執(zhí)業(yè)獸醫(yī)資格考試微生物學(xué)巴氏桿菌科及其相關(guān)屬ppt課件

1、巴氏桿菌屬曼氏桿菌屬里氏桿菌屬嗜血桿菌屬放線桿菌屬,巴氏桿菌科及相關(guān)屬,1,第十八章 巴氏桿菌科及相關(guān)屬,巴氏桿菌屬曼氏桿菌屬：從巴氏桿菌屬中分出里氏桿菌屬嗜血桿菌屬放線桿菌屬泰勒菌屬,2,重點(diǎn)介紹,巴氏桿菌屬嗜血桿菌屬放線桿菌屬,3,第一節(jié) 巴氏桿菌屬,為一類微小、粗短、卵圓形的G－桿菌，由法國(guó)微生物學(xué)家、化學(xué)家巴斯德最早發(fā)現(xiàn)，故名。目前 已報(bào)道有20多種，以多殺性巴氏桿菌在獸醫(yī)學(xué)上最為重要。,4,本屬細(xì)菌的共

2、同特性：,1、 G－、細(xì)小短桿菌；兩極染色；無(wú)鞭毛；無(wú)芽胞； 2、需氧或兼性厭氧； 3、普通培養(yǎng)基多生長(zhǎng)不良，血或血清可促進(jìn)生長(zhǎng)； 4、分解糖類產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不液化明膠； 5、 氧化酶陽(yáng)性。,5,多殺性巴氏桿菌,多殺亞種敗血亞種殺禽亞種,6,多殺性巴氏桿菌,形態(tài)特性培養(yǎng)特性生化特性抵 抗 力抗原結(jié)構(gòu)致 病 性微生物學(xué)診斷,7,1、多殺性巴氏桿菌的形態(tài)特性,G－、細(xì)小短桿菌，兩端純圓，中央凸起，近似橢圓形

3、。無(wú)芽胞，無(wú)鞭毛，有莢膜。兩極染色。,,多殺性巴氏桿菌模式圖,8,2、多殺性巴氏桿菌的培養(yǎng)特性,需氧或兼性厭氧；最適溫度37℃，pH7.2~7.4。普通培養(yǎng)基中加蛋白胨、酪蛋白水解物、血液、血清或微量血紅蛋白時(shí)可促進(jìn)生長(zhǎng)。菌落形態(tài)：血清瓊脂：淡灰白、露珠樣小菌落，邊緣整齊、表面光滑。血液瓊脂：濕潤(rùn)、水滴樣小菌落，不溶血。血清肉湯或1%胰蛋白胨肉湯：均勻混濁，軸性沉淀，形成菌環(huán)。,9,根據(jù)有無(wú)熒光及熒光色彩，可分為3種菌落類

4、型：Fg型：菌落小，藍(lán)綠色帶金光，邊緣有狹窄的紅黃光帶，對(duì)豬、牛、羊等為強(qiáng)毒菌，對(duì)雞等禽類的毒力弱。Fo型：菌落大，桔紅色帶金光，邊緣有乳白色光帶，對(duì)雞及兔等為強(qiáng)毒菌，對(duì)豬、牛、羊等家畜的毒力則微弱。Fg型和Fo型可以發(fā)生互相轉(zhuǎn)變。Nf型：上述2型經(jīng)多次傳代后，毒力降低或轉(zhuǎn)為無(wú)毒力，不帶熒光也無(wú)毒力。,新分離的強(qiáng)毒菌，血清瓊脂上的菌落在45度折光下觀察時(shí)，在菌落的表面可看到熒光。,10,粘液型（M型）：菌落大，有粘稠性，對(duì)小鼠有中

5、等毒力；平滑型（熒光）：菌落中等大小，對(duì)小鼠毒力很強(qiáng)；粗糙型（藍(lán)色）：菌落小，對(duì)小鼠毒力弱，能自家凝集。 粗糙型無(wú)莢膜，而粘液型和平滑型均有莢膜，成分為透明質(zhì)酸,國(guó)外常把本菌在瓊脂上的菌落分為3種類型：,11,糖類利用情況：分解葡、蔗、果、甘露糖和半乳糖，產(chǎn)酸，不產(chǎn)氣。大多數(shù)發(fā)酵甘露醇。一般對(duì)乳糖、鼠李糖、楊苷、肌醇、菊糖和側(cè)金盞花醇不發(fā)酵。H2S(＋)、NH3 (＋)、IMViC(＋－－－)、還原硝酸鹽(＋)、

6、還原美藍(lán)(＋)、接觸酶(＋)、氧化酶(＋)、明膠液化(－)、石蕊牛乳(－)、尿素酶(－)、賴氨酸脫羧酶(－)等,3、多殺性巴氏桿菌的生化特性,12,4、多殺性巴氏桿菌的抵抗力,本菌抵抗力不強(qiáng)易被普通的消毒藥、陽(yáng)光或熱殺死。3%石炭酸、3%福爾馬林、10%石灰乳、0.5~l%氫氧化鈉、0.1%升汞及2%來(lái)蘇兒經(jīng)1~2min可被殺死。在水浴56℃15min、60℃10min內(nèi)被殺死。直射陽(yáng)光下曝曬10min可失活。,13,5、多殺性

7、巴氏桿菌的抗原結(jié)構(gòu),抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜，主要有莢膜抗原和菌體抗原。莢膜抗原有型的特異性及免疫原性。,莢膜抗原共有6個(gè)：用大寫(xiě)英文字母表示菌體抗原（O抗原）共有16個(gè)型：用阿拉伯?dāng)?shù)字表示我國(guó) 禽多殺性巴氏桿菌以5:A最多，其次是8:A； 豬以5:A和6:B為主，其次是8:A和2:D； 牛、羊以6:B最多； 家兔以7:A為主，其次是5:A。,14,6、多殺性巴氏桿菌的致病性,可引起多種畜禽巴氏桿菌病(亦稱出血性敗血癥) 。不同動(dòng)物

8、的巴氏桿菌，常對(duì)該種動(dòng)物呈現(xiàn)較強(qiáng)的致病力，對(duì)其他動(dòng)物較少引起交叉感染。豬巴氏桿菌?。贺i肺疫馬巴氏桿菌病牛巴氏桿菌病：牛出血性敗血癥羊巴氏桿菌病家兔巴氏桿菌病禽巴氏桿菌?。呵莼魜y，又名禽出敗鹿巴氏桿菌病貂巴氏桿菌?。乎醭鲅詳⊙Y駱駝巴氏桿菌病,15,毒力因子及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的感染,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠極易感染，家兔、鴿感染性強(qiáng)毒力因子莢膜耐熱外毒素內(nèi)毒素：含氮的磷酸脂多糖,16,分離培養(yǎng)：新鮮病料接種于鮮血瓊脂和麥康凱瓊脂

9、。菌落觀察：麥康凱上不生長(zhǎng)，鮮血瓊脂平板上生長(zhǎng)，24h后，可形成淡灰色、圓形、濕潤(rùn)、露珠樣小菌落，不溶血。革蘭氏染色為陰性兩極濃染的短小桿菌。血清瓊脂生長(zhǎng)良好，于45º折光下觀察菌落熒光； 生化試驗(yàn)：見(jiàn)前述,7、多殺性巴氏桿菌的微生物學(xué)診斷,17,動(dòng)物感染試驗(yàn),血瓊脂培養(yǎng)物,懸浮于2ml生理鹽水中,動(dòng)物死后剖檢，觀察病變,注射小白鼠、家兔,血液、肝、脾組織,美藍(lán)染色和革蘭氏染色,心血、肝、脾等組織,血瓊脂平板，觀察菌落

10、,,,,,,,,,,18,預(yù)防,使用疫苗：禽霍亂氫氧化鋁甲醛菌苗禽霍亂弱毒活菌苗禽霍亂組織滅活菌苗使用抗菌藥物喹諾酮類磺胺類鏈霉素、土霉素、氯霉素、慶大霉素及強(qiáng)力霉素,19,第二節(jié) 曼氏桿菌屬,該屬1999年成立，至少有7個(gè)種，代表種為溶血性曼氏桿菌（M.haemolytica），原名叫溶血性巴氏桿菌.,20,溶血性曼氏桿菌,形態(tài)和多殺巴氏桿菌相似，但比較大一些，長(zhǎng)2.5um，寬0.5um，呈球狀或桿狀。G－ 、無(wú)芽胞

11、、無(wú)鞭毛、有莢膜，兩極著色。營(yíng)養(yǎng)要求不嚴(yán)格，普通培養(yǎng)基生長(zhǎng)良好，培養(yǎng)24h后，菌落呈圓形、光滑、濕潤(rùn)，半透明。在血液瓊脂上，新分離的菌落呈微弱的ß溶血。連續(xù)傳代培養(yǎng)，溶血性便減弱或消失。,21,發(fā)酵某些糖類產(chǎn)酸不產(chǎn)氣（如葡、麥、蔗、半乳、果、甘露醇等）。與多殺巴氏桿菌相比不產(chǎn)生靛基質(zhì)、紫乳變酸且凝固，有些菌株產(chǎn)生硫化氫。在麥康凱上生長(zhǎng)慢，生成紅色菌落本菌的抵抗力與多殺巴氏桿菌相似。本菌按生化特性和致病力可分為兩個(gè)生物型：

12、A生物型包括1、2、5、6、7、8、9和11、12、13、14血清型；T生物型分為3、4、10、15血清型。 引起牛和綿羊的肺炎、新生羔羊敗血癥。,,22,血清型,屬的水平劃分按其生化反應(yīng)和致病力可分為A和T兩個(gè)生物型根據(jù)菌體表面蛋白抗原的差異，可分為17個(gè)血清型 T生物型：3，4，10，15A生物型：其余均屬此型 溶血性曼氏桿菌包括:1，2，5，6，7，8，9，12，13，14，16。代表株為血清型2，從綿羊分離,,,

13、,,,23,致病性毒力因子包括毒素、菌毛及莢膜多糖一般認(rèn)為毒力較強(qiáng)的致病菌株才有致病性本菌存在于牛、羊鼻咽部等，可致牛、綿羊肺炎、新生羔羊敗血癥、羊乳腺炎等微生物學(xué)診斷：從患病動(dòng)物的肺、水腫液等病料中分離本菌,24,第三節(jié) 里氏桿菌屬（Riemerella ）,概述 代表種為鴨疫里氏桿菌，原名鴨疫巴氏桿菌，為雛鴨傳染性漿膜炎的病原菌,25,鴨疫里默氏桿菌（Riemerella anatipestifer）,鴨疫里默氏桿

14、菌感染是家鴨、火雞和多種鳥(niǎo)類的一種接觸性傳染病。主要發(fā)生于2~3周齡鴨，死亡率10%，也稱為新鴨病、傳染性漿膜炎。鵝也可發(fā)生，稱為鵝滲出性敗血癥。該病呈急性或慢性敗血癥，特征病變?yōu)椋豪w維素性心包炎、肝周炎、氣囊炎、干酪性輸卵管炎和腦膜炎；也可能發(fā)生無(wú)任何癥狀的呼吸道感染。,26,該菌曾稱為“鴨疫巴氏桿菌”為什么？,形態(tài)特性：與巴氏桿菌形態(tài)相似，為G－ ，有莢膜，無(wú)芽胞、不運(yùn)動(dòng)，兩極著色。菌落形態(tài)也與巴氏桿菌相同。培養(yǎng)特性：在巧克

15、力瓊脂、血瓊脂、姨酶大豆瓊脂生長(zhǎng)良好。（但該菌培養(yǎng)時(shí)需要5%的CO2）生化特性：與敗血性巴氏桿菌基本相同。 由于以上等等因素，曾一度把鴨疫里默氏桿菌稱為“鴨疫巴氏桿菌”,27,現(xiàn)在為什么稱為 “鴨疫里默氏桿菌”,Hendrickson和Hilbert對(duì)該菌進(jìn)行了分離鑒定，稱為“鴨疫斐佛氏菌”Bruner和Fabricant認(rèn)為該菌與莫拉氏菌有較多的共同點(diǎn)，建議命名為“鴨疫莫拉氏菌”。第7版《伯杰氏細(xì)菌學(xué)鑒定

16、手冊(cè)》列為鴨疫巴氏桿菌。第8版、第9版《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》列為分類地位未定種。但將該菌從莫拉氏菌、巴氏桿菌中劃分出來(lái)。Segers等人，根據(jù)DNA-rRNA雜交分析、蛋白質(zhì)、脂肪酸組成和表型特征（如不產(chǎn)生色素、產(chǎn)生呼吸醌“7-甲基萘醌”）等，建議將該菌單獨(dú)列為“里默氏桿菌屬”，將該菌命名為“鴨疫里默氏桿菌”,28,抵抗力：不強(qiáng)，對(duì)多種藥物敏感，但易形成耐藥性致病性：主要感染雛鴨，以2~3周為主，兔和小鼠不易感，雛鵝也有感染微

17、生物學(xué)診斷：材料選擇：選用纖維素性滲出物，心包液、肝或心血培養(yǎng)基：選用綿羊鮮血瓊脂或巧克力瓊脂,血清型：目前已發(fā)現(xiàn)21個(gè)，我國(guó)以1型為主，近年 來(lái)也報(bào)道了2型存在,29,第四節(jié) 嗜血桿菌屬,某養(yǎng)雞戶飼養(yǎng)的商品蛋雞，發(fā)生了一種疾病。產(chǎn)蛋率由90%降至65%，無(wú)死亡。發(fā)病初期表現(xiàn)發(fā)熱、精神不振，食欲減退，有時(shí)下痢。比較典型的癥狀是：眼瞼和面部腫脹，流淚。從鼻道和竇腔內(nèi)流出漿液性分泌物，并有難聞氣味。嚴(yán)重者整個(gè)頭部水腫，眼垢粘

18、著眼瞼，造成了暫時(shí)性失明。病雞呼吸困難，氣管出現(xiàn)羅音，張口伸頸或甩頭，不斷搖頭甩出泡沫狀粘液。剖檢變化主要是：鼻腔和竇發(fā)生炎癥，粘膜充血水腫，表面有大量粘液和炎性滲出物的凝塊結(jié)痂，嚴(yán)重時(shí)氣管粘膜也有類似的炎癥。眼結(jié)膜充血、腫脹，眼部皮下水腫。病程較長(zhǎng)的病雞可見(jiàn)鼻腔、眶下竇和眼結(jié)膜內(nèi)有干酪樣物。,30,1、嗜血桿菌的染色與形態(tài)特性,染 色： G－ 。大 ?。盒〉街械却笮?，0.4-0.8×1.0-3.0μm 。形 態(tài)

19、：?jiǎn)蝹€(gè)、成對(duì)分布，兩極著色重 ，菌體形態(tài)似“啞鈴” 。有時(shí)形成絲狀，表現(xiàn)為多形性。新分離菌株有時(shí)能見(jiàn)到莢膜；無(wú)芽胞；無(wú)鞭毛。,31,32,流感嗜血桿菌,Gram stain of Haemophilus influenzae from sputum,33,嗜血桿菌的酶系統(tǒng)不夠完善，培養(yǎng)時(shí)需要加入X和V兩種生長(zhǎng)因子。X因子是指具有生長(zhǎng)促進(jìn)作用的血紅蛋白衍生物。V因子是輔酶I或輔酶II兩種脫氫酶的一種。血液中含有X和V兩種生長(zhǎng)因子。

20、需氧或兼性厭氧，雞嗜血桿菌培養(yǎng)時(shí)需要5%的CO2環(huán)境。,2、嗜血桿菌的培養(yǎng)特性,34,常用巧克力培養(yǎng)基。在巧克力瓊脂上生長(zhǎng)形成圓形、隆起、表面光滑、邊緣整齊、灰白色半透明的小菌落普通瓊脂和鮮血瓊脂生長(zhǎng)不良。衛(wèi)星現(xiàn)象：在鮮血瓊脂上培養(yǎng)時(shí)，如同時(shí)有葡萄球菌生長(zhǎng)，由于葡萄球菌可合成較多的V因子，因此可出現(xiàn)葡萄球菌周圍的嗜血桿菌菌落較大，離葡萄球菌越遠(yuǎn)則越小。菌落特點(diǎn)：呈針尖大小的露滴狀菌落菌落光滑、透明、不溶血，邊緣整齊。,續(xù)：,

21、35,副雞 嗜 血 桿 菌,36,37,糖發(fā)酵試驗(yàn)：能發(fā)酵：葡、麥、甘、蔗；不發(fā)酵：乳、伯膠糖等。硝酸鹽還原(＋)、H2S (－) 、明膠液化(－) 、靛基質(zhì)(－)氧化酶和接觸酶：因不同菌株而有差異。,3、嗜血桿菌的生化特性,38,4、抗原及分型,莢膜多糖抗原： 多糖和磷壁酸，具有型特異性菌體結(jié)構(gòu)抗原：脂多糖抗原和外膜蛋白抗原，在種內(nèi)和屬內(nèi)均有交叉流感嗜血桿菌根據(jù)莢膜抗原分為6個(gè)生物型，以Ⅰ~Ⅵ型表示,39,嗜血桿菌的抵

22、抗力不強(qiáng)： 常用消毒劑可殺滅； 一般在60℃條件下10~20分鐘即可殺滅； 室溫下只能生存2~4天。,5、嗜血桿菌的抵抗力,40,6、嗜血桿菌屬的致病力,毒力因子：莢膜、菌毛和內(nèi)毒素臨床意義：流感嗜血桿菌：引起各種呼吸道感染及小兒腦膜炎副流感嗜血桿菌：寄居人的上呼吸道副豬嗜血桿菌：4個(gè)血清型，為豬的下呼吸道的正常菌群，應(yīng)急狀態(tài)下，可引起全身感染，比如引起豬多漿病，即在大的體腔、關(guān)節(jié)、腦脊膜的纖維蛋白性炎癥。本菌也常與豬流感

23、病毒聯(lián)合引起豬流感副禽嗜血桿菌：引起禽類呼吸道系統(tǒng)疾病，引致雞鼻炎（可從氣管侵入到整個(gè)肺部）、打噴嚏及面部水腫，產(chǎn)蛋減少，對(duì)雛雞致病力較強(qiáng),41,（以雞傳染性鼻炎為例）病原分離鑒定：鏡檢 采取腦脊液、血液、分泌液分離培養(yǎng) 采用鮮血瓊脂或巧克力瓊脂V因子需要試驗(yàn) 用滅菌棉拭子蘸取病雞的眶下竇中的粘液或漿液，在鮮血瓊脂上劃線，并取保姆菌交叉劃線，于蠟燭瓶或CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18?24小時(shí)，若分離菌在血瓊脂平板上生長(zhǎng)呈現(xiàn)“

24、衛(wèi)星現(xiàn)象”，菌落呈露滴狀、針尖大小的小菌落，且過(guò)氧化物酶試驗(yàn)呈現(xiàn)陰性，則可作出診斷。由于嗜血桿菌在體外存活時(shí)間很短，對(duì)該病原菌的分離必須及時(shí)。,7、嗜血桿菌的微生物學(xué)檢查,42,,除了傳統(tǒng)的分離鑒定及常規(guī)的血清學(xué)方法外，還建立了更加特異敏感的ELISA方法、DNA探針及PCR診斷技術(shù)。,43,制定合適的防疫程序，加強(qiáng)預(yù)防力度，可減少傳染病的發(fā)生。（以傳染性鼻炎為例） 接種傳染性鼻炎菌苗能有效地預(yù)防本病的發(fā)生，現(xiàn)在中國(guó)和外國(guó)都有這類

25、商品性滅活菌苗供應(yīng)。在雞傳染性鼻炎的防制上，一般是在6~8周齡時(shí)進(jìn)行第一次菌苗接種，3~4周以后或產(chǎn)蛋前再加強(qiáng)免疫接種一次，可獲良好的免疫保護(hù)效果。,8、嗜血桿菌的免疫,44,第五節(jié) 放線桿菌屬Actinobacillus,本屬細(xì)菌為G－桿菌，兩極染色，兼性厭氧。,豬胸膜肺炎放線桿菌林氏放線桿菌駒放線桿菌,,對(duì)家畜有致病性的主要有3種：,45,1、形態(tài)、染色,G－球桿菌，兩極染色，無(wú)抗酸性； 三無(wú)：無(wú)莢膜、無(wú)芽胞、無(wú)鞭毛。,

26、46,2、培 養(yǎng),兼性厭氧；普通瓊脂生長(zhǎng)不良；常用血清瓊脂。菌落細(xì)小、圓形、粘稠；,,豬胸膜肺炎放線桿菌——β溶血林氏放線桿菌——藍(lán)灰色,47,3、致病性,（1）豬胸膜肺炎放線桿菌 特點(diǎn)：高度宿主專一性，臨床表現(xiàn)為最急性型、急性型、慢性型，病理變化根據(jù)病理長(zhǎng)短稍有差異，一般特點(diǎn)是：氣管和支氣管內(nèi)有大量血色液體和纖維素，粘膜水腫、出血和增厚；肺臟充血、腫大、出血、水腫和肝變，病程久者有大小不等的壞死灶和膿腫，胸腔積液，胸膜

27、表面覆有纖維素,48,毒力因子：莢膜、LPS、外膜蛋白、細(xì)胞毒素傳播方式：通過(guò)飛沫或直接接觸而傳播微生物學(xué)診斷病死豬肺壞死組織、胸水、鼻及氣管滲出物→涂片鏡檢，是否存在兩極濃染小桿菌→接種綿羊血瓊脂及巧克力瓊脂，置5% CO2 條件下培養(yǎng)→CAMP試驗(yàn)，檢測(cè)尿酶活性及甘露醇發(fā)酵能力,,,,49,預(yù)防和控制凈化豬群注射滅活疫苗,50,（2）林氏放線桿菌 致牛、羊的放線桿菌病，主要侵害皮膚及軟組織，引起化膿及肉芽