防腐挑戰(zhàn)實(shí)驗(yàn)

1、第一部分第一部分防腐挑戰(zhàn)實(shí)驗(yàn)調(diào)研結(jié)果防腐挑戰(zhàn)實(shí)驗(yàn)調(diào)研結(jié)果1實(shí)驗(yàn)樣品實(shí)驗(yàn)樣品樣本要求新鮮，沒有被微生物污染，一般每個(gè)樣本為300g。2微生物挑戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)微生物挑戰(zhàn)性實(shí)驗(yàn)2.1實(shí)驗(yàn)菌株實(shí)驗(yàn)菌株不同國(guó)家、組織、企業(yè)對(duì)挑戰(zhàn)實(shí)驗(yàn)選擇的測(cè)試菌種有一定差異（如表1），國(guó)內(nèi)參照美國(guó)化妝品、香精和洗滌劑協(xié)會(huì)（CTFA）推薦的菌種（因其較具代表性，如表2所示），所以更為恰當(dāng)。（注意菌株來源問題：同屬一個(gè)種的細(xì)菌來源不同，菌株不同，（注意菌株來源問題：同屬一個(gè)

2、種的細(xì)菌來源不同，菌株不同，MIC值不值不同）同）表1某些國(guó)家、組織、企業(yè)用于化妝品微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)的測(cè)試菌株菌株美國(guó)(藥典)美國(guó)(ISP公司)英國(guó)(藥典)德國(guó)(Henkel公司)德國(guó)(S&M公司)白假絲酵母√√√√√黑曲霉√√√√√紅色青霉√綠色木霉√繩狀青霉√大腸埃希氏菌√√√√鎘綠假單胞菌√√√√金黃色葡萄球菌√√√√√糞腸球菌√產(chǎn)氣腸桿菌√表皮葡萄球菌√日勾維腸桿菌√2.2培養(yǎng)基培養(yǎng)基牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、瓊脂培養(yǎng)基2.3試驗(yàn)用菌液

3、的配置試驗(yàn)用菌液的配置（1）標(biāo)準(zhǔn)懸液的配制1%硫酸9.9ml與1%氯化鋇0.1ml，混合后配制成的懸液濃度為3108cfuml，此懸液再做3倍稀釋。（2）細(xì)菌菌懸液的配制實(shí)驗(yàn)前將菌株接種到各個(gè)培養(yǎng)基斜面上，36攝氏度恒溫培養(yǎng)48小時(shí)。將已培養(yǎng)好的活性菌種，用滅菌生理鹽水清洗到滅菌錐形瓶中，充分振蕩搖勻。用移液槍從錐形瓶中吸取菌液作稀釋，濁度和標(biāo)準(zhǔn)懸液的濁度（3108cfuml）相同為止；此時(shí)的稀釋菌液再做3倍稀釋，即為所需的1108cf

4、uml的菌懸液，做細(xì)菌總數(shù)確定細(xì)菌數(shù)。（3）霉菌菌懸液的配制將已培養(yǎng)好的活性菌種，用滅菌的生理鹽水清洗到滅菌錐形瓶中，充分振蕩搖勻；用移液槍從錐形瓶中吸取菌液作依次的10倍稀釋，每次的稀釋用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，必須5個(gè)中格的霉菌總數(shù)在190～210，落在此范圍內(nèi)的菌懸液為我們所需的1108cfuml的霉菌菌懸液，做霉菌總數(shù)確定霉菌數(shù)。2.4接種接種2.4.1接種方式接種方式（1）單菌接種：每種測(cè)試菌株單獨(dú)做一個(gè)挑戰(zhàn)試驗(yàn)。這種方法的優(yōu)點(diǎn)是容易