生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告-坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備

1、坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備和神經(jīng)干動(dòng)作電位的觀察與傳坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備和神經(jīng)干動(dòng)作電位的觀察與傳導(dǎo)速度的測(cè)定導(dǎo)速度的測(cè)定1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康模?.學(xué)習(xí)蛙類動(dòng)物雙毀髓的實(shí)驗(yàn)方法。2.學(xué)習(xí)并掌握坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的制備方法。3.觀察蛙坐骨神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位的基本波形，并了解其產(chǎn)生的原理。4.學(xué)習(xí)蛙和蟾蜍離體神經(jīng)干上神經(jīng)沖動(dòng)傳導(dǎo)速度的方法和原理。2、實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料：1.實(shí)驗(yàn)對(duì)象：蟾蜍2.實(shí)驗(yàn)器材：常規(guī)手術(shù)器械（粗剪刀、手術(shù)剪、眼科剪、手

2、術(shù)鑷、眼科鑷）蛙板、蛙釘、探針、鋅銅弓、玻璃分針、培養(yǎng)皿、任氏液、滴管、手術(shù)線、PC機(jī)、信號(hào)采集處理系統(tǒng)、神經(jīng)屏蔽盒等。3、實(shí)驗(yàn)原理：實(shí)驗(yàn)原理：神經(jīng)干在受到有效刺激以后可以產(chǎn)生復(fù)合動(dòng)作電位，標(biāo)志著神經(jīng)發(fā)生興奮。如果在離體神經(jīng)干的一段施加刺激，從另一端引導(dǎo)傳來(lái)的神興奮沖動(dòng)，可以記錄出雙相電位，加入在引導(dǎo)的兩個(gè)電極之間將神經(jīng)干麻醉或損傷，阻斷其興奮傳導(dǎo)能力，這時(shí)候記錄出的動(dòng)作電位就成為單相電位。神經(jīng)細(xì)胞的動(dòng)作電位是以全或無(wú)的方式產(chǎn)生的。但是

3、，復(fù)合動(dòng)作電位的幅值在一定刺激強(qiáng)度下是隨刺激強(qiáng)度的增加而增大的。如果在遠(yuǎn)離刺激點(diǎn)的不同距離處分別引導(dǎo)離體神經(jīng)干動(dòng)作電位，兩引導(dǎo)點(diǎn)之間的距離為m，在兩引導(dǎo)點(diǎn)分別引導(dǎo)出的動(dòng)作電位的時(shí)相差為s。即可按照公式v=ms來(lái)計(jì)算出興奮的傳導(dǎo)速度。蛙類的坐骨神經(jīng)干屬于混合性神經(jīng)，其中包含有粗細(xì)不等的各種纖維，其直徑一般為329um其中直徑最粗的有髓纖維為A類纖維，傳導(dǎo)速度在正常室溫下為3540ms。神經(jīng)每興奮一次極其在興奮以后的回復(fù)過(guò)程中，其興奮性都要

4、經(jīng)歷一次周（5）制備坐骨神經(jīng)標(biāo)本取出一側(cè)下肢，用蛙釘固定于蛙板上，固定時(shí)要注意使坐骨神經(jīng)和腓腸肌朝上。先用玻璃分針沿脊柱側(cè)游離坐骨神經(jīng)，神經(jīng)干應(yīng)盡可能分離的長(zhǎng)一些。要求上自脊髓附近的主干，下沿腓總神經(jīng)或脛神經(jīng)一直分離至踝關(guān)節(jié)附近止。坐骨神經(jīng)在膝關(guān)節(jié)后分為脛神經(jīng)和腓神經(jīng)兩支，如要制備腓神經(jīng)，則在分叉的下端將脛神經(jīng)剪斷，膝關(guān)節(jié)附近的腓神經(jīng)表面有肌肉和筋膜覆蓋，仔細(xì)分離并沿腓腸肌溝一直下行分離至跟踺，然后將棉線用任氏液浸泡后，在脊髓側(cè)坐骨神經(jīng)

5、起始處和跟腱處將神經(jīng)結(jié)扎，在結(jié)扎的外側(cè)將神經(jīng)干剪斷，制成坐骨神經(jīng)腓神經(jīng)標(biāo)本。另外，也可保留脛神經(jīng)而將腓神經(jīng)剪斷，制成坐骨神經(jīng)脛神經(jīng)標(biāo)本。將制備好的神經(jīng)干標(biāo)本浸于任氏液中數(shù)分鐘，待其興奮性穩(wěn)定后開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。注意在分離過(guò)程中，應(yīng)把神經(jīng)周圍的結(jié)締組織去除干凈，并把神經(jīng)的細(xì)小分支剪斷，但要注意不要用金屬器械碰觸神經(jīng)，也不要對(duì)神經(jīng)過(guò)度牽拉。實(shí)驗(yàn)期間應(yīng)不斷滴加任氏液使神經(jīng)保持濕潤(rùn)。制備好的標(biāo)本應(yīng)如下：圖1坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本示意圖2、神經(jīng)干動(dòng)作電位的觀