植物檢疫第六章植物檢疫性病害及雜草

1、第五章 植物檢疫性病原物及雜草,本章重點(diǎn)重要檢疫性病原物的鑒別特征、自然寄主種類及其引起病害的癥狀特點(diǎn)重要檢疫性病原物的傳播途徑及檢疫檢驗技術(shù)檢疫性雜草的識別及傳播途徑,第一節(jié) 危險性病原真菌,基本特點(diǎn)所有真菌性病害都可通過種苗傳播，可經(jīng)由種子傳播的占3.5%;列入各國檢疫名單的有100多種,我國現(xiàn)行的名單中,A1類真菌11種，A2類2種，A3類73種，B類5種；,一、小麥矮腥黑穗病菌,學(xué)名 Tilletia contro

2、versa Kühn（TCK）異名 T. brevifaciens Fisch．分類地位 擔(dān)子菌亞門(Basidiomycotina)，冬孢菌綱（Teliomycetes），黑粉菌目（Ustilaginales），腥黑粉菌屬英文病名 Dwarf bunt of wheat,（一）發(fā)生簡史及危害,1874 Kühn在匍匐冰草上發(fā)現(xiàn)；1935年從網(wǎng)腥黑粉菌中區(qū)分開的一個“新變種”；是麥類黑粉菌中危害最大、防

3、治極難的病害之一；在美國北部發(fā)生嚴(yán)重，1972年減產(chǎn)17%，重病田減產(chǎn)90%；為我國禁止進(jìn)境的A1類檢疫性病害。上海、大連、深圳等檢疫局曾多次從美國和德國轉(zhuǎn)口的小麥中截獲TCK孢子。,美洲：美國、加拿大等；尤其是美國中西部和東北部；歐洲：俄羅斯、烏克蘭、捷克斯洛伐克、波蘭等；亞洲：土耳其、伊拉克、伊朗、敘利亞、阿富汗、日本等；非洲：阿爾及利亞、利比亞、突尼斯和大洋洲的澳大利亞（為害冬大麥）等。,（二）境外分布,禾本科的 5個

4、族，18個屬，65個種或變種。被侵染的屬有山羊草屬、如冰草屬、剪股穎屬、看麥娘屬、燕麥草屬、雀麥屬、鴨茅屬、野麥屬、羊茅屬、絨毛草屬、大麥屬、黑麥草屬、早熟禾屬、黑麥屬、三毛草屬和小麥屬。在栽培條件下，矮腥黑粉菌主要為害冬小麥，也侵染大麥和黑麥。,（三）寄主范圍,植株矮化：為健株的1/4~2/3分蘗增多：健株2~4個，病株4~10個,病株,,健株,,（四）危害癥狀特點(diǎn),病穗,健穗,小花增多、病穗寬大緊密：健株3~5，病株5~7病

5、粒近球型、有魚腥味，成熟后成菌癭。,（四）危害癥狀特點(diǎn),病原形態(tài) 冬孢子黃褐色，球形、近球形，直徑19.73～22.2 μm;外壁有多角狀網(wǎng)紋; 網(wǎng)目4.5～6.4個;網(wǎng)脊高0.82～1.77 μm; 膠質(zhì)鞘無色透明1.2～2.16μm。不孕孢子球形無色，薄壁，光滑，有的也包被膠鞘。,（五）病原形態(tài)與生物學(xué),小麥矮腥黑穗病菌冬孢子,小麥矮腥黑穗病菌冬孢子,TCK擔(dān)孢子“H”型結(jié)合,,小麥矮腥黑穗病菌與近似種冬孢子形態(tài)比較,小麥網(wǎng)腥黑

6、穗病菌,小麥光腥黑粉病菌,小麥印度腥黑穗病菌,生物學(xué)特性冬孢子萌發(fā)需有長期低溫與光照。萌發(fā)溫度范圍最低-2℃≤T≤15℃，適溫為3～8℃。在5℃條件下，至少3周才開始萌發(fā)，6～8周為萌發(fā)高峰。在5℃培養(yǎng)3～4周，再移至-2～0℃，則在較短時間內(nèi)就可大量萌發(fā)。,（五）病原形態(tài)與生物學(xué),冬孢子萌發(fā)需有弱光照，適宜的照度為400～600lx。對濕度的要求不甚嚴(yán)格，土壤含水量35％～88％時均可萌發(fā)。矮腥冬孢子具有自發(fā)熒光；網(wǎng)腥冬孢子（除

7、少數(shù)未成熟者外）無此種自發(fā)熒光，這一特征可用于種的鑒別。,（五）病原形態(tài)與生物學(xué),三種腥黑粉菌冬孢子有關(guān)特征的比較,土傳疫區(qū)土壤帶菌是主要的侵染菌源。分散的冬孢子在病田土壤中存活l～3年，菌癭中的冬孢子可存活3～10年。冬孢子在水田中只能存活5個月。冬孢子經(jīng)過牲畜的消化道后仍可萌發(fā)。種傳 附著在子表面，或混雜在種子間遠(yuǎn)距離傳播。,（六）傳播途徑,運(yùn)載工具 隨著被孢子污染的包裝材料等遠(yuǎn)傳。疫區(qū)的孢子可隨風(fēng)雨、河水和灌溉水傳

8、播到較遠(yuǎn)的無病區(qū)。病麥加工后的下腳料、洗麥水等 若不慎隨糞肥施入田間或流入田間都可污染土壤。,（六）傳播途徑,發(fā)病規(guī)律,發(fā)病關(guān)鍵因素：冬孢子萌發(fā)溫度0~5 ℃ ，40d；寄主組織幼嫩。,,過篩檢驗 在各艙各層次按棋盤式隨機(jī)選點(diǎn)20～30個，每點(diǎn)至少取1kg樣品，用1.7mm ×20mm長孔篩或2.5mm圓孔篩進(jìn)行篩檢，仔細(xì)檢查篩下物中有無菌癭及其碎塊，并同時檢查篩上物。癥狀檢查 將樣品倒入滅菌白瓷盤內(nèi)，仔細(xì)檢查有無菌

9、癭或碎塊，挑取可疑組織在顯微鏡下檢查鑒定。同時對現(xiàn)場檢查時攜回室內(nèi)的篩上挑出物和篩下物進(jìn)行檢查，將發(fā)現(xiàn)的可疑病組織及其他可疑的感染黑穗病的禾本科作物及雜草種子進(jìn)行鏡檢鑒定。,（七）檢驗方法,洗滌檢驗 檢查附著于種子表面的病菌冬孢子。在顯微鏡下觀察，與其它病原菌相區(qū)分。孢子萌發(fā)檢驗 3%瓊脂培養(yǎng)基。設(shè)5 ℃和17 ℃/無光照,（七）檢驗方法,冬孢子自發(fā)熒光顯微檢驗 從菌癭上刮取冬孢子于載玻片上，然后加一滴無熒光載浮劑，封片后置于

10、激發(fā)波長為485nm，屏障濾片波長為520nm的落射熒光顯微鏡下，檢查視野中呈熒光正負(fù)反應(yīng)的冬孢子數(shù)，統(tǒng)計冬孢子自發(fā)熒光率，全過程不得超過3 min。冬孢子自發(fā)熒光率大于或等于80%，為TCK。PCR技術(shù),（七）檢驗方法,二、馬鈴薯癌腫病菌,學(xué)名 Synchytrium endobioticum（Schilb．） Percival異名 Chrysophlyctis endobiotica （Schil．）

11、 Synchytrium solanl Massee 英文病名 Potato wart disease， Black wart of potato， Black scab of potato分類地位 鞭毛菌亞門（Mastigomycotina）壺菌綱(Chytridiomycetes）壺菌目（Chytridiales）集壺菌屬（ Synchytrium）危險性分析 我國列為A1類檢疫性真菌,亞洲的日本、印度、巴基斯坦、

12、緬甸、巴勒斯坦、黎巴嫩、以色列、尼泊爾；非洲的突尼斯、阿爾及利亞、津巴布韋、南非、肯尼亞、坦桑尼亞；美洲的加拿大、美國、巴西、秘魯、阿根廷、智利、哥斯達(dá)黎加、烏拉圭、厄瓜多爾、玻利維亞、墨西哥、?？颂m群島；歐洲的英國、德國、奧地利、比利時、匈牙利、荷蘭、丹麥、波蘭、盧森堡挪威、葡萄牙、羅馬尼亞、前蘇聯(lián)、芬蘭、法國、捷克、斯洛伐克、瑞士、瑞典、意大利、前南斯拉夫、希臘、保加利亞、西班牙、冰島、愛爾蘭、法羅群島；大洋洲的新西蘭、澳大利亞。

13、我國四川、云南部分地區(qū);,（一）境外分布,馬鈴薯癌腫病在全球的分布,寄主范圍 自然條件下主要侵染馬鈴薯。也有資料記載可侵染番茄、甘苦茄、龍葵、京豆屬和假酸漿屬。 危害情況 危害馬鈴薯薯塊，導(dǎo)致大幅度減產(chǎn)。常發(fā)生區(qū)內(nèi)一般減產(chǎn)50％，重者絕收，且品質(zhì)變劣，重病薯塊不堪食用，輕病薯塊也煮不爛。此病在冬季儲藏期間也引起腐爛。 前蘇聯(lián) 感病品種損失80%；中國 四川重病田病株率100%。,（二）寄主范圍及危害,高感品種可在腋芽和莖間

14、形成小癌瘤。莖、花梗、花萼、葉背可長出無柄、有主脈無分脈的叢生小葉。,（三）典型癥狀,馬鈴薯莖基部被害狀,莖基部、匍匐莖：形成較大的甚至包圍整個莖基部的畸形、粗糙、疏松的腫瘤，酷似花椰菜。,馬鈴薯薯塊被害狀幼薯整個變成畸形。較大薯塊在芽眼處形成畸形的癌瘤。,有的品種根系也可發(fā)病產(chǎn)生癌腫瘤。癌瘤的數(shù)目、大小，因品種的感染性、感病的遲早、侵染點(diǎn)的多少和發(fā)病程度而異。癌腫初為白色，見光后漸為綠色，最后變褐至黑色，腐爛。,（三）典型癥狀,

15、休眠孢子囊 銹褐色，近球形，壁厚，分為三層，大小為50～82× 38～69µm，孢子壁厚4.l～10.5 µm ，外壁厚呈褐色內(nèi)壁薄而無色。休眠孢子萌發(fā)分裂產(chǎn)生無數(shù)的單鞭毛游動孢子，呈球形或洋梨形，侵入寄主表皮細(xì)胞后引起瘤狀突起，很快進(jìn)入繁殖階段產(chǎn)生夏孢子囊。夏孢子囊成熟釋放游動孢子再侵染。條件不適宜時，產(chǎn)生配子→結(jié)合成雙鞭毛的合子→侵入寄主細(xì)胞→休眠孢子囊,（四）病原形態(tài)及生物學(xué),病原物形態(tài)特征,休眠

16、孢子囊,夏孢子囊,病害循環(huán)特點(diǎn),土壤溫度、濕度和pH值是影響該病發(fā)生的關(guān)鍵因子。休眠孢子囊、夏孢子囊萌發(fā)釋放游動孢子要求近飽和的濕度。發(fā)病的適宜溫度12~24℃、pH4.5~7。多發(fā)生于海拔較高的山區(qū)；炎熱干旱的平原極少發(fā)病。,（五）發(fā)病規(guī)律,氣候與發(fā)病的關(guān)系：溫濕度、降雨、日照是影響病害發(fā)生的主要因素。關(guān)鍵性因素是馬鈴薯生長季節(jié)的雨日與雨量。,（五）發(fā)病規(guī)律,海拔高度與發(fā)病的關(guān)系 ：在馬鈴薯種植上下限范圍內(nèi)，海拔較高的地塊發(fā)病重。

17、坡向與發(fā)病的關(guān)系：在同一海拔高度內(nèi)，陰坡比陽坡發(fā)病重。品種與發(fā)病的關(guān)系：不同品種的抗性有一定的差異。耕作制度和栽培措施與發(fā)病的關(guān)系：病地連作發(fā)病重，輪作可減輕發(fā)病。土壤酸堿度與發(fā)病的關(guān)系：是中性至微酸最適發(fā)病。,（五）發(fā)病規(guī)律,癥狀檢驗 檢查塊莖及根等的芽周圍有無癌腫組織。顯微鏡檢查 將芽及其周圍的塊莖組織帶表皮作斷面切片，顯微檢查有無夏孢子堆或休眠孢子囊存在。夏孢子堆黃褐色、壁厚，有的具不規(guī)則脊突。土壤檢查 對來自病區(qū)的馬

18、鈴薯塊莖及其他植物的塊根、塊莖、機(jī)器上所附帶的少量土壤，要檢查是否帶有馬鈴薯癌腫病的休眠孢子。常用的檢查方法有氯仿漂浮法、二澳乙烷漂浮法、油漂浮法和氫氟酸瘁取法。,（六）檢驗方法,第二節(jié) 危險性病原細(xì)菌,細(xì)菌的基本特點(diǎn)細(xì)菌病害包括有薄壁菌門、厚壁菌軟門和軟壁菌門引起的病害，有300多種；所有細(xì)菌性病害都可通過種苗傳播，經(jīng)由種子傳播的占40%;主要是革蘭氏陰性的假單胞菌、黃單胞菌和革蘭氏陽性的棒形桿菌。列入我國檢疫名單的有57種,其

19、中A類52種，B類5種。,一、柑橘潰瘍病菌,學(xué)名 Xanthomonas axonopodis pv. citri Vauterin et al 1995英文病名 Citrus canker; Bacterial canker of citrus 分類地位 薄壁細(xì)菌門（Gracilicutes）假單胞菌科（Pseudomonaceae）黃單胞菌屬（Xanthomonas）危險性分析 B類檢疫性細(xì)菌,亞洲的阿富汗、孟加拉、印度、巴

20、基斯坦、斯里蘭卡、印度尼西亞、馬來西亞、菲律賓、越南、緬甸、尼泊爾、老撾、柬埔寨、泰國、日本、韓國、朝鮮、馬爾代夫、阿拉伯聯(lián)合酋長國、也門；美洲的阿根廷、巴西、巴拉圭、烏拉圭、美國、墨西哥、伯利茲、多米尼加、海地、馬提尼克、瓜德羅普；非洲的加蓬、馬達(dá)加斯加、科摩羅、科特迪瓦、毛里求斯、莫桑比克、留尼汪；大洋洲的巴布亞新幾內(nèi)亞、斐濟(jì)、關(guān)島、馬里亞納群島、密克羅尼西亞群島等國家均有分布。尤以亞洲國家發(fā)病最為普遍。 中國 廣東、廣西、福建等

21、柑橘產(chǎn)地。,（一）境外分布,主要侵染蕓香科野生和栽培的植物。在經(jīng)濟(jì)上造成損失最大的是柑橘，主要以甜橙、臍橙、酸橙、紅江橙、來檬和官溪蜜柚、通賢柚等最為感病。自然侵染主要發(fā)生在柑橘屬植物上，也發(fā)生在枸橘、金橘、菲律賓木橘上。,（二）寄主范圍,可為害葉片、枝梢和果實(shí)。苗圃發(fā)病，苗木生長不良，出圃延遲；成年結(jié)果樹發(fā)病，常引起大量落葉、落果，甚至枯梢，降低樹勢；未脫落的輕病果形成木栓化開裂的病斑，嚴(yán)重影響果品的外觀和品質(zhì)，降低了商品價值。

22、20世紀(jì)初 美國燒毀柑橘樹25萬多株、苗木27萬株，損失600萬美元。我國貴州20世紀(jì)80年代，銷毀病株300萬株。,（三）危害情況,葉片 背面產(chǎn)生圓形、針頭大小微突起的油浸狀半透明斑點(diǎn)，通常為深綠色，病斑周圍組織褪色呈現(xiàn)黃色暈環(huán)。后斑點(diǎn)逐漸隆起，病部表面出現(xiàn)開裂，呈海綿狀，并開始木栓化，形成表面粗糙、灰白色或灰褐色、中心凹陷的病斑。后期病斑似“火山口”狀開裂。病斑大小依品種而異，一般直徑在3～4mm，有時幾個病斑連合，形成不規(guī)則的

23、大病斑，嚴(yán)重時引起葉片早期脫落。,（四）癥狀特點(diǎn),柑桔潰瘍病,枝梢癥狀 夏秋梢受害嚴(yán)重，春梢受害較輕。病斑特征與葉片類似，但病斑木栓化和隆起以及病斑中部開裂或下陷程度比葉片更明顯，枝捎上的病斑周圍無黃色暈環(huán)。幼苗及嫩梢被害后，導(dǎo)致葉片脫落，嚴(yán)重時甚至枯死。,（四）癥狀特點(diǎn),柑桔潰瘍病在枝干上的癥狀,果實(shí)癥狀 果實(shí)被害的癥狀與葉片上相似，病斑通常較葉上的大，一般直徑為4～5mm，最大的可達(dá) 12mm。病斑木栓化程度及病斑后期中部開裂

24、或下陷狀況都比葉片顯著。病斑僅侵害果皮，很少深入到果肉部分。發(fā)生嚴(yán)重時常引起早期落果。,（四）癥狀特點(diǎn),柑桔潰瘍病在果實(shí)上的癥狀表現(xiàn),上：自右至左為發(fā)病初、中及后期癥狀。下：潛葉蠅危害造成傷口及傳播病菌加重危害,不同感病柑橘種類果實(shí)及植株癥狀,形態(tài) 短桿狀，兩端鈍圓。大小為1.5～2.0µm×0.5～0.7µm，極生單鞭毛，革蘭氏染色陰性 。培養(yǎng)性狀 在馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基上，菌落初呈鮮黃色，后轉(zhuǎn)蠟黃色

25、，圓形，表面光滑。在牛肉汁蛋白胨培養(yǎng)基上，菌落圓形，蠟黃色，表面稍隆起，粘稠狀。生長條件 適溫為20～30℃，致死溫度為 55～60 ℃ 10min。在相對濕度較低的土壤表面，病菌能在落葉中存活90～100天。在潮濕的沙中則只能存活24天。病菌生長發(fā)育適合pH為6.l～8.8，最適pH為6.6。,（五）病原形態(tài)與生物學(xué),遠(yuǎn)距離傳播 人為的引種，商品的流通。帶病種子、苗木、繁殖材料和果實(shí)是該病傳播的載體。田間傳播 通過風(fēng)雨、昆

26、蟲和農(nóng)事操作等。高溫、多雨有利發(fā)病;,（六）傳播途徑,癥狀觀察 病斑周圍組織褪色呈現(xiàn)黃色暈環(huán)。病斑隆起，病部表面出現(xiàn)開裂，呈海綿狀、木栓化，表面粗糙、灰白色或灰褐色、中心凹陷。后期病斑似“火山口”狀開裂。細(xì)菌溢檢查在低倍鏡下觀察，病菌自植物組織逸出。,（七）檢驗方法,分離培養(yǎng) 在缺乏典型癥狀的惰況下，可取一定數(shù)量的葉片、果實(shí)或枝梢，用蛋白胨磷酸緩沖液沖洗，洗液在室溫下孵育3h，然后用細(xì)菌過濾器濃縮，以濃縮液在人工培養(yǎng)基上劃線

27、分離，再經(jīng)酶聯(lián)或免疫熒光檢驗。對無法確定的病斑，可取小塊病組織于0.5～2ml蒸餾水中，室溫孵育15～20min，提取液在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上劃線分離培養(yǎng)，根據(jù)潰瘍病菌的菌落形態(tài)特征選取菌落。,（七）檢驗方法,生物學(xué)檢驗,分離獲得病菌通過接種鑒定。方法為柑橘完全展開的新葉片，用無菌水沖洗干凈后用滅菌的3號昆蟲針在葉片背面上穿刺出小孔。滅菌濾紙片在培養(yǎng)48 h的柑橘潰瘍病菌液浸濕，敷于葉片有小孔部位，置于墊有保濕濾紙的滅菌平皿內(nèi)26℃培養(yǎng)。

28、24 h后除去濾紙片，2 d后開始觀察葉片發(fā)病情況。,血清學(xué)檢測 制備代表性菌株的抗血清，常用檢測方法間接ELISA；斑點(diǎn)免疫（DIA－ELISA）；免疫熒光試驗（IF）。血清學(xué)檢測具有迅速準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。其它 噬菌體檢驗、PCR等,（七）檢驗方法,二、梨火疫病菌,學(xué)名 Erwinia amylovora（Burrill 1882） 英文病名 Fire blight分類地位 薄壁菌門（Gracilicutes）腸桿菌科（E

29、nterobacteriaceae）歐文氏菌屬（Erwinia）,（一）發(fā)生簡史及危險性分析,發(fā)生簡史1878年，Burrill 描述，以后由Erwin F. Smith命名，梨火疫病是第一個被確認(rèn)的植物細(xì)菌性病害。危險性分析 是一種毀滅性細(xì)菌病害，我國列為A1類檢疫性有害生物。,最早發(fā)生于美國東北部。目前已分布在世界40多個國家。美洲的美國、加拿大、哥倫比亞、墨西哥、百慕大、危地馬拉；歐洲的阿爾巴尼亞、愛爾蘭、奧地利、比利時、保

30、加利亞、丹麥、德國、法國、荷蘭、瑞典、烏克蘭、西班牙、希臘、匈牙利、意大利、馬其頓、挪威、波蘭、捷克、羅馬尼亞、瑞士、英國、摩爾達(dá)維亞、波斯尼亞、克羅地亞、盧森堡、斯洛伐克和前南斯拉夫；大洋洲的澳大利亞和新西蘭；非洲的埃及；亞洲的亞美尼亞、伊朗、以色列、約旦、黎巴嫩、土耳其、印度、日本和塞浦路斯。,（二）境外分布,梨火疫病菌寄主范圍很廣，大部分是薔薇科仁果類植物，主要有梨、蘋果、山楂、李、草莓、枇杷、腺肋花、木瓜、火棘、薔蔽、石斑木、懸

31、鉤子、花楸、繡線菊等4O多個屬220多種植物。,（三）寄主范圍,花、果實(shí)和葉片受侵害后，很快變黑褐色枯萎，但不落葉，猶如火燒一般，故此得名。根據(jù)病害發(fā)生的部位，可分為花腐、枝枯、潰瘍及果腐等。 花腐 一般發(fā)生于早春，病菌直接從花器侵人，初為水漬狀斑，不久萎蔫。在溫暖潮濕條件下，花梗上有菌膿滲出。 潰瘍 最初是在樹皮組織上出現(xiàn)窄的水漬狀區(qū)，幾天后，樹皮內(nèi)部組織出現(xiàn)褐色條斑，隨后病菌侵入附近的枝條內(nèi)部并引起萎蔫死亡。,（四）癥狀特點(diǎn)

32、,枝枯 嫩枝是除花外最感病的部位。最初癥狀是枝尖萎蔫，但不褪色，呈“牧羊鞭”狀。條件適宜時，幾天內(nèi)可移動15～30cm以上，造成整枝死亡。病枝、枝皮、葉片通常變黑色。潮濕時，枝條上出現(xiàn)菌膿。果腐 引起幼果和成熟果實(shí)的腐爛，果實(shí)表面通常有菌膿或菌束。在儲藏期可以引起爛果。,（四）癥狀特點(diǎn),,花部被害狀,梨 火 疫 病,蘋果樹干被害狀 梨樹干細(xì)菌分泌物,枝條被害狀

33、 蘋果枝條被害早期癥狀,,側(cè)枝基部形成潰瘍斑,,蘋果幼果被害狀,Devastation by fire blight (Erwinia amylovora) of a 2-year-old high-density pear,越冬場所 病菌在潰瘍邊緣組織處越冬，掛在樹上的病果也是越冬場所。如冬季溫暖，病菌還能在病株樹皮上越冬。來年早春病菌在上年的潰瘍處迅速繁殖，遇到潮濕、溫暖的天氣，從病部滲出大量乳白色粘稠狀的細(xì)菌分泌物

34、，即為當(dāng)年的初侵染源。,（五）傳播途徑,雨水是果園短距離傳播的主要媒介，風(fēng)在中短距離傳播中亦起重要作用。病害往往沿著順風(fēng)的方向傳播。病菌亦通過傷口、自然孔口（氣孔、蜜腺、水孔）、花侵入寄主組織，有一定損傷的花、葉、幼果和茂盛的嫩枝最易感病。,（五）傳播途徑,昆蟲和鳥類 對梨火疫病的傳播擴(kuò)散起一定的作用。據(jù)記載，傳病昆蟲包括蜜蜂在內(nèi)有77個屬的100多種昆蟲，其中蜜蜂的傳病距離為 200～ 400m。梨火疫病的自然傳播距離每年約為6km

35、，但鳥類的傳播距離可以很遠(yuǎn)，尤其是候鳥，它們在遠(yuǎn)距離擴(kuò)散中起重要作用。遠(yuǎn)距離傳播 主要是感病寄主材料的調(diào)運(yùn)，包括種苗、接穗、砧木、水果、被污染的運(yùn)輸工具等。,（五）傳播途徑,可采用多種檢驗方法。從經(jīng)典的分離培養(yǎng)、致病性測定、癥狀觀察等到先進(jìn)的分子生物學(xué)技術(shù)，包括DNA探針、PCR技術(shù)的應(yīng)用及脂肪酸分析、單克隆抗體的應(yīng)用等。但在目前檢疫方法上仍采用血清學(xué)技術(shù)結(jié)合分離培養(yǎng)及致病性測定來確診。,（六）檢驗方法,產(chǎn)地檢驗 是一項最基本的檢驗方

36、法，在應(yīng)檢病害的發(fā)生盛期到田間檢查與觀察，必要時須采集可疑標(biāo)本在室內(nèi)進(jìn)行檢測和鑒定。分離培養(yǎng)對于癥狀明顯的材料可直接分離病原；分離可采用選擇性培養(yǎng)基和鑒別性培養(yǎng)基進(jìn)行。,（六）檢驗方法,血清學(xué)檢測 間接免疫熒光抗體染色 、 ELISA法 致病性檢驗與過敏反應(yīng)檢驗 用梨葉片或梨嫩枝測定 核酸探針與PCR檢測技術(shù),（六）檢驗方法,全國農(nóng)業(yè)植物檢疫性有害生物名單中的病毒種類：36 李屬壞死環(huán)斑病毒 Prunus n

37、ecrotic ringspot ilarvirus37 煙草環(huán)斑病毒 Tobacco ringspot nepovirus38 番茄斑萎病毒 Tomato spotted wilt tospovirus,第三節(jié) 植物檢疫性病毒,進(jìn)境植物檢疫一、二類危險性病、蟲和雜草名錄,一、番茄環(huán)斑病毒,學(xué)名 Tomato ring spot virus（ToRSV）異名煙草環(huán)斑病毒 2號（ Toba

38、cco ring spot virus No．2）煙草病毒 13（Nicotiana virus 13） 桃黃芽花葉病毒（ Peach yellow bud mosaic virus）葡萄脈黃病毒（ Grape yellow vein virus）分類地位 豇豆花葉病毒科（Comoviridae），線蟲傳多面體病毒屬（Nepovirus）,主要在北美，即美國、加拿大等。此外，大洋洲的新西蘭、澳大利亞；歐洲的大部分

39、國家及亞洲的日本、土耳其等也有分布。在核果類及仁果類果樹上引起嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，是我國禁止進(jìn)境的一類檢疫性病害。,（一）境外分布及危險性分析,寄主范圍很廣，包括105個屬157種以上單、雙子葉植物。自然感染的寄主有桃、杏、李、櫻桃、番茄、葡萄、草莓、大豆、煙草、胡蘿卜等果樹、經(jīng)濟(jì)作物和觀賞植物等。ToRSV是北美最嚴(yán)重的植物病毒之一。葡萄受侵染后節(jié)間縮短，莖尖叢生，葉脈黃化，坐果率低，單果變小，產(chǎn)量損失76％，嚴(yán)重感染時減產(chǎn)達(dá)95％，

40、甚至絕產(chǎn) 。,（二）寄主范圍及危害情況,葡萄以黃脈為主，葉片黃化、斑駁、褪綠環(huán)斑和卷葉，葉變??；節(jié)間縮短，頂端叢生，植株嚴(yán)重矮化；坐果率降低，果變小。,（三）癥狀特點(diǎn),ToRSV在指示植物上產(chǎn)生的急性反應(yīng)：褪綠斑塊,ToRSV加利福尼亞株系誘導(dǎo)產(chǎn)生典型的脈黃癥狀,,Mottling(left) and Ringlike lesion(right) on leaf.,Stunted shoots (left) and infecte

41、d vine clusters (right) on vine.,Apple Union Necrosis and Decline,蘋果 ToRSV能夠引起蘋果接合部壞死和退化病。,Tomato Ringspot Virus引起蘋果砧/穗 接合部產(chǎn)生褐色壞死紋（ Iain MacSwann, 1977）,,,（三）癥狀特點(diǎn),桃樹和李屬其他樹種 桃樹最典型癥狀是莖溝。桃黃芽花葉?。捍杭拘鲁鋈~芽淡黃色，后死亡。不同種李屬植物癥狀有差異

42、，葉片表現(xiàn)不同程度的褪綠或褪色，莖出現(xiàn)凹陷和溝槽。,（三）癥狀特點(diǎn),ToRSV 在桃樹上引起的莖痘癥狀Stem pitting in peach caused by tomato ringspot virus.,復(fù)盆子 ToRSV是北美復(fù)盆子上最危險的病毒。受侵染當(dāng)季不表現(xiàn)癥狀，第二年春天葉片表現(xiàn)黃色環(huán)斑、條紋或葉脈褪綠，與正常植株比較，很大比例的病株表現(xiàn)不結(jié)果或形成易碎果。,（三）癥狀特點(diǎn),Tomato ringspot virus

43、 symptoms on plants and leaves of red currants in Corvallis, Oregon,,病毒粒子為等軸對稱多面體，直徑約25 nm?；蚪M為+ssRNA, 全基因組大小為15.8 kb,其中RNA1和RNA2分別為8.5 kb和7.3 kb，外殼蛋白分子量為5.8kDa,（四）病毒特性,病毒粒子為等軸對稱多面體，直徑約25 nm。,該病毒可分為不同株系：煙草株系（tobacco st

44、rain） 自然條件下發(fā)生在煙草上；葡萄黃脈株系（grape yellow vein strain） 在自然條件下發(fā)生在葡萄上；蘋果結(jié)合部壞死株系（apple union necrosis strain） 自然條件下發(fā)生在蘋果上，引起蘋果樹結(jié)合部壞死和衰退；桃黃芽株系（peach yellow bud strain） 在自然條件下發(fā)生在扁桃、桃和杏上。,（四）病毒特性,汁液磨擦——草本寄主。嫁接——木本植物。種子和苗木調(diào)運(yùn)——

45、遠(yuǎn)距離擴(kuò)散。種傳率大豆 76％，千日紅 76％，接骨木 11％，蒲公英 24％，紅三葉草 3％～ 7％，番茄 3％。此外，番茄的花粉也能傳播 ToRSV，傳毒率為 11％。,（五）傳播途徑,介體線蟲——木本植物。劍線蟲屬線蟲（Xiphinema americanum, X. rivesi和X. californicum)是ToRSV田間流行的重要介體。成蟲和3齡幼蟲均可傳毒；其飼毒期和傳毒期均在l h以內(nèi)，線蟲傳毒能力可保持幾周或幾

46、個月，但蛻皮后喪失傳病力。,（五）傳播途徑,生物學(xué)檢測 汁液摩擦接種草本指示植物，可表現(xiàn)不同癥狀。 昆諾藜或莧色藜上表現(xiàn)為小的局部褪綠斑和壞死斑，系統(tǒng)的頂端壞死。黃瓜（Cucumis sativas）接種葉表現(xiàn)為局部褪綠斑，后系統(tǒng)褪綠和斑駁。煙草（Nicotiana tabacum）接種葉表現(xiàn)為局部的壞死斑和壞死環(huán)斑 。,（六）檢驗方法,（六）檢驗方法,電鏡觀察 電鏡觀察病毒粒體形態(tài)，測量粒體大小。血清學(xué)檢測 ELISA和免疫電

47、鏡法。注意株系特異性!分子生物學(xué) PCR、核酸雜交 。,基本特點(diǎn)植物寄生線蟲有207屬4832種。分類鑒定依據(jù)：雌蟲的外部形態(tài)及內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征，特別是消化道和生殖系統(tǒng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)。傳播途徑都可以通過種苗或種薯等無性繁殖材料傳播；部分通過種子傳染，例如水稻干尖線蟲，小麥粒癭線蟲等；松萎蔫線蟲可通過介體昆蟲（松褐天牛）傳播；土壤中的許多線蟲可隨土壤傳播。,第四節(jié) 植物檢疫性線蟲,一、松材線蟲,英文名：Pine wilt dis

48、ease學(xué) 名：Bursaphelenchus xylophilus（Steiner &Buhrer，1934）Nickle，1970 ，嗜木質(zhì)傘滑刃線蟲，屬墊刃目滑刃線蟲科。危險性分析：松材線蟲萎蔫病是一種由褐天牛傳播的森林毀滅性病害。由于它能引起植株迅速死亡，導(dǎo)致大片松林荒蕪，國內(nèi)外對它皆十分重視，是我國禁止進(jìn)境的檢疫性線蟲。,松材線蟲病最早于1905年在日本九州、長崎及其周圍發(fā)生。目前在日本、美國、加拿大、墨西哥、韓

49、國、朝鮮、葡萄牙和我國臺灣、香港、澳門、江蘇、浙江、安徽、廣東等省發(fā)生。,（一）發(fā)生簡史與分布,約1mm?？卺樇?xì)長，14~16um，基部球明顯。中食道球卵園形、神經(jīng)環(huán)位于中食道球后；單卵巢，卵母細(xì)胞單行排列。尾圓錐形，末端寬圓，無或有小的尾尖突。,,雌蟲,（二）病原形態(tài),雄蟲體形類似雌蟲;交合刺大，弓狀，成對，尾似鳥爪狀，腹向彎曲，尾端有一小的端生交合傘。,（二）病原形態(tài),目前已知可危害樹種達(dá)43種，主要為松屬植物。此外，

50、還有云杉屬、冷杉屬、落葉松屬和雪松屬的一些樹木。最感病的是日本赤松、日本黑松、硫球松、歐洲赤松和歐洲黑松等。我國已知的自然高感樹種是日本黑松，也有一定數(shù)量的馬尾松（P.massoniana）自然發(fā)病。,（三）寄主范圍,幼齡樹、數(shù)十年的大樹都能發(fā)病，病情嚴(yán)重，可導(dǎo)致全林毀滅。自1982年傳入我國以來，至1999年，病死木總量達(dá)1600余萬株。給林業(yè)生產(chǎn)帶來巨大損失，而且還給自然景觀及生態(tài)環(huán)境造成嚴(yán)重破壞。,（四）危害,病株針葉變?yōu)榧t

51、褐色，而后全株迅速枯萎死亡。針葉的變色過程是由綠色經(jīng)灰、黃綠色至淡紅褐色，由局部發(fā)展至全部針葉。在適宜發(fā)病的夏季，大多數(shù)病樹從針葉開始變色至整株死亡約30天左右。在表現(xiàn)外部癥狀以前，受侵病株的樹脂迅速減少和停止，屬相當(dāng)特異的內(nèi)部生理病變。,（五）病害癥狀特點(diǎn),松材線蟲-Close-up of pine wilt; 1 year after death of tree,自然條件下，松墨天牛是松材線蟲的傳播媒介。已發(fā)現(xiàn)有6種天牛能傳播松材

52、線蟲：松墨天牛、云杉墨天牛、卡羅來納墨天牛、白點(diǎn)墨天牛、南美墨天牛。其中，松墨天牛（Monochamus alternatus）是最主要的傳播媒介，它主要分布于日本、中國吉林及南朝鮮等地。墨天牛傳播松材線蟲主要有兩種方式：一種為補(bǔ)充取食期傳播；另一種為產(chǎn)卵期傳播。前者為主要的傳播方式。人為調(diào)運(yùn)病木及其加工品，是松材線蟲遠(yuǎn)距離傳播的唯一途徑。,（六）傳播方式,松材線蟲介體,The nematode is vectored by spe

53、cies of Monochamus (a.k.a. sawyers or longhorned beetles).,移居性內(nèi)寄生線蟲；溫度和土壤中水分的含量與發(fā)病率有密切關(guān)系。高溫和干旱有利于該病的發(fā)生。最適溫度為20—30℃。北方和高山地區(qū)的病樹病情發(fā)展緩慢，為害不明顯。缺水加速松材線蟲萎蔫病的病程、病樹的死亡率也提高。,（七）發(fā)生條件及發(fā)生范圍,產(chǎn)地檢疫 根據(jù)為害狀。無典型癥狀的地區(qū)，查找有天牛為害的蟲孔、碎木屑等

54、痕跡的植株，在樹干任何部位作一傷口，幾天后觀察，如傷口充滿大量的樹脂為健樹，否則為可疑病樹。,（八）病原線蟲的檢驗,在樹干、樹皮及根部取樣切成碎條，或用麻花鉆從天牛蛀孔邊上鉆取木屑，用貝爾曼法或淺盤法分離線蟲。發(fā)現(xiàn)線蟲則制成臨時玻片，在顯微鏡下進(jìn)一步鑒定。如發(fā)現(xiàn)幼蟲，可用灰葡萄孢霉Botrytis cinerea等真菌飼喂，待獲得成蟲后再作鑒定。,（八）病原線蟲的檢驗,檢測時，要注意和一個近似種擬松材線蟲（B.mucronotus）的