第三章細(xì)胞工程

1、課程名稱：現(xiàn)代生物技術(shù)概論授課主題：第三章細(xì)胞工程授課教師：生命科學(xué)系王國(guó)霞目的要求：1，了解制備植物細(xì)胞及微生物細(xì)胞的原生質(zhì)體并進(jìn)行細(xì)胞融合的基本方法。2，學(xué)習(xí)如何進(jìn)行動(dòng)植物細(xì)胞及組織的培養(yǎng)方法。3，探討植物脫除病毒的途徑和檢測(cè)手段。4，掌握利用動(dòng)物體細(xì)胞克隆哺乳動(dòng)物的基本做法及其重要意義。內(nèi)容重點(diǎn)：植物細(xì)胞工程、動(dòng)物細(xì)胞工程內(nèi)容難點(diǎn)：動(dòng)物細(xì)胞工程、細(xì)胞融合第三章細(xì)胞工程細(xì)胞工程是在細(xì)胞水平上研究、開(kāi)發(fā)、利用各類細(xì)胞的工程。是現(xiàn)代生物

2、技術(shù)中涉及面極為廣泛的一門(mén)工程技術(shù)，它與基因工程一起代表這現(xiàn)代生物技術(shù)的最新發(fā)展前沿。概念：是指以細(xì)胞為基本單位，在體外條件下進(jìn)行培養(yǎng)、繁殖，或人為地使細(xì)胞某些生物學(xué)特性按照人們的意愿發(fā)生改變，從而達(dá)到改良生物品種和創(chuàng)造新品種，加速繁育動(dòng)、植物個(gè)體，以獲得某種有用物質(zhì)的一門(mén)綜合性科學(xué)技術(shù)。按研究對(duì)象可分為：植物細(xì)胞工程、動(dòng)物細(xì)胞工程、微生物細(xì)胞工程按技術(shù)水平分為：動(dòng)、植物細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)、細(xì)胞融合技術(shù)、細(xì)胞器移植技術(shù)。第一節(jié)細(xì)胞工程的

3、基礎(chǔ)知識(shí)與基本技術(shù)一，基礎(chǔ)知識(shí)細(xì)胞是細(xì)胞工程的操作對(duì)象。是生命結(jié)構(gòu)和功能的基本單位，是生命活動(dòng)的基本單元。細(xì)胞英文名:CELL在文章中簡(jiǎn)稱C。細(xì)胞并沒(méi)有統(tǒng)一的定義，近年來(lái)比較普遍的提法是：細(xì)胞是生命活動(dòng)的基本單位。（三）細(xì)胞融合技術(shù)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞相互接觸后，其細(xì)胞膜發(fā)生分子重排，導(dǎo)致細(xì)胞合并、染色體等遺傳物質(zhì)重組的過(guò)程稱為細(xì)胞融合。1、制備原生質(zhì)體。微生物和植物細(xì)胞外面有堅(jiān)硬的細(xì)胞壁，通常需要用酶進(jìn)行降解。動(dòng)物細(xì)胞不需要。2、誘導(dǎo)細(xì)胞融

4、合。兩親本細(xì)胞（原生質(zhì)體）的懸浮液調(diào)至一定細(xì)胞濃度，按1：1的比例混合后，逐漸滴入高濃度的聚乙二醇（PEG）誘導(dǎo)融合，或用電激法促進(jìn)融合。3、融合細(xì)胞的篩選。將混合液移到特定的篩選培養(yǎng)基上，讓雜合細(xì)胞有選擇地長(zhǎng)出，其他未融合細(xì)胞無(wú)法長(zhǎng)出。第二節(jié)第二節(jié)植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程包括植物組織培養(yǎng)、植物細(xì)胞培養(yǎng)、次生代謝物的生產(chǎn)、人工種子的研制。一，植物組織培養(yǎng)定義：在無(wú)菌和人為控制外因（營(yíng)養(yǎng)成分、光、溫、濕）條件下，培養(yǎng)和研究植物組織、器官，

5、甚至進(jìn)而從中分化、發(fā)育出整株植株的技術(shù)。（一）理論依據(jù)理論基礎(chǔ)就是植物細(xì)胞具有全能性。細(xì)胞的全能性：離體的體細(xì)胞或性細(xì)胞在一定的培養(yǎng)條件下，可以長(zhǎng)出再生植株，再生植株具有與母株相同的全部遺傳信息。植物細(xì)胞全能性的概念是1902年由德國(guó)著名植物學(xué)家Haberlt首先提出的。并設(shè)想一個(gè)體細(xì)胞可以被人工培養(yǎng)成一個(gè)胚。哈伯蘭德被譽(yù)為“植物組織培養(yǎng)之父”。（二）培養(yǎng)過(guò)程1預(yù)備階段預(yù)備階段（1）外植體的選擇外植體選擇部位要是去分化相對(duì)容易的部位，一