防腐效能

1、作者：angel.1680時(shí)間：200710917:41:25[分享分享]防腐體系效能挑戰(zhàn)實(shí)驗(yàn)防腐體系效能挑戰(zhàn)實(shí)驗(yàn)防腐體系效能挑戰(zhàn)實(shí)驗(yàn)：1、CTFA推薦的防腐單次挑戰(zhàn)試驗(yàn)CTFA推薦的經(jīng)典的為期28天的防腐單次挑戰(zhàn)實(shí)驗(yàn)，是將防腐劑混入配方基質(zhì)中，然后一次性接入若干種類、一定數(shù)量的微生物進(jìn)行挑戰(zhàn)，將樣品存放于適當(dāng)?shù)臏囟认?，定期抽樣檢測(cè)其中殘存的微生物，并根據(jù)微生物的數(shù)量變化情況評(píng)價(jià)樣品的抗菌效果。2、試驗(yàn)儀器恒溫培養(yǎng)箱、顯微鏡、滅菌平皿：

2、直徑為9cm、pH計(jì)、高壓滅菌鍋、酒精燈、錐形燒瓶、量筒、滅菌刻度吸管：10ml、2ml、1ml試管。3、培養(yǎng)基和試劑生理鹽水、SCDLP液體培養(yǎng)基、卵磷脂、吐溫80營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基。4、挑戰(zhàn)用微生物提取菌珠：雜菌由實(shí)驗(yàn)室從污染產(chǎn)品中得出菌種。菌種培養(yǎng)：實(shí)驗(yàn)前，將各菌種接種于合適的培養(yǎng)基中，于37℃（細(xì)菌）培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細(xì)菌培養(yǎng)48小時(shí)，挑選典型的菌落于滅菌的液體培養(yǎng)基中制成一定濃度的細(xì)菌和霉菌混合懸液，置于冰箱冷藏備用。5、微生物挑戰(zhàn)實(shí)驗(yàn)稱

3、取8種化妝品基質(zhì)樣品各100克，加入滅菌的容器內(nèi)，加入混合細(xì)菌懸液，充分混勻。每克樣品含細(xì)菌量為5106CFU克或CFUml。然后置于28℃下。在接菌的0、7、14、21、28天取樣分析：準(zhǔn)確稱取10克樣品，加到含有玻璃小球和90ml滅菌生理鹽水的錐形瓶?jī)?nèi)，充分震蕩混勻，此懸液為1：10稀釋液；然后再用生理鹽水按1：10依次稀釋。按平板傾注法計(jì)數(shù)樣品中含菌量細(xì)菌培養(yǎng)37℃下48小時(shí)。6、判定標(biāo)準(zhǔn)1、第28天時(shí)，樣品中含細(xì)菌103cfug

4、(ml)，該樣品不能通過微生物攻擊的挑戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)，表明樣品的防腐體系不能有效地起到抑制微生物的作用，產(chǎn)品在生產(chǎn)、貯藏和使用中很容易受到微生物的污染。2、第28天時(shí)，樣品中含細(xì)菌在102cfug(ml)103cfug(ml)，該樣品有條件地通過挑戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)，8.接種原為純菌（Purecultureinoculum）是允許是9.接種原有標(biāo)準(zhǔn)化菌量（cfu）細(xì)菌NA1108mL1108mL酵母菌黴菌NA1107mL1108mL10.挑戰(zhàn)最後濃度菌

5、量（cfu）細(xì)菌1106mL1106mL105~106mL酵母菌黴菌1104mL1105mL105~106mL11.接種原的量1%最後容積1mL0.5~1%最後容積12.檢體量20gmL100gNA13.取樣時(shí)間（天）01271421280714212807142814.使用之中和劑3種一般肉湯分開方法：E105485是，但在不同指引的章節(jié)15.中和劑評(píng)估無無有16.對(duì)照組(Controls)無有無17.防腐劑效能評(píng)估依據(jù)細(xì)菌減少真菌減

6、少7天，99.9%減少7天，90.0%減少7天，99.9%減少28天，90.0%減少或在試驗(yàn)期間沒有增加14天，99.9%減少14天，與最初濃度相同或較低註：表211列出微生物名單NA，不適用。表3：用於防腐效能試驗(yàn)之培養(yǎng)基（MediaUsedinPreservativeEfficacyTesting）瓊脂培養(yǎng)基瓊脂培養(yǎng)基（Agar）微生物微生物（Microganisms）目的目的（Purpose）方法方法（Procedure）Tryp

7、ticsoyagar（TSA）細(xì)菌一般檢驗(yàn)CTFANutrientagar（NA）細(xì)菌一般檢驗(yàn)CTFAASTMEugonagar細(xì)菌及真菌一般檢驗(yàn)CTFASabourauddextroseagar（SDA）酵母菌及黴菌一般檢驗(yàn)CTFAUSPPotatodextroseagar（PDA）酵母菌及黴菌一般檢驗(yàn)CTFAMycological(mycohil)agar真菌一般檢驗(yàn)CTFAMycophilagarpH4.7黴菌嗜酸菌酵母菌(腐生)

8、一般檢驗(yàn)CTFAASTMLetheenagar細(xì)菌酵母菌、黴菌及厭氧菌中和一般檢驗(yàn)CTFAASTMTrypticdigestofcaseinsoyagar（TSBwagar）細(xì)菌酵母菌及黴菌一般檢驗(yàn)CTFAUSPInfusionagar（IA）細(xì)菌一般檢驗(yàn)CTFAThioglycollateagar細(xì)菌中和一般檢驗(yàn)CTFATryptoneglucoseyeastextractagar（TGEA）細(xì)菌一般檢驗(yàn)CTFADeyEngleyag

9、ar（DE）細(xì)菌中和一般檢驗(yàn)CTFATrypticasesoyagarwithlecithinPolysbate80（TSAwLectween80）細(xì)菌中和一般檢驗(yàn)CTFAUSPSoybeancaseindigestagar（SCDA，TSA）細(xì)菌酵母菌及黴菌一般檢驗(yàn)USPLetheenbrothwithlecithin（LBwLec）細(xì)菌中和稀釋CTFALetheenbrothwithlecithinTritonX100（LBwLec