,是由房室瓣關(guān)閉和心肌收縮振動所產(chǎn)生的。由于房室瓣的關(guān)閉與心室收縮開始幾乎同時發(fā)生,因此第一心音是心室收縮的標(biāo)志,其響度和性質(zhì)變化,常可反映心室肌收縮強、弱和房室瓣膜的機能狀態(tài)。第二心音:音調(diào)較高(音頻為50次/S)而歷時較短(0.08s),較清脆,主要是由半月瓣關(guān)閉產(chǎn)生振動造成的。由于半月瓣關(guān)閉與心室舒張幾乎同時發(fā)生,因

60、此,第二心音是心室舒張的標(biāo)志,其響度常可反映動脈壓的高低。,124,[實驗原理3],人的性別、年齡及運動情況都會產(chǎn)生不同的呼吸氣量。正常安靜狀態(tài)下每次呼吸的氣量約500ml,稱潮氣量。人可以在正常吸入空氣以后,再用力吸入更多的氣體;而在正常呼氣之后,也能再用力呼氣,本實驗就是測量這些呼吸氣量的變化。,125,[實驗器材],血壓計、聽診器、單筒肺量計、橡皮接口、75%酒精、酒精棉球。,126,[方法及步驟],(一)人體動脈血壓測量1.

61、受試者脫左臂衣袖,心臟與血壓計零點同一水平。靜坐5min,放松肢體,平穩(wěn)呼吸,穩(wěn)定情緒。2.松開打氣球上的螺絲,將壓脈帶內(nèi)空氣完全放出,再將螺絲扭緊。,127,3.將壓脈帶裹于左上臂,其下緣應(yīng)在肘關(guān)節(jié)上約3cm處,松緊應(yīng)適宜。受試者手掌向上平放于臺上,壓脈帶應(yīng)與心臟同一水平(如右圖)。4.在肘窩部找到動脈搏動處,左手持聽診器的胸具置于其上。注意:不可用力下壓。,128,5.聽取血管音變化:右手持打氣球,向壓脈帶打氣加壓,此時注意傾聽

62、聲音變化,在聲音消失后再加壓30mmHg,然后扭開打氣球之螺絲,緩慢放氣(切勿過快),此時可聽到血管音的一系列變化,聲音從無到有,由低而高,而后突然變低,最后完全消失。然后扭緊打氣球螺絲繼續(xù)打氣加壓,反復(fù)聽取聲音變化2—3次。6.測量動脈血壓重復(fù)上一操作,同時注意檢壓計之水銀柱和聲音變化。在徐徐放氣減壓時,第一次聽到血管音的水銀柱高度即代表收縮壓。在血管音突然由強變?nèi)鯐r的水銀柱高度即代表舒張壓,記下測定數(shù)值后,將壓脈帶內(nèi)的空氣放盡,使

63、壓力降至零。,129,,7. 重復(fù)測量2~3次,記錄測壓平均值。8. 呼吸對血壓的影響:讓受試者作緩慢的深呼吸1min,而后即刻測量其血壓。9. 運動對血壓的影響讓受試者作原地蹲起運動,1min內(nèi)完成50~60次,共做1min。運動后立即坐下,并將變化最大的血壓數(shù)值記下。10. 冷刺激對血壓的影響:令受試者的手浸入冷水中1min,測量血壓。,130,(二)心音聽診,1.受試者安靜端坐,胸部裸露。2.檢查者帶好聽診器,注意聽診器的

64、耳具應(yīng)與外耳 道開都的方向一致(向前)。以右手的食指、拇 指和中指輕持聽診器胸具緊貼于胸部皮膚上,依 次由左房室瓣聽診區(qū)——主動脈瓣聽診區(qū)——肺 動脈瓣聽診區(qū)——右房室瓣聽診區(qū) ,仔細(xì)聽取 心音,注意區(qū)分兩心音。如難以區(qū)分兩心音,可 同時觸診心尖搏動或頸動脈脈搏,此時出現(xiàn)的心 音即為第一心音。,131,臨床常用的心音聽診區(qū),132,(三)呼吸通氣量的測定,1.儀器準(zhǔn)備單筒肺量計(圖5—4)的主要

65、部件有:(1)測量裝置由兩個對口套裝的圓筒構(gòu)成。外筒口向上,筒內(nèi)有3根通氣管。內(nèi)筒又稱浮筒,當(dāng)外商灌滿水后,通過吹氣口向通氣管內(nèi)充氣時,內(nèi)筒可以上浮。根據(jù)筒內(nèi)氣體增加的容積,可測出吹入氣體的量。(2)記錄裝置浮筒頂端有根吊線,浮筒內(nèi)容積的變化可以牽動吊線,而吊線的活動又可通過記錄筆描記到記錄紙上,可以根據(jù)需要選擇走紙速度,描記出呼吸氣量的曲線。,133,,(3)通氣管共3根,開口于浮筒底部。一根是充O2管,可與外界氣體相通(圖5-4

66、氧氣接頭),用以調(diào)節(jié)浮筒內(nèi)氣體成分。另外兩個通氣管分別裝有鈉石灰和鼓風(fēng)機(用于吸去CO2和推動氣流),與吹氣口三通管相通。測量前先將外筒裝水至水位表要求的刻度。開放氧氣接頭,使筒內(nèi)裝有一定量空氣,然后關(guān)閉氧氣口。轉(zhuǎn)動三通管的開關(guān),關(guān)閉肺量計,檢查是否漏氣。打開電源開關(guān),準(zhǔn)備好描筆及記錄紙。將描筆調(diào)節(jié)到記錄鼓的中部位置上。,134,,2.肺通氣功能的測定方法受試者將消毒橡皮接口連到三通管上,然后用牙齒咬住接口的兩條根,而將橡皮口片置于口

67、腔前庭,用鼻夾夾鼻。轉(zhuǎn)動三通開關(guān),用口平靜呼吸外界空氣,練習(xí)口呼吸數(shù)分鐘。轉(zhuǎn)動三通開關(guān),打開肺量計,再開慢速走紙擋開關(guān),啟動記錄鍵,即可測量并記錄呼吸氣量的變化。3.潮氣量的測量每次平靜呼吸時吸入和呼出空氣的容量,約500ml。進(jìn)行這項測量時,不要用力呼吸。記錄氣量并重復(fù)測3次。然后計算平均潮氣量,填入表5-1。,135,,,136,,4.補吸氣量測量正常吸氣之后再用力吸入空氣的容量,約2800ml。正常呼吸2—3次后盡量深吸氣,跟著

68、呼入肺量計內(nèi),只是到肋骨復(fù)位的正常呼氣,不要用力,記錄其氣量并重復(fù)3次。用測量得出的數(shù)字減去潮氣量即為補吸氣量,然后計算平均補吸氣量。5.補呼氣量測量正常呼氣之后再用力呼氣的氣量,約1000ml。正常呼吸2—3次后用力呼氣。重復(fù)3次,計算平均補呼氣量。6.肺活量測量肺內(nèi)全部可交換氣體(即潮氣+補吸氣+補呼氣)約4500ml。正常呼吸2—3次后深吸氣和呼氣,記錄氣量,并重復(fù)3次。7.用下列公式計算每分鐘呼吸通氣量?!〕睔?#215

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