2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩4頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、熒光定量熒光定量PCR之絕對(duì)定量分析之絕對(duì)定量分析——標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制1.絕對(duì)定量定義絕對(duì)定量是用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)推算未知樣品的量。將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至不同濃度,作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)。以標(biāo)準(zhǔn)品拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo),以測(cè)得的CT值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)未知樣品進(jìn)行定量時(shí),根據(jù)未知樣品的CT值,即可在標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到樣品的拷貝數(shù)。Log(起始濃度)與循環(huán)數(shù)呈線性關(guān)系,通過(guò)已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品可作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,即得到

2、該擴(kuò)增反應(yīng)存在的線性關(guān)系由樣品CT值,就可以計(jì)算出樣品中所含的模板量2.絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品的一些標(biāo)準(zhǔn)必須用與擴(kuò)增目的基因相同的引物進(jìn)行擴(kuò)增,并且擴(kuò)增效率相同標(biāo)準(zhǔn)品必須是經(jīng)過(guò)準(zhǔn)確定量的(我們通常用的是ASP3700紫外光可見(jiàn)光微量分光光度計(jì))標(biāo)準(zhǔn)品必須是標(biāo)準(zhǔn)化的(例如,同一化的細(xì)胞數(shù))在每組實(shí)驗(yàn)時(shí),必須用相同的閾值設(shè)定來(lái)確定CT值標(biāo)準(zhǔn)品可以是含有目的基因的線性化的質(zhì)粒DNA,也可以是比擴(kuò)增片段長(zhǎng)的純化后的PCR產(chǎn)物,當(dāng)然也可以是基因組D

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論