大型海藻緣管滸苔(Enteromorphalinza)對兩種海洋微藻克生效應的初步研究及克生物質(zhì)的分離與鑒定.pdf

1、相生相克是水域生態(tài)系統(tǒng)中普遍存在的自然現(xiàn)象，包括各種生物之間的生長促進和抑制作用。相生相克是一直以來都是化學生態(tài)學領(lǐng)域研究的熱門話題，對大型海藻與微藻之間克生作用的研究，一方面可以作為控制赤潮的一種生物方法，另一方面，隨著石莼屬和滸苔屬大型綠藻引發(fā)的“綠潮”災害的日益突出，研究綠潮原因種與其周圍微藻之間的克生作用，也能為有效利用這些綠藻資源，探索“綠潮”發(fā)生機制提供科學依據(jù)。因此，對于綠潮原因種與微藻之間克生作用的研究具有十分重要的現(xiàn)實

2、意義。
　　 本實驗研究了大型綠藻緣管滸苔(Enteromorpha linza)對山東近岸兩種典型的海洋微藻--微小原甲藻(Prorocentrum minimum)和青島大扁藻(Platymonashelgolandica--的克生作用，初步分離、鑒定了其抑制兩種微藻生長的克生物質(zhì)，探討了緣管滸苔對兩種微藻克生作用的化學物質(zhì)本質(zhì)。主要實驗結(jié)果如下：
　　 1.緣管滸苔對微小原甲藻和青島大扁藻克生作用
　　 實

3、驗生態(tài)條件下在共培養(yǎng)體系中研究了不同濃度的(0、0.625、1.25、2.5、5和10gFW/L)緣管滸苔新鮮組織、干粉末、水溶性組織抽提液及培養(yǎng)液濾液對微小原甲藻和青島大扁藻種群增長的影響，結(jié)果表明：(1)緣管滸苔新鮮組織和干粉末均能顯著抑制兩種微藻的生長(P＜0.05)，且抑制作用隨初始接種濃度的升高而加強(P＜0.05），較高濃度的處理組(5和10gFW/L)對微小原甲藻甚至有滅殺作用，而干粉末在共培養(yǎng)后期對兩種微藻的抑制作用逐漸

4、減弱；新鮮組織對微小原甲藻和青島大扁藻的EC50分別為1.41和2.50gFW/L，干粉末的分別為0.67和1.03gDW/L，說明微小原甲藻對緣管滸苔敏感性強于青島大扁藻，且緣管滸苔干粉末對兩種微藻的作用效果強于新鮮組織；(2)各個濃度緣管滸苔水溶性抽提液在共培養(yǎng)的前96h對兩種微藻的生長均具有抑制作用，之后多數(shù)處理組微藻恢復生長，培養(yǎng)末期與對照無明顯差異（P＞0.05）；(3)緣管滸苔培養(yǎng)液濾液對微小原甲藻的生長具有明顯的抑制作用，

5、與對照組相比差異顯著(P＜0.05)，·而對青島大扁藻生長的影響較小，與對照組相比無明顯變化(P＞0.05）；(4)實驗結(jié)果說明，緣管滸苔可能向環(huán)境中分泌克生物質(zhì)，從而對共培養(yǎng)體系中的微藻產(chǎn)生克生效應，這種效應的強弱具有種間差異。
　　 2.緣管滸苔組織中克生物質(zhì)的提取及其對微小原甲藻和青島大扁藻生長的影響
　　 用有機溶劑甲醇對緣管滸苔鮮組織進行了抽提，并對所得到的甲醇粗提物進行液液萃取分離，得到四種不同極性的有機溶劑

6、抽提相，其極性高低順序為石油醚＞乙酸乙酯＞正丁醇＞蒸餾水。將不同濃度的四相有機溶劑抽提物作用于兩種目標微藻，檢測其克生活性。結(jié)果表明，與僅以溶劑處理的對照組相比，石油醚相對兩種微藻的克生作用最強烈(P＜0.05），乙酸乙酯相次之（P＜0.05），正丁醇相和蒸餾水相作用效果不顯著（P＞0.05）。
　　 3.緣管滸苔組織中克生物質(zhì)的鑒定
　　 對緣管滸苔石油醚相和乙酸乙酯相進行氣相色譜-質(zhì)譜(GC/MS)聯(lián)用分析，并核對標