產(chǎn)表面活性劑石油降解菌的選育及對陜北石油污染土壤生物修復的試驗研究.pdf

1、隨著石油工業(yè)的發(fā)展，陜北地區(qū)土壤遭到了石油烴類物質(zhì)廣泛且嚴重的污染，這對當?shù)氐耐寥郎鷳B(tài)環(huán)境、居民生產(chǎn)生活及健康、經(jīng)濟的可持續(xù)發(fā)展都造成了嚴重危害。微生物修復技術(shù)以其經(jīng)濟、高效、安全、無二次污染等優(yōu)點，已成為治理石油污染土壤的一項重要、有效的技術(shù)手段。微生物表面活性劑能有效的提高石油烴的生物可利用性，從而大大促進微生物對石油烴的降解效率，而且比化學合成的表面活性劑更高效、具有更多優(yōu)點，因此將其用于強化石油污染土壤的生物修復越來越受到國內(nèi)外

2、廣泛的關(guān)注與青睞。
　　 本文是為“陜北地區(qū)石油烴類物質(zhì)嚴重污染土壤微生物修復的研究及應用”這一課題而進行的前期實驗室研究。圍繞如何實施并提高石油污染土壤原位生物修復的效率這條主線，本論文的研究重點是：選育出能產(chǎn)表面活性劑的優(yōu)良石油降解菌種，以擴大研究及應用的菌種資源、欲利用菌株同時具有的兩種高效性能提高對石油烴的降解效率；考察篩選得到的菌株與石油烴的利用及降解相關(guān)的性能；并用該菌對陜北地區(qū)石油污染土壤進行室內(nèi)模擬微生物修復試驗

3、，以期為陜北石油污染土壤的生物修復奠定基礎(chǔ)、提供菌株資料及理論依據(jù)，旨在探索一條高效、環(huán)保、經(jīng)濟且可持續(xù)的陜北石油污染土壤的微生物修復途徑。
　　 從陜北長慶油田井場周圍長期被石油污染的土壤中，通過富集培養(yǎng)、分離及對產(chǎn)表面活性劑和柴油降解性能的測定，最終篩選出一株高產(chǎn)表面活性劑的石油降解菌株LX-6，依據(jù)其形態(tài)學特征和生理生化特性初步鑒定其歸屬于假單胞菌屬(Pseudomonassp.)。用He-Ne激光對菌株LX-6進行誘變育

4、種，經(jīng)篩選得到一株理想的正突變株LX-6'(7)，通過檢測，其柴油降解率從原先的78.2％提高到84.7％，乳化層體積達5.07mL，排油圈為9.1cm，能使離心后的發(fā)酵上清液的表面張力降低到32.6mN/m，各項性能均比原始菌株有所提高，且該突變株具有遺傳穩(wěn)定性。
　　 采用萃取、柱層析、薄層層析、紅外(FT-IR)光譜分析、高效液相色譜(HPLC)檢測、CMC測定等實驗對菌株LX-6'(7)產(chǎn)出的生物表面活性劑進行提純稱量及

5、考察研究。研究結(jié)果為：提純品呈黃色粉狀晶體，產(chǎn)量為0.92 g/L，被鑒定為糖脂類、陰離子型表面活性劑，含鼠李糖和葡萄糖兩種單糖成分，其CMC為50mg/L，具有較強的耐高溫、耐酸堿、耐鹽的能力，且乳化性能的穩(wěn)定性良好。檢測該菌在不同溫度、pH和鹽度下的生長情況，結(jié)果表明其對溫度、PH和鹽度具有較強的耐受性，適應性較好，能夠應用的環(huán)境范圍廣。對菌株烴組分的利用種類進行初步考察，結(jié)果為該菌能利用、降解直鏈烴和芳香烴，但不能利用和降解環(huán)烷烴

6、。
　　 利用菌株LX-6'(7)對陜北地區(qū)石油污染土壤樣品進行為期60天的生物修復室內(nèi)試驗，定期測定試驗期間的微生物生長量、土壤脫氫酶活性、表面張力、TPH降解率，并用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀GC-MS對石油烴組分的降解效果進行詳細的定性定量分析。綜合各項檢測結(jié)果，該試驗效果理想，試驗土壤中的TPH降解率最大達到82.6％，尤其對石油烴中的C16-C24、C24-C28和＞C28組分有較高的降解效果。菌株LX-6'(7)顯示出在陜