有機化學2色譜法

1、實驗名稱實驗名稱:薄層色譜和柱色譜薄層色譜和柱色譜一、實驗目的：一、實驗目的：1、學習薄層色譜和柱色譜技術(shù)的原理和應用。2、掌握薄層色譜和柱色譜分離技術(shù)和操作要點。3、掌握如何正確的配置展開劑。二、實驗原理二、實驗原理色譜法的基本原理，是利用混合物各組分在固定相和流動相中分配平衡常數(shù)的差異。簡單地說就是，當流動相流經(jīng)固定相時，由于固定相對各組分的吸附或溶解性能的不同，使吸附力較弱或溶解度較小的組分在固定相中移動的速度較快，在多次反復平衡

2、過程中導致各組分在固定相中形成了分離的“色帶”，從而得到分離。三、主要試劑規(guī)格及用量三、主要試劑規(guī)格及用量1%偶氮苯的氯仿溶液，1%蘇丹Ⅲ溶液，0.5%的羧甲基纖維素鈉（CMC）水溶液，硅膠G，體積比為9:1的正庚烷乙酸乙酯。四、實驗步驟四、實驗步驟（一）薄層色譜實驗步驟：（一）薄層色譜實驗步驟：1、薄層板的制備.2、取兩塊薄層板，分別在距一端1cm處用鉛筆輕輕地畫一條線，作為起始線。用分別兩根毛細管，分別取少量1%蘇丹Ⅲ溶液、1%偶氮

3、苯的氯仿溶液和其混合液放在起始線上，取兩個樣點，且兩樣點相距1到1.5厘米，且樣點的直徑不超過2毫米。如果樣點顏色太淺，可以等其變干后在重復幾次。入展開劑中。4、待溶劑前沿離層析板頂端僅1~2mm時方能取出，否則色點分離不完全。但溶劑不能沖頂，否則色點會擴散而影響分離效果。5、展開結(jié)束后，應立即記下溶劑前沿的位置，并把色譜圖照原樣及時記錄在報告本上，注明各點的顏色，并計算各點的Rf值。6、本實驗的色譜圖上可出現(xiàn)3~6個色點，在此范圍內(nèi)色

4、點越多，分離效果越好。7、薄層層析不僅可用來分離有色物質(zhì)，也可分離無色物質(zhì)。8、操作要小心，特別是點樣時，不要損壞層析板。9、實驗完畢倒掉展開劑，層析缸不用洗。（二）柱色譜1、吸附劑必須均勻地填在柱內(nèi)，沒有氣泡、沒有裂縫，否則將影響洗脫和分離。2、加入沙子的目的是使加料時不致把吸附劑沖起，影響分高效果。若無沙子，也可用濾紙覆蓋在吸附劑表面。3、為了保持柱子的均一性，使整個吸附劑浸泡在溶劑或溶液中是必要的。否則當柱中溶劑或溶液流干時，就會