蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌標本制作及不同頻率對肌肉收縮的影響

1、蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌標本制作及不同強度肌肉收縮的影響一`蟾蜍坐骨神經(jīng)腓腸肌標本制作1．目的掌握制備具有正常興奮收縮功能的蛙類坐骨神經(jīng)腓腸肌標本基本操作技術(shù)，掌握蛙類手術(shù)器械的使用方法．2.材料蟾蜍或蛙，任氏液，鋅銅弓3.方法１．搗毀腦髓 取一只，用左手握住，以食指壓其頭部前端使其盡量前俯，右手持探針自枕骨大孔處垂直刺入，到達椎骨，即將探針改變方向刺入顱腔，向各側(cè)不斷攪動，徹底搗毀腦組織；再將探針原路退出，刺向尾側(cè)，捻動探針使逐漸刺入整

2、個椎管內(nèi)，搗毀脊髓。此時蟾蜍下頜呼吸消失，四肢松軟，即成為一搗毀脊髓的蟾蜍，否則須按上法再行搗毀。２．剪除驅(qū)干上部及內(nèi)臟 用粗剪刀在顱骨后方剪斷脊柱。左手握住蟾蜍脊柱，右手講粗剪刀沿兩側(cè)剪開腹壁。此時軀干上部及內(nèi)臟即全部下垂。剪除全部軀干上部及內(nèi)臟組織，棄于盆內(nèi)３．剝皮 避開神經(jīng)，用右手拇指和食指夾住脊柱，左手捏住皮膚邊緣，逐步向下牽拉剝離皮膚。拉至大腿時，如阻力較大，可先剝下一側(cè)，再剝另一側(cè)。將全部皮膚剝除后，講標本置于盛有任

3、氏液的培養(yǎng)皿中４．洗凈雙手和用過的全部手術(shù)器械５．分離兩腿 避開坐骨神經(jīng)，用粗剪刀從背側(cè)部剪去骶骨，然后沿中線將脊柱剪成左右兩瓣，再從恥骨聯(lián)合中央剪開，講以分離的標本浸于任氏液中６．游離坐骨神經(jīng) 取腿一只，先用玻璃分針沿脊柱側(cè)游離坐骨神經(jīng)腹腔部，然后用大頭針將標本背固定于干凈蛙板上。用玻璃分針循股二頭肌和半膜肌之間的坐骨神經(jīng)溝，縱向分離暴露坐骨神經(jīng)之大腿部分，直至分離至腘窩脛神經(jīng)分叉處。然后剪斷股二頭肌腱，自上而下剪斷所有坐骨神

4、經(jīng)分支。將連著 3~4 節(jié)椎骨的坐骨神經(jīng)分離出來７．完成坐骨神經(jīng)小腿標本 將已分離的坐骨神經(jīng)搭在腓腸肌上。用粗剪刀自膝關(guān)節(jié)周圍向上剪除并刮干凈所有大腿肌肉，在距膝關(guān)節(jié)約 1cm 處剪斷股骨。棄去上段股骨，保留部分即為坐骨神經(jīng)小腿標本８．完成坐骨神經(jīng)腓腸肌標本 用尖頭鑷子在上述坐骨神經(jīng)腓腸肌標本的肌腱下方穿孔，穿線結(jié)扎之，提起結(jié)扎線，在結(jié)扎線下方剪斷跟腱，并逐步游離腓腸肌至膝關(guān)節(jié)處，左手握住標本的股骨部分，使已游離的坐骨神經(jīng)和腓腸

5、肌下垂，右手持粗剪刀水平方向伸進腓腸肌與小腿之間，在膝關(guān)節(jié)處剪斷，與小腿其余部分游離。左手保留部分即為附著于股骨之上的，具有坐骨神經(jīng)支配的腓腸肌標本。將標本浸入盛有新鮮任氏液的培養(yǎng)皿中待用９．觀察搗毀脊髓前后四肢肌張力的變化；用鋅銅弓分別刺激坐骨神經(jīng)和腓腸肌，觀察肌肉反映．5.討論當肌肉受到閾上刺激時，肌肉發(fā)生一次收縮反映即單收縮，如果在短間隔時間內(nèi)刺激會出現(xiàn)收縮重疊的情況為復(fù)合收縮，如果后一個收縮發(fā)生在前一個舒張期，出現(xiàn)持續(xù)的鋸齒狀的

6、收縮曲線為不完全強直收縮，如果后一收縮發(fā)生在前一個收縮期內(nèi)，則完全看不到舒張期形跡，為完全強直收縮。每次連續(xù)刺激時間不宜太長，且每輛次刺激之間應(yīng)讓標本休息半分鐘，以防肌肉疲勞；需不時浸潤標本，以保持良好的興奮性；固定的松緊要適宜。6.實驗結(jié)論蛙的坐骨神經(jīng)肌肉標本單收縮的總時程約為 0.11 s，其中潛伏期、縮短期共占 0,05 s，舒張期占 0.06 s。若給予標本相繼兩個最適刺激，使兩次刺激的間隔小于該肌肉收縮的總時程時，則會出現(xiàn)一連

7、續(xù)的收縮，叫復(fù)合收縮（或收縮總和） 。若兩個刺激的時間間隔短于肌肉收縮總時程，而長于肌肉收縮的潛伏期和縮短期時程，使后一刺激落在前一刺激引起肌肉收縮的舒張期內(nèi)，則出現(xiàn)一次收縮尚未完全舒張又引起一次收縮；若兩次刺激的間隔短于肌肉收縮的縮短期，使后一刺激落在前一次刺激引起收縮的縮短期內(nèi)，則出現(xiàn)一次收縮正在進行接著又產(chǎn)生一次收縮，收縮的幅度高于單收縮的幅度。根據(jù)這個原理，若給予標本一連串的最適刺激，則因刺激頻率不同會得到一連串的單收縮、不完全