冷沉淀的制備及應用范圍

1、冷沉淀的制備及應用范圍冷沉淀的制備及應用范圍冷沉淀是新鮮冰凍血漿在1~6℃條件下不溶解的白色沉淀物，它是P00l博士在19641965年期間發(fā)現(xiàn)的，被加熱37℃時呈溶解的液態(tài)，主要含有第Ⅷ因子、纖維蛋白原、血管性血友病因子(VWF)、第ⅩⅢ、以及纖連蛋白等成分。現(xiàn)就冷沉淀的制備、臨床應用及效果給大家介紹一下。1冷沉淀的制備與質(zhì)量1.1冷沉淀的制備選取健康無償獻血者各項檢查指標合格采集400mL全血后6~8h內(nèi)經(jīng)分離新鮮液體血漿于50℃凍

2、成型后的新鮮冰凍血漿放置30℃保存。制備冷沉淀時將30℃保存血漿放置于1~6℃環(huán)境下溶解、分離出冷不溶物放置30℃凍存或直接應用于臨床。1.1.1離心法(Pool)1.1.1.1原料血漿的融化1.1.1.1.14℃冷藏箱法：將原料血漿從30℃冰箱內(nèi)取出，置于1~6℃冷藏箱內(nèi)緩慢融化。1.1.1.1.2水浴融化法：將原料血漿從30冰箱取出，值室溫5分鐘，待雙聯(lián)袋間的塑料管變軟后，放入15℃水浴箱內(nèi)，啟動搖擺裝置，約30分鐘后溫度調(diào)至4℃，

3、當原料血漿袋全部融化時(約60~90分鐘)，然后把水溫調(diào)至0~2℃。1.1.1.2融化后的原料漿于0~4℃以離心力2000g離心10分鐘，使冷沉淀下沉于塑料袋底部，快速去除上清液剩20~30mL左右即為冷沉淀。1.1.2連續(xù)融化虹吸法(Mason)將原料漿袋置于1~6℃水浴裝置中，另一空袋懸于水浴箱外且位置低于血漿袋，兩袋之間形成一定的落差，血漿溶化后隨時被虹吸至空袋內(nèi)，當融化至剩下40~50ml時，閉合導管，阻斷虹吸，將冰凍血漿袋和冷

4、沉淀熱和斷離。1.2冷沉淀的質(zhì)量冷沉淀質(zhì)量受溫度、時間以及其他各種因素影響。從采血到制備過程中室溫制備原料漿會使第Ⅷ因子含量偏低說明溫度對冷沉淀質(zhì)量有影響。經(jīng)研究使用亞甲藍光照法(MB)進行病毒滅活的冷沉淀與原血漿比較Ⅷ因子和血管性血友病因子(Vwf)活性分別別下降30%和11%纖維蛋白原濃度下降40%。血液4℃保存18h其Ⅷ因子含量與6℃保存6~8h相比下降23%冷沉淀制備時間對凝血因子含量有影響FFP一旦融化Ⅷ因子活性隨時間延長而明

5、顯降低12h衰減41.17%24h衰減42.82%改良水浴融化虹吸法制備冷沉淀FⅧ含量明顯高于Pool。因此制備冷沉淀一定要控制好各方面影響因素包括時間、溫度、制備等同時選擇制備方法采血過起重要作用。冷沉淀通過形成纖維蛋白膜對潰瘍創(chuàng)面有機械性牽拉作用從而促使創(chuàng)口收縮對腫瘤患者放療后口腔潰瘍創(chuàng)面愈合有明顯作用。大量Ⅷ因子和纖連蛋白隨冷沉淀輸入使體內(nèi)凝血因子和纖連蛋白在短期內(nèi)迅速上升可及時為患者補充各種凝血因子對凝血功能有促進作用。高濃度的

6、纖連蛋白作為“趨化因子”促使單核細胞、上皮細胞、成纖維細胞等向創(chuàng)面移動并與壞死組織碎片、某些細菌結(jié)合促進吞噬凈化傷口并與成纖維細胞、纖維蛋白凝塊共同形成支架加快上皮生長和小血管開放。冷沉淀還可黏附結(jié)構(gòu)蛋白充當間質(zhì)使它們相互黏附加固細胞間結(jié)合防止腫瘤細胞擴散。由于冷沉淀富含纖維蛋白原、高濃度的纖連蛋白、高濃度的Ⅷ因子及ⅩⅢ因子等多種凝血因子故其有利于凝血酶的形成可抑制創(chuàng)面炎癥、抑制細菌生長促進炎癥吸收減少滲出是促進手術(shù)、燒傷創(chuàng)面結(jié)痂快、痂

7、皮薄且平整的重要因素。2.3冷沉淀的臨床應用心臟手術(shù)由于體外循環(huán)、血液稀釋、血小板破壞、心體溫變化及凝血因子耗竭等而出現(xiàn)凝血功能障礙術(shù)后易出血、滲血等術(shù)后使用冷沉淀可明顯減少輸血劑量且凝血功能指標明顯改善[。冷沉淀的應用時機也是確定止血效果的重要因素術(shù)中及時使用可有效控制出血減少血液制品的輸注并減少并發(fā)癥和死亡率。冷沉淀中富含Ⅷ因子、纖維蛋白原、血管性血友病因子、ⅩⅢ因子、纖連蛋白等輸入體內(nèi)后激活形成活性物質(zhì)有利于凝血酶的形成對止血起到

8、重要作用。大量輸血會引起凝血因子減少術(shù)中大量輸血患者術(shù)后風險較高:術(shù)后幾天肝功能很差易感染及發(fā)生胃腸道并發(fā)癥易發(fā)生排斥反應縮短對激素的耐受期和生存率下降而在術(shù)中使用大量冷沉淀經(jīng)臨床資料顯示止血效果好不良反應少在降低輸血風險的同時提高了手術(shù)的成功率[。肝移植患者術(shù)中易發(fā)生凝血功能紊亂原因是肝病本身造成的凝血因子減少、血小板減少或功能不全。冷沉淀可以補充各種凝血因子減少術(shù)中出血也減少感染機會。在心臟、肝臟等外科手術(shù)以及整形外科、燒傷清創(chuàng)手術(shù)

9、中使用冷沉淀對控制出血降低創(chuàng)面感染率促進燒、燙傷創(chuàng)面的愈合是比較妥當?shù)?。另外冷沉淀中纖連蛋白促進巨噬細胞吞噬作用增加吞噬細胞吞噬功能術(shù)后抗感染和消炎作用顯著。失血性休克患者在大量輸血時血小板消耗和低體溫可以共同作用引起微血管出血并發(fā)休克在抗休克、糾正低體溫基礎上可輸注血小板和富含凝血因子的血液制品尤其是急性大出血患者輸注冷沉淀聯(lián)合單采血小板后凝血指標顯著改善24h有效止血率達到82.3%。對于發(fā)展到彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)的患者則需要