石油降解菌的篩選及對石油污染土壤的修復(fù)實驗.pdf

1、隨著石油工業(yè)的發(fā)展，土壤石油污染問題日益嚴(yán)重。解決此問題的方法中微生物修復(fù)法是目前修復(fù)石油污染土壤的研究熱點，具有重要的意義和廣泛的應(yīng)用前景。微生物修復(fù)法存在的問題之一為缺少穩(wěn)定和適應(yīng)性強(qiáng)的菌株。本課題以長慶油田的稠油和長期被石油污染的土壤為材料，通過系統(tǒng)的富集分離篩選工作，獲得石油降解菌株。實驗中對菌種進(jìn)行了初步鑒定和性能研究，通過進(jìn)行復(fù)配，構(gòu)建細(xì)菌-真菌石油降解混合菌群，并利用GC-MS法研究了降解前后組分變化。利用構(gòu)建的石油降解混

2、合菌對油污染土壤進(jìn)行了初步的生物修復(fù)實驗，以期為石油污染土壤微生物修復(fù)法及其實際應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)和基礎(chǔ)。
　　 從長慶油田石油污染土壤和稠油中共純化得到細(xì)菌34株、霉菌5株、酵母菌2株。復(fù)篩及馴化后，得到效果較佳的細(xì)菌6株，分別編號為菌M-1、M-10、M-17、M-21、M-23、M-28，酵母菌1株：Y-1，霉菌2株：J-1、J-2。它們都可在石油平板培養(yǎng)基上生長。經(jīng)初步鑒定，菌M-1、M-10和M-23為假單胞菌屬(

3、Pseudomonas sp.)，M-17為產(chǎn)堿菌屬(Alealigenes sp.)，M-21為微桿菌屬(Microbacterium sp.)，M-28為芽孢桿菌屬(Bacillus sp.)。霉菌J-1為小克銀漢霉菌屬(Cunninghamella sp.)，J-2為鐮刀菌屬(Fusarium sp.)。酵母菌Y-1為酵母菌屬(Saccharomyces sp.)。細(xì)菌M-23，酵母菌Y-1對石油的耐受性較高。菌M-23的降解率和

4、降粘率分別達(dá)到了57.31％和32.25％，具有產(chǎn)表面活性劑的作用，對原油的排油圈直徑為1.75cm，可將原油乳化分散為直徑3μm～6μm的油滴。菌M-17降粘性次于菌M-23，菌M-21則可產(chǎn)生一定的表面活性劑。
　　 菌株進(jìn)行復(fù)配實驗，由1.5％菌M-23、1.5％菌M-21、1％菌M-17、1.5％菌Y-1組成的混合菌群(編號P1)石油降解率達(dá)到70.98％。P1和霉菌小克銀漢霉菌屬J-1構(gòu)建的細(xì)菌-真菌石油降解菌群T2有

5、最優(yōu)的降解效果，降解率達(dá)到75.35％。氣質(zhì)聯(lián)用分析其降解前后原油組分及含量的變化，發(fā)現(xiàn)菌株主要利用了C27以下的石油烴類，且原油中Pr/Ph、Pr/nC17和Ph/nC18的比值分別增加了0.641、0.922、0.395，說明對石油起到降解作用。石油降解菌群T2對含油量13.28mg/g的石油污染土壤進(jìn)行修復(fù)實驗，經(jīng)過110d的降解后，實驗組土壤的石油降解率可達(dá)到72.22％、79.71％，對照組的降解率為5.79％。添加鋸末的實驗