p16與c-myc基因表達(dá)產(chǎn)物在肝細(xì)胞癌及癌旁組織中的表達(dá)及臨床意義

1、p16p16與cmyccmyc基因表達(dá)基因表達(dá)產(chǎn)物在肝細(xì)胞癌及癌產(chǎn)物在肝細(xì)胞癌及癌旁組織中的表達(dá)及臨旁組織中的表達(dá)及臨床意義床意義中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志1999年第9卷第3期史憲杰李開宗竇科峰高志清張傳山胡沛臻馬福成目的：探討p16、cmyc蛋白與肝細(xì)胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)的發(fā)生、發(fā)展及惡性程度的關(guān)系。方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測了69例HCC和63例癌旁組織p16及cmyc蛋白的表達(dá)，并結(jié)合臨床資料進(jìn)

2、行分析。結(jié)果：p16蛋白主要分布在胞漿，少數(shù)細(xì)胞核內(nèi)也可見陽性顯色。cmyc蛋白主要分布在胞核。p16蛋白在肝癌組織及癌旁組織中的陽性率分別為26.5%(1869)和92%(5863)，兩者比較差異顯著(P＜0.01)。69例HCC標(biāo)本，Ⅰ級(jí)、Ⅱ級(jí)、Ⅲ級(jí)中p16蛋白的檢出率分別為52.6%(1019)，23.3%(730)，5%(120)，p16蛋白在高分化HCC中的表達(dá)率明顯高于低分化HCC組(P＜0.05)。cmyc蛋白在癌組織及癌

3、旁組織中的陽性率分別為85.5%(5969)鼠抗p16及cmyc單克隆抗體均購自美國SantaCruzbiotechnologyInc.DAKOEnVisionTMSystem兩步法免疫組織學(xué)染色試劑盒購自DAKO公司。1.3方法與步驟石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，3%H2O2甲醇封閉內(nèi)源性過氧化物酶活性，室溫下10min，PBS振洗5min3，浸泡于10mmolL檸檬酸緩沖液中(pH6.0)，微波修復(fù)抗原10min，自然冷卻至室溫后蒸餾水洗滌

4、，PBS振洗5min3，10%正常山羊血清封閉非特異背景染色37℃30min，切片加鼠抗p16單克隆抗體(1：150)，鼠抗cmyc單克隆抗體(1：100)，4℃過夜，37℃復(fù)溫30min，PBS振洗5min3，切片加mouseenVisionTM37℃30min，PBS振洗5min3，DAB顯色，蘇木精襯染，乙醇梯度脫水，二甲苯透明樹脂封片觀察。1.4對(duì)照試驗(yàn)陽性對(duì)照：用己知p16及cmyc陽性的切片重復(fù)染色；空白對(duì)照：用PBS代替第