食用菌菌種的制作與培養(yǎng)

1、食用菌菌種的制作與培養(yǎng)食用菌菌種的制作與培養(yǎng)一、母種制作（一）母種培養(yǎng)基制作1.母種培養(yǎng)基的種類母種是菌種生產(chǎn)的關(guān)鍵，要求純度高，不能混生雜菌，同時(shí)母種的菌絲體較為纖細(xì)，分解培養(yǎng)料的能力較弱。因此，母種菌絲體需要培養(yǎng)在營養(yǎng)豐富，易被吸收，表面光滑易于鑒別有無雜菌感染的瓊脂培養(yǎng)基上。適合母種菌絲生長的瓊脂培養(yǎng)基種類很多，常用的有下列幾種：（1）馬鈴薯—葡萄糖—瓊脂培養(yǎng)基馬鈴薯（去皮）200克瓊脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水1000毫升（

2、2）麥芽汁—葡萄糖—瓊脂培養(yǎng)基干麥芽250克瓊脂15～20克葡萄糖（或蔗糖）10克水1000毫升（3）胡蘿卜—葡萄糖—瓊脂培養(yǎng)基胡蘿卜100克瓊脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水1000毫升（4）蘑菇汁—葡萄糖一瓊脂培養(yǎng)基（適用于蘑菇）鮮蘑菇250克瓊脂20克葡萄糖（或蔗糖）20克水1000毫升（5）蛋白胨—葡萄糖—瓊脂培養(yǎng)基蛋白胨2克葡萄糖20克磷酸氫二鉀2克維生素B1（硫胺素）0.5毫克磷酸二氫鉀0.5克瓊脂18克硫酸鎂0.5克水l0

3、00毫升2.母種培養(yǎng)基的制法以最常用的馬鈴薯—葡萄糖—瓊脂培養(yǎng)基的制法為例介紹如下：先將馬鈴薯去皮，洗滌，切成小塊加水1000毫升，煮沸15～20分鐘，取雙層紗布過濾，取其濾液，加入瓊脂和葡萄糖（或蔗糖），用文火加熱使其溶化，最后補(bǔ)足水分，使其容量仍為1000毫升。趁熱分裝于試管中，裝量約為試管長度的15左右，裝管時(shí)要注意不使培養(yǎng)基沾污試管壁和試管口。試管口塞上大小合適的棉花塞，塞入試管口內(nèi)的長度為棉塞總長的35。塞好棉塞后，每10性的

4、區(qū)別，采用單孢子分離獲得純菌種，有結(jié)實(shí)能力，而其它食用菌如香菇、銀耳、黑木耳等由于孢子有性別之分，單孢子分離得到的菌絲不能結(jié)實(shí)，所以，只在育種上采用，生產(chǎn)上很少采用多孢子分離法，是把許多孢子接種于同一培養(yǎng)基上，讓它們萌發(fā)，自然交配而獲得純種。2.組織分離法是用食用菌幼嫩的組織塊直接分離培養(yǎng)成純菌種的方法。選用的子實(shí)體先經(jīng)0.1％開汞水或70％酒精表面消毒后。用無菌水沖洗并用無菌紗布擦去表面水分。分離香菇時(shí)用無菌解剖刀自菌柄處切開少許，再

5、用手將子實(shí)體掰開為二，在菌蓋與菌褶交界處，切取0.3～0.4立方厘米的一小塊菌肉，移放在斜面培養(yǎng)基中央。如已開傘的種菇、則選菌蓋與菌柄交界處的菌肉。分離草菇時(shí)，用無菌解剖刀把菌蕾縱切少許；再用手把菌蓋輕輕剝開，在菌柄上方和菌蓋交界處，切取1～5毫米的細(xì)塊，接在斜面培養(yǎng)基中。如種菇已受雨淋，吸水較多，應(yīng)取菌褶作為接種材料。組織分離后將試管外面放在恒溫箱中培養(yǎng)。待組織塊周圍萌發(fā)出菌絲，并向培養(yǎng)基蔓延生長后，再挑取生長健壯的菌絲進(jìn)行轉(zhuǎn)管培養(yǎng)。

6、組織分離法操作簡便，又不易帶入雜菌，容易獲得純菌種。但對銀耳、黑木耳等膠質(zhì)菌；因其子實(shí)體中菌絲的含量極少，如用組織分離培養(yǎng)，則往往不易成功。3.基內(nèi)菌絲分離法是利用食用菌生長的基質(zhì)一菇木和耳木作為分離材料，而培養(yǎng)成純菌種的方法。特別是銀耳、黑木耳采用這種方法，成功率高，性狀也較穩(wěn)定，為生產(chǎn)上經(jīng)常采用的方法。具體做法是從野生或人工栽培的場所，選擇子實(shí)體發(fā)生早，生長旺盛，朵大，無病蟲害的菇木或耳木，鋸取一小段，讓其充分風(fēng)干后備用。分離時(shí)如為

7、香菇的菇木，先鋸取1厘米的薄片，切去四周用0.1％升汞水表面消毒1～2分鐘，用無菌刀將其劈成小木片，再切成0.5平方厘米的小木條，移入試管斜面培養(yǎng)基上，經(jīng)25～27℃培養(yǎng)，菌絲生長后，再行轉(zhuǎn)管培養(yǎng)。分離時(shí)如為銀耳的耳木，先從長有子實(shí)體部位，鋸取1～2厘米厚的木片，剔除樹皮及耳基，再用0.1％升汞水或75％酒精涂擦表面消毒，通過耳基著生處，把耳木縱切為二，用無菌刀在耳基著生處，削取極小的木屑，移入試管斜面培養(yǎng)基上。接種后放在20～28℃的