沉降菌監(jiān)測(cè)方法

1、規(guī)范性引用文件本標(biāo)準(zhǔn)參考了ISO146981《潔凈間以及相關(guān)環(huán)境控制第1部分：微生物控制》，ISOTS111331：2000（英文版）《食品和動(dòng)物飼料的微生物學(xué)培養(yǎng)基制備和生產(chǎn)指南第1部分：實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基制備的質(zhì)量保證通用指南》。本標(biāo)準(zhǔn)代替GBT162941996《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)試方法》。本標(biāo)準(zhǔn)與GBT162941996的主要區(qū)別為：—增加了確定最少采樣點(diǎn)數(shù)目的方法；—修改了原標(biāo)準(zhǔn)4.8.3.2，改為“4.10.2采用大豆

2、酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后，在30℃~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于2d，采用沙氏培養(yǎng)基（SDA）配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后，在20℃~25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于5d?！保弧緲?biāo)準(zhǔn)增加了5.8“日常監(jiān)控”的內(nèi)容，增加了潔凈室（區(qū)）空氣微生物濃度控制的糾偏限度和警戒限度的設(shè)立和如何確定取樣頻次的內(nèi)容。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B是規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄C是資料性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局提出并歸口。沉降菌settl

3、ingmicrobe用本標(biāo)準(zhǔn)提及的方法收集空氣中的活微生物粒子，通過專門的培養(yǎng)基，在適宜的生長(zhǎng)條件下繁殖到可見的菌落數(shù)。3.2沉降菌菌落數(shù)settlingmicrobeplatecount規(guī)定時(shí)間內(nèi)每個(gè)平板培養(yǎng)皿收集到空氣中沉降菌的數(shù)目，以個(gè)皿表示。方法提要本測(cè)試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)

4、，并以此來評(píng)定潔凈室（區(qū)）的潔凈度。4.2人員的職責(zé)及培訓(xùn)潔凈室（區(qū)）的測(cè)試人員應(yīng)進(jìn)行本專業(yè)的培訓(xùn)并獲得相應(yīng)資格后才能履行對(duì)潔凈室（區(qū)）測(cè)試的職責(zé)，其中包含涉及的衛(wèi)生知識(shí)和基本微生物知識(shí)。潔凈室（區(qū)）的測(cè)試人員應(yīng)選與生產(chǎn)操作的空氣潔凈度級(jí)別要求相適應(yīng)的穿戴方式，外面的衣服不能帶進(jìn)100000級(jí)以上的區(qū)域。4.3儀器儀器應(yīng)包括：a）培養(yǎng)皿；b）培養(yǎng)基（見本標(biāo)準(zhǔn)附錄B）；c）恒溫培養(yǎng)箱；d）高壓蒸汽滅菌器。4.3.1培養(yǎng)皿一般采用φ90mm

5、15mm規(guī)格的培養(yǎng)皿。4.3.2培養(yǎng)基大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）或沙氏培養(yǎng)基（SDA）或其他用戶認(rèn)可并經(jīng)驗(yàn)證了的培養(yǎng)基。其配制方法見附錄B。4.3.3恒溫培養(yǎng)箱必須定期對(duì)恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行校驗(yàn)。5.2測(cè)試狀態(tài)靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種狀態(tài)均可進(jìn)行測(cè)試。靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多于2人。沉降菌測(cè)試前，被測(cè)潔凈室（區(qū)）由使用者決定是否需要預(yù)先消毒。測(cè)試報(bào)告中應(yīng)標(biāo)明測(cè)試時(shí)所采用的狀態(tài)和室內(nèi)測(cè)試人員數(shù)。5.3測(cè)試時(shí)間5.3.1在空態(tài)或靜態(tài)a測(cè)試時(shí)，對(duì)單

6、向流潔凈室（區(qū)）而言，測(cè)試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于10min后開始。對(duì)非單向流潔凈室（區(qū)），測(cè)試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于30min后開始。在靜態(tài)b測(cè)試時(shí)，對(duì)單向流潔凈室（區(qū)），測(cè)試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)過10min自凈后開始；對(duì)非單向流潔凈室（區(qū)），測(cè)試宜在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)過20min自凈后開始。5.3.2在動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，則須記錄生產(chǎn)開始的時(shí)間以及測(cè)試時(shí)間。5.4沉降菌菌落數(shù)計(jì)算5.4.1采樣點(diǎn)數(shù)

7、量及其布置5.4.1.1最少采樣點(diǎn)數(shù)目沉降菌測(cè)試的最少采樣點(diǎn)數(shù)目可參照GBT162922010。5.4.1.2采樣點(diǎn)的位置沉降菌的采樣點(diǎn)位置可參照GBT162922010。a）工作區(qū)采樣點(diǎn)位置離地0.8m~1.5m左右（略高于工作面）；b）可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)。采樣點(diǎn)布置的規(guī)則見附錄A。5.4.2最少培養(yǎng)皿數(shù)在滿足最少采樣點(diǎn)數(shù)目的同時(shí)，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，見表1。表1最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級(jí)別最少培養(yǎng)皿數(shù)（φ90mm）

8、10014100002100000230000025.4.3采樣次數(shù)每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次。5.4.4采樣注意事項(xiàng)5.4.4.1對(duì)于單向流潔凈室（區(qū)）或送風(fēng)口，采樣器采樣口朝向應(yīng)正對(duì)氣流方向；對(duì)于非單向流潔凈室（區(qū)），采樣口向上。5.4.4.2布置采樣點(diǎn)時(shí)，至少應(yīng)盡量避開塵粒較集中的回風(fēng)口。5.4.4.3采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè)，并盡量少走動(dòng)。5.4.4.4應(yīng)采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對(duì)樣本的污染。5.4.4.