臨床實驗室安全管理醫(yī)學檢驗

1、1,臨床實驗室安全管理,,2,臨床實驗室安全管理,第一節(jié) 概述第二節(jié) 實驗室生物安全管理體系第三節(jié) 實驗室生物安全風險評估第四節(jié) 臨床實驗室生物安全防護第五節(jié) 實驗用菌（毒）種及廢棄物處理第六節(jié) 臨床實驗室其他安全,,3,第一節(jié) 概述,一、實驗室生物安全有關(guān)概念 二、臨床實驗室主要危害源 三、相關(guān)的法律法規(guī)和標準 四、實驗室的常用安全標識,,4,一、實驗室生物安全的有關(guān)概念,1.生物因子(

2、 biological agents)2.生物危害（biohazard）3.生物危險(biorisk)4.氣溶膠（aerosols）5.生物安全（biosafety）6.實驗室生物安全（laboratory biosafety）,,5,1．生物因子( biological agents)是可能引起感染、過敏或中毒的所有微小生物體，包括基因修飾的、細胞培養(yǎng)的和寄生于人體的一切微生物和其他相關(guān)的生物活性物質(zhì)2. 生物危害（bi

3、ohazard）是由生物因子對環(huán)境及生物體的健康所造成的危害,一、實驗室生物安全的有關(guān)概念,,6,3. 生物危險(biorisk) 是生物因子將要或可能形成的危害，是傷害概率和嚴重性的綜合，又叫風險。研究病原微生物是有一定風險，生物安全實驗室能夠降低這種風險4. 氣溶膠（aerosols）是指懸浮于氣體介質(zhì)中的粒子，一般直徑為0.001μm～100μm的固態(tài)或液態(tài)微小粒子形成的相對穩(wěn)定的分散體系,,一、實驗室生物安全的有關(guān)概念,

4、7,5. 生物安全（biosafety）是指人們對于由動物、植物、微生物等生物體給人類健康和自然環(huán)境可能造成不安全的防范6. 實驗室生物安全（laboratory biosafety） 是指在實驗室從事病原微生物實驗活動中，采取措施避免病原微生物對工作人員和相關(guān)人員造成危害、對環(huán)境造成污染和對公眾造成傷害，保證實驗研究的科學性并保護被實驗對象免受污染,,一、實驗室生物安全的有關(guān)概念,8,二、臨床實驗室的主要危害源,（一）生物危害源

5、（二）化學危害源（三）物理危害源,,9,（一）生物危害源,生物危害源主要由病原微生物引起的包括細菌、病毒、真菌及寄生蟲等實驗室相關(guān)感染的原因：被銳器刺傷 吸入氣溶膠 被動物咬傷或抓傷

6、 感染性材料處理不當,,10,（二）化學危害源,化學危害源主要指在臨床實驗室的操作過程中所使用的危險性化學品引起的危害。包括：易燃性化學品、易爆性化學品、腐蝕性化學品、強酸性化學品、有毒性化學品、有害性化學品入侵方式：通過吸入、接觸、食入、針刺及破損皮膚等方式侵入,,11,（三）物理危害源,臨床實驗室中物理危害源主要放射性核素的輻射、紫外線和激光光源照射、電磁場、噪音等的危害1．放射性核素 使用理由、限度和地點進

7、行評估 2. 紫外線和激光光源 提供個人防護裝備 3. 電 主要危害是引起火災 4. 噪音 采用工程控制措施,,12,三、相關(guān)的法律法規(guī)和標準,（一）國際的相關(guān)法律法規(guī)（二）我國生物安全法律、法規(guī)和標準,,13,（一）國際的相關(guān)法律法規(guī),20世紀50～60年代歐美國家開始關(guān)注實驗室生物安全問題世界衛(wèi)生組織在1983年出版了《實驗室生物安全手冊》（第一版）WHO于1993年組織編寫了該手冊的第二版。2004年

8、WHO正式發(fā)布了《實驗室生物安全手冊》（第三版）,,14,（二）我國有關(guān)生物安全的法律法規(guī)和標準,1. 我國有關(guān)生物安全的法律法規(guī) （1）《中華人民共和國傳染病防治法》（2）《病原微生物實驗室生物安全管理條例》（3） 《醫(yī)療廢物管理條例》,,15,2．我國有關(guān)實驗室生物安全的標準和規(guī)范,（1）中華人民共和國國家標準：《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2008）、《醫(yī)學實驗室安全要求》（GB19781-2005/ISO1

9、5190）、《生物安全實驗室建設技術(shù)規(guī)范》（GB50346-2004）（2）中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準：《微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則》、《人間傳染的病原微生物名錄》、《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》（3）國家環(huán)境保護總局：《病原微生物實驗室生物安全環(huán)境管理辦法》（第32號）,,16,四、實驗室的安全標識,（一）生物危害標識（二）感染性物品標識（三）電離輻射標識（四）危險化學品警示標識,

10、,17,,授權(quán)人員方可進入生物安全水平：------------責任人：-------------緊急聯(lián)系電話：-----------白天電話：------------ 家庭電話：-----------必須得到上述責任人的授權(quán)方可進入 生物危害警告標識,18,警示標識,19,第二節(jié) 實驗室生物安全管理體系,一、生物安全管理組織體系 二、生物安全管理體系文件 三、生物安全管理規(guī)章

11、制度 四、生物安全管理規(guī)范 五、記錄與資料的管理,,20,一、生物安全管理組織體系,（一）國家病原微生物實驗室生物安全專家委員會（二）地區(qū)病原微生物實驗室生物安全專家委員會（三）醫(yī)療機構(gòu)生物安全管理委員會（四）實驗室主任與安全管理員,,21,二、生物安全管理體系文件,體系文件的編制一般都采用四層“金字塔”建構(gòu)第一層《生物安全管理手冊》，主要敘述生物安全原則、方針、意圖和指令等第二層是《程序文件》，是

12、將生物安全管理指令、意圖轉(zhuǎn)化為行動的途徑和相關(guān)聯(lián)的行動第三層是《作業(yè)指導書(SOP)》，是用來指導相關(guān)活動的實驗操作技術(shù)細節(jié)性文件第四層是《記錄》，是用來闡明安全關(guān)聯(lián)活動的表達方式，它可追溯性提供結(jié)果的證據(jù),,22,二、生物安全管理體系文件,1．生物安全管理手冊核心是生物安全方針、目標、原則、組織機構(gòu)及各組成要素的描述手冊中“方針目標”應口號式生物安全方針概述生物安全目標，明確實驗室對生物安全管理的承諾,,23,二、生物安全管

13、理體系文件,2．生物安全管理程序文件程序文件一般包括；文件標題、目的、適用范圍、職責、工作流程、記錄表格目錄、支持性文件等。,,24,三、生物安全管理規(guī)章制度,1．建立安全管理制度的基本原則 制定生物安全管理制度必須根據(jù)相關(guān) 的法律法規(guī)、標準，并結(jié)合本實驗室情況還應考慮其科學性、合理性和可操作性控制源頭、切斷途徑、避免危害,,25,三、生物安全管理規(guī)章制度,2．基本規(guī)章制度①實驗室安全管理制度②生物安全防護制度③內(nèi)務

14、清潔制度④實驗室消毒滅菌制度⑤安全培訓制度⑥微生物實驗室菌(毒)種管理制度⑦傳染病病原體報告制度。⑧防火、防電、防意外事故管理制度⑨尖銳器具安全使用制度⑩實驗室醫(yī)療廢棄物處理制度,,26,四、生物安全管理規(guī)范,構(gòu)成臨床實驗室生物安全的三要素：工作人員、硬件和軟件人是核心要素，又是最寶貴的要素實驗室或者實驗室的設立單位應當每年定期對工作人員進行培訓，保證其掌握實驗室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)范、生物安全防護知識和實際操作技能，并

15、進行考核,,27,四、生物安全管理規(guī)范,《病原微生物實驗室生物安全管理條例》規(guī)定：實驗室應當每年定期對工作人員進行培訓，保證其掌握實驗室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)范、生物安全防護知識和實際操作技能，并進行考核工作人員經(jīng)考核合格的，方可上崗對實驗室相關(guān)人員，包括實驗室操作人員、保潔人員等也要進行崗前培訓和考核，持證上崗同時要進行周期性(一般每年一次)生物安全知識的繼續(xù)教育，并記入個人技術(shù)檔案。,,返回節(jié)目錄,28,五、記錄與資料的管理,將所

16、取得的結(jié)果或所完成的活動以記錄方式形成的文件，它可追溯性提供證據(jù)實驗室活動的表達方式之一記錄還可為糾正措施、預防措施的驗證提供證據(jù)實驗室采取糾正措施、預防措施的過程與效果可以通過相對的記錄予以驗證,,返回章目錄,29,第三節(jié) 實驗室生物安全風險評估,一、生物因子風險程度分級 二、病原微生物危害程度分類 三、實驗室生物安全防護分級 四、風險評估,,30,一、生物因子風險程度分級,Ⅰ級風險 : 低個體危害，低

17、群體危害。 不會導致健康工作者和動物致病的細菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。 Ⅱ級風險： 中等個體危害，有限群體危害。 實驗室感染不導致嚴重疾病，具備有效治療和預防措施，并且傳播風險有限。,,31,一、生物因子風險程度分級,Ⅲ級風險： 高個體危害，低群體危害。 能引起人類或動物嚴重疾病，但通常不能因偶然接觸而在個體間傳播，或能使用抗生素、抗寄生蟲藥治療的病原體 。Ⅳ級風險： 高個體危

18、害，高群體危害。 能引起人類或動物非常嚴重的疾病，一般不能治愈，容易傳播。,,返回節(jié)目錄,32,二、病原微生物危害程度分類,,我國在《病原微生物實驗生物安全管理條例》中，按危害程度將病原微生物分為四類。一類：能夠引起人類或者動物非常嚴重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。二類：能夠引起人類或者動物嚴重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。,33,二、病原微生物危害程度分類

19、,,三類：能夠引起人類或動物疾病，但一般情況下對人、動物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴重危害，傳播風險有限，實驗室感染后很少引起嚴重疾病，并且具備有效治療和預防措施的微生物。四類：通常情況下不會引起人類或者動物疾病的微生物。,返回節(jié)目錄,34,三、實驗室生物安全防護分級,1．一級生物安全防護實驗室（BSL-l）2．二級生物安全防護實驗室（BSL-2）3．三級生物安全防護實驗室（BSL-3）4．四級生物安全防護實驗室（BSL-4）,,35,四、

20、風險評估,（一）風險評估的含義（二）風險評估范圍（三）風險評估時間（四）評估人員（五）制定評估報告（六）評估辦法,,36,（一） 風險評估的含義,風險評估（risk assessment）是評估風險的大小以及確定風險是否可接受的全過程風險控制（risk control）為降低風險而采取的綜合措施風險評估是實驗室生物安全的核心工作,,37,（二）風險評估范圍,（1）生物安全風險評估 涉及病原微生物危害評估、實驗室實驗活動

21、風險評估、設施設備安全風險評估、人員健康監(jiān)測等多方面內(nèi)容。（2）風險評估內(nèi)容 至少包括生物因子已知或未知的生物學特性生物因子的種類、來源、傳染性、傳播途徑、易感性、潛伏期、劑量-效應關(guān)系、致病性、變異性、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、與其他生物和環(huán)境的交互作用、相關(guān)實驗數(shù)據(jù)、流行病學資料、人員安全狀況評估、預防和治療方案等,,38,（三）風險評估時間,風險評估始于實驗室設計建造之前實施于實驗活動之中定期的階段性再評估因工作條件、人員變動

22、適時重新評估保證風險評估報告的及時性保證有關(guān)管理規(guī)程、標準操作程序可行性,,39,（四）評估人員,實驗室生物安全工作涉及病原微生物、建筑設計工程、防護材料空氣動力等不同的專業(yè)領域是管理與研究并重的綜合性工作需要對該領域及實驗研究有經(jīng)驗、有資歷的專業(yè)人員進行評估工作,,40,（五）制定評估報告,各種因素的風險發(fā)生概率程度、針對這些風險采取的風險控制措施以及風險發(fā)生后的補救方法風險評估報告應得到有關(guān)生物安全主管部門的審批程序

23、審批是對評估結(jié)果的論證,,41,（六）評估辦法,具體評估辦法應按照國家標準《實驗室生物安全通用要求》（GB19489-2008）嚴格實行,返回章目錄,,42,第四節(jié) 臨床實驗室生物安全防護,一、實驗室生物安全防護類型二、實驗室主要的安全設備三、個人安全防護用具四、臨床實驗室技術(shù)規(guī)范五、臨床實驗室消毒與滅菌六、臨床實驗室應急事故處理,,43,一、實驗室生物安全防護的類型,1.一級防護(primary barrier) 主

24、要采用規(guī)范實驗技術(shù)和適當?shù)陌踩O備保護實驗室工作人員和室內(nèi)環(huán)境安全免受感染性物質(zhì)污染包括安全設備和個體防護裝備,,44,一、實驗室生物安全防護的類型,2.二級防護(secondary barrier) 二級防護包括實驗室設施設計和嚴格規(guī)范的操作流程以保護實驗室外環(huán)境不受感染性物質(zhì)污染生物安全防護的三個要素實驗室操作及技術(shù)、安全設備和實驗室設施設,返回節(jié)目錄,,45,二、實驗室主要的安全設備,（一）生物安全柜（二）超凈工作

25、臺（三）通風柜（四）洗眼器（五）緊急噴淋裝置（六）消毒設施及用品,,46,生物安全柜（biosafety cabinet ，BSCs ）是處理危險性微生物時所用的箱型空氣凈化安全裝置。是在操作具有感染性的實驗材料時，為保護操作者本人、實驗室內(nèi)外環(huán)境以及實驗材料，使其避免在操作過程中可能產(chǎn)生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的一種實驗室安全防護設備。,,（一）生物安全柜,47,（一）生物安全柜,1. 種類介紹（自學）2. 生物安全

26、柜使用要求3. 生物安全柜操作規(guī)范4. 生物安全柜檢測要求（自學）,,48,1. 種類介紹,Ⅰ級生物安全柜Ⅱ級生物安全柜：Ⅱ級A1型、 Ⅱ級A2型、 Ⅱ級B1型、 Ⅱ級B2型Ⅲ級生物安全柜,,49,生物安全柜(負壓柜),Ⅰ級：設計簡單，目前仍廣泛使用。保護操作者和環(huán)境，不保護操作對象。Ⅱ級：保護操作者和操作對象。操作危險度2 級和3 級微生物。

27、穿正壓防護服可處理危險度4 級微生物。Ⅲ級：對操作者防護最好。操作危險度4 級微生物。適用于三級和四級生物安全水平實驗室。,,50,擺放位置、操作、物品擺放、操作和維修 紫外線燈、明火、溢出、清潔和消毒、清 除污染、個體防護裝備、警報器、檢測,2. 生物安全柜使用要求,,51,3. 生物安全柜操作規(guī)范,1. 人員要培訓2. 必須運行正常3. 使用時不能打開玻璃觀察擋板4. 放置盡可能少的器材或標本5. 不

28、能使用本生燈6. 在安全柜的中后部操作、不要使用其他物品阻擋空氣格柵、盡量減少手臂的伸進伸出、盡可能減少操作者身后的人員流動、不進行文字工作7. 工作開始前和結(jié)束后，風機應至少運行5分鐘,,52,4. 生物安全柜檢測要求,（1）人員、產(chǎn)品及交叉污染保護試驗（2）柜體泄漏試驗（3）HEPA過濾器泄漏試驗（4）下降氣流流速測試（5）流入氣流流速測試（6）氣流煙霧模式測試（7）噪聲（8）照度（9）振動,,53,（二） 超

29、凈工作臺,超凈工作臺的氣流是由外部經(jīng)HEPA過濾后進入操作區(qū)，通過操作區(qū)后由超凈工作臺前、側(cè)開口區(qū)流向操作者一側(cè)而進入實驗室。超凈工作臺只能保護實驗材料，不能保護操作人員及環(huán)境。超凈工作臺只適用于無毒、無味、無刺激性揮發(fā)氣體以及無感染性的實驗材料操作。,,54,（三） 通 風 柜,通風柜是可以有效遏制毒性、刺激性或者易燃材料的安全設備在實驗操作時往往會產(chǎn)生各種有害氣體、臭氣、濕氣以及易燃、易爆、腐蝕性物質(zhì)，為了保護使用者的安全，防

30、止實驗中的污染物質(zhì)向?qū)嶒炇覕U散，在污染源附近要使用排風設備尤其是當試驗過程中出現(xiàn) 操作失誤，蒸汽和灰塵 從使用器皿中大量泄出時， 通風柜可起到后備安全 保障作用,,55,（四） 洗眼器,洗眼器是安全和勞動保護必備的設備，是接觸酸、堿、有機物等有毒、腐蝕性物質(zhì)場合必備的應急、保護設施洗眼器的類型很多，如復合式洗眼器、立式洗眼器、壁掛式洗眼器、便攜式洗眼器、臺式洗眼器每周應測試洗眼器與水供應連接的裝

31、置以確保其功能的正常并沖掉積水,,56,（五）緊急噴淋裝置,一般安裝在使用苛性堿和腐蝕性化學品附近的地方定期測試噴淋裝置以保證其功能正常，其次數(shù)依實驗室的復雜程度和規(guī)模而定盡可能提供舒適的水溫；地面排水通常設在緊急噴淋裝置附近,,57,（六）消毒設施及用品,臨床實驗室生物安全防護常采用的消毒三種方式化學消毒高壓滅菌焚燒可在具體工作中應根據(jù)實際情況來選擇不同的消毒方式,,返回節(jié)目錄,58,三、個人安全防護用品,1. 實驗服

32、2. 護目鏡3. 面罩4. 手套5. 鞋,,59,安全防護用具是避免操作人員暴露于氣溶膠、噴濺物以及意外接種等危險的一個屏障應根據(jù)所進行工作的性質(zhì)來選擇防護用具常用的安全防護用具有實驗服、護目鏡、面罩、手套和鞋等,,三、個人安全防護用品,60,實驗服,面罩,護目鏡,鞋套,手套,61,,,,實驗服,隔離衣,連體防護,62,靴套使用方法示意圖,鞋套使用方法示意圖,乳膠手套,聚脂手套,聚氯乙烯手套,63,眼睛防護裝備,a

33、.安全鏡 大多數(shù)情況,佩戴側(cè)面帶有護罩的安全眼鏡能夠保護工作人員避免受到大部分實驗室操作所帶來的損害,,,,b .安全護目鏡,只有在進行有可能發(fā)生化學和生物污染物質(zhì)濺出的實驗時，必須佩戴護目鏡,64,,,,——防護面罩（對整個臉部進行防護）,——一次性面罩,65,,,,一次性防護面具,一次性防護面具,,66,,,,,,正壓防護服,使用中的全罩式防護面具,67,正壓面罩（頭盔正壓式呼吸防護系統(tǒng)）,返回節(jié)目錄,68,四、臨床實驗室技術(shù)

34、規(guī)范,（一）一級生物安全防護實驗室（BSL-1）（了解）（二）二級生物安全防護實驗室（BSL-2）（三）三級生物安全防護實驗室（BSL-3）（了解）（四）四級生物安全防護實驗室（BSL-4）（了解）,,69,（一）一級生物安全防護實驗室（BSL-1）,適用于已知不會導致健康工作者和動物致病的生物因子（細菌、真菌、病毒和寄生蟲等）的操作對實驗室工作人員和環(huán)境的潛在危害性最小,,70,（二）二級生物安全防護實驗室,二級生物安全防護

35、實驗室（BSL-2）接觸致病生物因子的實驗室工作人員要經(jīng)過特殊培訓在資深工作人員的指導下工作,,71,（二）二級生物安全防護實驗室,1．標準的微生物操作規(guī)程同BSL-1，特殊安全操作規(guī)程1）在開展傳染病原體操作時，實驗室負責人應禁止或限制其他人員進入2）只有那些明確病原體潛在危險性并符合特殊要求（如經(jīng)過免疫接種）的人員才能進入實驗室3）實驗室入口處貼上生物危害標志，在實驗室內(nèi)必須佩戴的個人防護設施4）實驗室人員接受適當與實驗

36、有關(guān)的免疫接種或檢測（如乙型肝炎病毒疫苗或卡介苗皮試）5）必要時對實驗室或其他高危人員進行基準血清樣本收集并保存6）標準操作規(guī)程或生物安全手冊中應包括生物安全程序,,72,（二）二級生物安全防護實驗室,1．標準的微生物操作規(guī)程7）工作人員要每年要接受1次最新知識的培訓。8）對于污染的銳利器具，要嚴格遵守以下規(guī)定：① 針、注射器及其他銳器應限制在實驗室內(nèi)使用；可用其他器具替代操作② 注射和吸取感染性物質(zhì)時要用一次性注射器；用過

37、的針頭不得彎曲、剪斷、折斷、直接置于堅壁容器中③ 適當時使用帶針頭套的注射器、無針頭注射器和其他安全裝置④ 禁止直接用手處理破碎的玻璃器具，必須用其他工具（如刷子、簸箕、夾子或鑷子等）處理，盛裝污染的針頭、銳器、破碎玻璃的容器在丟棄前需進行消毒處理,,73,（二）二級生物安全防護實驗室,1．標準的微生物操作規(guī)程9）實驗室設備和工作臺面在進行完感染性物質(zhì)的操作后進行常規(guī)消毒，污染的設備必須根據(jù)相應規(guī)定進行消毒10）培養(yǎng)物、組織、體

38、液樣本或具潛在感染性的廢物必須放在密閉、防漏的容器內(nèi)，防止發(fā)生泄漏）發(fā)生溢出事故造成感染性物質(zhì)擴散時，應立即報告實驗室負責人，要進行適當?shù)尼t(yī)學評估、監(jiān)測以及妥善處理，并保留書面記錄12）與實驗無關(guān)的動物不允許進入實驗室,,74,（二）二級生物安全防護實驗室,2．實驗室生物安全設備和防護要求二級生物安全柜或個人防護裝備或物理防護①可能產(chǎn)生感染性氣溶膠或飛濺物的實驗過程, ②處理高濃度或大體積的感染性生物，密封的轉(zhuǎn)頭或離心管,可以在

39、開放的實驗室離心③生物安全柜外操作感染性微生物時,要佩戴面目防護裝置④要穿著專用的工作服等防護服,在離開時必須脫下⑤當手可能接觸到有潛在感染性的物質(zhì)、污染的表面或設備時,必須戴手套。處理后的手套不能再進行沖洗、使用或接觸“干凈”的表面(鍵盤、電話等),脫下手套后立即洗手,（,,75,（二）二級生物安全防護實驗室,3．實驗室設施要求①實驗室門應帶鎖②應配備各種消毒設施，如高壓滅菌裝置、化學消毒裝置等③新建實驗室選址應遠離公共場

40、所④生物安全柜要放在遠離門、開放的窗戶、走動比較頻繁的實驗室區(qū)域以及其他具有潛在破壞性的設備處,以維持生物安全柜的氣流參數(shù),,76,（三）三級生物安全防護實驗室（BSL-3）,操作規(guī)程①標準的微生物安全操作規(guī)程同BSL-2②特殊安全操作規(guī)程，在BSL-2特殊安全操作規(guī)程的基礎上，對實驗室設備和工作臺面消毒、銳器的處理、生物安全柜的應用、廢棄物的處理等有一些特殊的要求,,77,（四）四級生物安全防護實驗室（BSL-4）,在BSL

41、-3技術(shù)規(guī)范的基礎上更為嚴格實驗人員和實驗材料進出實驗室有特殊的要求實驗室入口應安裝上鎖的安全門所有進入實驗室的人員都要簽名登記日期和時間實驗人員入室前應更換衣服，只能經(jīng)淋浴間和更衣室進出實驗室，每次離開實驗室前都應進行消毒性淋浴實驗材料和用品應通過雙層門的高壓滅菌倉、熏蒸消毒倉或氣體閘門送入，所有操作必須Ⅲ級生物安全柜中進行任何未經(jīng)高壓或熏蒸消毒的物質(zhì)不得轉(zhuǎn)移出實驗室,,返回節(jié)目錄,78,五、臨床實驗室的消毒與滅菌,（一）

42、常用的消毒滅菌方法（二）化學消毒（三） 臨床實驗室消毒措施（四）焚燒,,79,（一）常用的消毒滅菌方法,1．物理的消毒滅菌方法 用物理因素殺菌或清除病原微生物及其他有害微生物，稱為物理消毒滅菌法。（1）熱力滅菌法（heat sterilization） ①濕熱滅菌法：濕熱滅菌法是最常用的滅菌法其殺菌機制：在濕熱條件下蛋白質(zhì)吸收水分容易變性或凝固，水分子的穿透力比空氣大，更易均勻傳遞熱能，蒸汽有潛熱存在。所以該法的滅菌效率比

43、干熱滅菌法高。主要包括：高壓蒸氣滅菌法、間歇蒸氣滅菌法、流通蒸氣消毒法、煮沸法、巴氏消毒法,,80,（一）常用的消毒滅菌方法,1．物理的消毒滅菌方法 ②干熱滅菌法：其機制是高溫能使菌體蛋白分子變性及細胞質(zhì)濃縮，使新陳代謝受到障礙而死亡；可殺死一切微生物，包括芽胞菌，還可以破壞熱原質(zhì)（2）輻射殺菌法（radiation sterilization）：通過紫外線照射和γ射線的高能量電子束，使菌體蛋白發(fā)生光解、變性、核酸酶被破壞。主要方法

44、有：紫外線法、電離輻射法、微波法,,81,（一）常用的消毒滅菌方法,（3）超聲波殺菌法（ultrasonic）：超聲波的滅菌機制是利用其通過水時產(chǎn)生的空（腔）化作用，從而造成細菌的崩破與裂解，革蘭陰性菌對其尤為敏感 常與其他方法合用，起到增效作用。（4）過濾除菌法（filtration）：采用濾器通過物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌除去的方法，以達到無菌目的 主要用于不耐高溫滅菌的血清、毒素、抗生素、藥液和

45、空氣除菌，不能去除病毒、支原體和L型細菌,,82,（一）常用的消毒滅菌方法,（二）化學消毒化學消毒是指用化學藥物作用于微生物和病原體，使其蛋白質(zhì)變性，失去正常功能而死亡具有殺菌作用的化學藥物稱為化學消毒劑，具有抑制微生物生長繁殖的藥物稱為防腐劑主要方法有：浸泡法、擦拭法、熏蒸法、噴霧法，環(huán)氧乙烷氣體密閉消毒法適用于不耐高溫的物品，如銳利器械（如刀、剪刀、縫針等）、內(nèi)鏡、塑料導管、光學儀器及皮膚、黏膜，病人的分泌物、排泄物、實驗室

46、空氣等均可采用此法,,83,（二）化學消毒,各種消毒劑可按照其作用效力分為三類：①高效消毒劑：甲醛、戊二醛、過氧乙酸、環(huán)氧乙烷、有機汞化合物等，可以殺滅包括細菌繁殖體、芽孢、真菌、病毒在內(nèi)一切微生物，可用作滅菌劑②中效消毒劑：有乙醇、酚類、碘、含氯消毒劑等，可殺滅細菌芽孢以外的其他各種微生物③低效消毒劑：包括新潔爾滅、洗必泰等，不能殺滅細菌芽孢、結(jié)核桿菌和親水類病毒，可殺滅結(jié)核桿菌以外的其他細菌繁殖體、真菌和親脂類病毒,,84,(

47、三) 臨床實驗室消毒措施,臨床實驗室分清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū)目前實驗室一般使用含氯消毒劑進行消毒1．清潔區(qū) 辦公室、盥洗室、休息室、培養(yǎng)基室等每天開窗通風換氣，擦拭桌面、地面。每周用消毒液500mg/L有效氯擦拭。2．半污染區(qū) 包括緩沖間、更衣室及衛(wèi)生通道等區(qū)域，可能存在致病菌污染①空氣消毒常采用紫外燈照射消毒、空氣凈化器消毒②門窗、桌面等物體表面用500mg/L有效氯擦拭消毒③工作用鞋用500mg/L有效氯擦拭，工

48、作衣、隔離衣通常由醫(yī)院洗衣房統(tǒng)一消毒處理,,85,(三) 臨床實驗室消毒措施,3．污染區(qū) 包括實驗室樣本收集區(qū)、處理區(qū)、培養(yǎng)區(qū)、鑒定藥敏區(qū)和廢棄物處理區(qū)域等。（1）空氣消毒用紫外燈照射消毒、空氣凈化器消毒。（2）手消毒常用250mg/L有效氯或?qū)Ｓ孟词忠合荆?）門窗、桌面、貴重儀器設備等物體表面消毒需用500mg/L有效氯擦拭（4）被樣品污染的表面消毒用1000mg/L有效氯消毒30min～60min被病毒和結(jié)核桿菌污染表

49、面消毒要用2000mg/L有效氯消毒30min,,86,（四）焚 燒,在臨床實驗室生物安全防護工作中，焚燒環(huán)節(jié)是醫(yī)療廢棄物消毒的終末環(huán)節(jié)在處理那些經(jīng)過或事先未經(jīng)清除污染的動物尸體以及解剖組織或其他實驗室廢棄物時，焚燒是一種有效的方法但要在指定地點，應符合有關(guān)規(guī)定一般交由廢棄物處理部門完成,,返回節(jié)目錄,87,六、臨床實驗室應急事故處理,（一）刺傷、切割傷或擦傷（二）潛在感染性物質(zhì)的食入（三）潛在危險性氣溶膠的釋放（柜外）（四

50、）容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出（五）未裝可封閉離心桶的離心機內(nèi)盛有潛在感染性物質(zhì)的離心管發(fā)生破裂（六）在可封閉的離心桶內(nèi)離心管發(fā)生破裂（七）火災和自然災害（八）緊急救援、聯(lián)系對象（九）急救裝備,,88,（一）刺傷、切割傷或擦傷,1．受傷人員應當脫下防護服，清洗雙手和受傷部位．使用適當?shù)钠つw消毒劑，必要時進行醫(yī)學處理2．要記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并應保留完整適當?shù)尼t(yī)療記錄,,89,（二）潛在感染性物質(zhì)的食入,應脫下受害人的防

51、護服，并進行醫(yī)學處理要報告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細節(jié)并保留完整適當?shù)尼t(yī)療記錄,,90,（三）潛在危險性氣溶膠的釋放,1．所有人員必須立即撤離相關(guān)區(qū)域，任何暴露人員都應接受醫(yī)學咨詢2．應當立即通知實驗室負責人和生物安全員3．為了使氣溶膠排出和使較大的粒子沉降，在一定時間內(nèi)（例如1h內(nèi)）嚴禁人員入內(nèi)。如果實驗室沒有中央通風系統(tǒng)，則應推遲進入實驗室（例如24h）4．應張貼“禁止進入”的標志，過了相應時間后，在生物安全員的指導下來

52、清除污染5．應穿戴適當?shù)姆雷o服和呼吸保護裝備,,91,（四）容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出,1．應當立即用布或紙巾覆蓋受感染性物質(zhì)污染或受感染物質(zhì)溢灑的破碎物品。在上面倒上消毒劑，并使其作用適當時間。2．然后將布、紙巾以及破碎物品清理；玻璃碎片應用鑷子清理。3．用消毒劑擦拭污染區(qū)域。如果用簸箕清理破碎物，應當對其進行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡。用于清理的布、紙巾和抹布等應當放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。4．所有這些操作過程中都

53、應戴手套。如果實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，應將這信息復制，并將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。,,92,（七）火災和自然災害,應事先告知消防人員和其他服務人員房間有潛在的感染性物質(zhì)。要參觀實驗室，讓他們熟悉實驗室的布局和設備。發(fā)生自然災害時，應就實驗室建筑內(nèi)和（或）附近建筑物的潛在危險向當?shù)鼗驀揖o急救助人員提出警告只有在受過訓練的實驗室工作人員的陪同下，他們才能進入這些地區(qū)感染性物質(zhì)應收集在防漏的盒子內(nèi)或結(jié)實的一次性

54、袋子中。由生物安全人員依據(jù)當?shù)氐囊?guī)定決定繼續(xù)利用或是最終丟棄,,93,（九）急救裝備,1．急救箱，包括常用的和特殊的解毒劑。2．合適的滅火器和滅火毯。3．有效防護化學物質(zhì)和顆粒的濾毒罐的全面罩式防毒面具。4．全套防護服。5．房間消毒設備，如噴霧器和甲醛熏蒸器等。6．工具，如錘子、斧子、扳手、螺絲刀、梯子和繩子。7．擔架。8．劃分危險區(qū)域界限的器材和警告標示。,,返回章目錄,94,第五節(jié) 實驗用菌種及廢棄物處理,一、菌（毒

55、）種的保藏與管理 二、臨床實驗室廢棄物處理,,95,一、菌（毒）種的保藏與管理,（1）生物安全管理部門要建立菌（毒）種管理監(jiān)督程序。（2）菌毒種儲藏環(huán)境是要合乎規(guī)范并具備相應等級菌毒種保藏的基本設備和生物安全保障設施。（3）菌（毒）種儲藏設施要求雙人雙鎖。（4）保藏的菌種，要有詳細的背景和相關(guān)資料。（5）菌（毒）種分離是要有標準的操作細則，并有相應的原始記錄。（6）進行II級生物危害微生物實驗的原始記錄自菌種開啟（分離

56、）到菌種保藏或銷毀，可溯源。,,96,（7）實驗記錄要有實驗人、復核人、實驗日期，實驗室負責人要對記錄內(nèi)容核查。（8）銷毀記錄要有包括銷毀方式、銷毀物品明細、滅菌溫度與時間。（9）要有菌毒種滅活方法驗證程序，驗證原始記錄。（10）要有用于菌毒種或培養(yǎng)物銷毀的高壓鍋檢測報告。（11）實驗室廢棄物要使用專用包裝物、容器，要有明顯的警示標識和警示說明。（12）具有處理菌毒種或培養(yǎng)物泄漏所需消毒制劑及其他物品。,,一、菌（毒）種的保藏

57、與管理,返回節(jié)目錄,97,二、臨床實驗室廢棄物處理,（一）廢棄物的含義指廢物（Waste）是指使用者不再使用的一切物質(zhì)即將要丟棄的所有物品醫(yī)療廢棄物是指醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)在醫(yī)療、預防、保健以及其他相關(guān)活動中產(chǎn)生的具有直接或者間接感染性、毒性以及其他危害性的廢物,,98,（二）廢棄物的處理,1．所有不再需要的樣本、培養(yǎng)物和其他生物性材料應棄置于專門設計的、有標記的用于處置危險廢棄物的專用容器內(nèi)，生物廢棄物容器的充滿量不能超過其設計容量。

58、2．利器（包括針頭、小刀、金屬和玻璃等）應直接棄置于銳器收集容器內(nèi)，不得對廢棄針頭等銳器進行折彎、折斷、回蓋等處理。3．實驗室管理層應確保由經(jīng)過適當培訓的人員使用適當?shù)膫€人防護裝備和設備處理危險廢棄物。4．不允許積存垃圾和實驗室廢棄物，已裝滿容器定期運走。,,99,（二）廢棄物的處理,5．在去污染或最終處置之前，應存放在指定的安全地方，通常在實驗室區(qū)的污物間。6．所有棄置的實驗室生物樣本、培養(yǎng)物和被污染的廢棄物在從實驗室中取走之前

59、，應使其達到生物學安全水平。7．實驗室廢棄物應置于適當?shù)拿芊馇曳缆┤萜髦邪踩\出實驗室。8．有害氣體、氣溶膠、污水、廢液（包括放射性廢液）應經(jīng)適當?shù)臒o害化處理后排放，動物尸體和組織的處置和焚化應符合國家相關(guān)的要求。9．所有廢棄物容器的顏色和危害標志均應符合通用標準。廢棄物的清運及交接均應嚴格的記錄，記錄應妥善保存。,,返回章目錄,100,第六節(jié) 臨床實驗室其他安全,一、臨床實驗室化學試劑安全 二、臨床實驗室放射安全,,1