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1、y7 7 3 8 1 2分類號:s 6 8密級:公開單位代碼:1 0 0 1 9學(xué) 號:B 0 1 0 6 2飛蛾寰- f 夭絮博士學(xué)位論文S O D , l A P X 與切花月季‘S a m a n t h a ’失水脅迫耐性問的關(guān)聯(lián)T h e R e l a t i o n s h i p b e t w e e n S u p e r o x l d e D i s m u t a s e ( S O D ) ,A s e o
2、r b 啦e e r o x i d a s e ( A P X ) a n d T o l e r a n c e t o W a t e r D e f i d t S t r e s si nC u t R o s e ‘S a m a n t h a '研 究 生:金基五指 導(dǎo) 教 師:高俊堊教援合作指導(dǎo)教師:處自然熬援申請學(xué)位門類級別:王堂堙±專 業(yè) 名 稱:盛些生塹還縫曼能遂王貍研 究 方 向:理堂擅物墨奄
3、生理所 在 學(xué) 院:盔堂生生物拉苤堂院2 0 0 5 年6 月A b s t r a c tI t h a sb e e nr e p o r t e dt h a tt o l e r a n c eo f p l a n t st oe n v i r o n m e n t a ls t r e s s e si sc l o s e l yr e l a t e dt o r e g u l a t i o no f a n t
4、 i 。o x i d a n ts y s t e m i np l a n t st h e m s e l v e s .T h i se x p e r i m e n t w a s a i m e d t o i n v e s t i g a t et h er e l a t i o n s h i pb e t w e e nk e ye n z y m e si na n t i —o x i d a n ts y
5、s t e m ,s u p e r o x i d ed i s m u t a s e ( S O D ) a n d a s c o r b a t e p e r o x i d a s e ,( A P X ) a n dt o l e r a n c et ow a t e rd e f i c i ts t r e s si l l c u t r o s e s ( R o s a ^ y b r i d a ) .F
6、l o w e r so f ‘S a m a n t h a ’w e r ep r e t r e a t e dw i t he n h a n c e m e n t r e a g e n to r /a n di n h i b i t o r so f t h e t w o k e ye n z y m e sf o r1 2h ,w a t e rd e f i c i ts t r e s s e df o r d
7、i f f e r e n t p e r i o d ,a n dv a s e df o rl a t e ro b s e r v a t i o n .T h er e s u l ts h o w e d :1 .C o m p a r e dw i t hn o n - s t r e s s e dc o n t r o lf l o w e r s ,w a t e rd e f i c i ts t r e s si
8、n c r e a s e ds i g n i f i c a n t l yb e n tn e c kr a t e ,r e d u c e dw a t e rr e c o v e r yr a t e ,i n h i b i t e df l o w e ro p e n i n g p r o c e s sa n ds h o r t e n e dv B s el i f eo f f l o w e r s .W
9、 a t e rd e f i c i t s t r e s st r e a t m e n ti n c r e a s e do b v i o u s l y S O Da c t i v i t y , M D Ac o n t e n ta n d r e l a t i v ee l e c t r i cc o n d u c t i v i t ya n dd e c r e a s e d m a r k e d
10、l y A P X a c t i v i t ya n da s c o r b a t ea c i d ( A s A ) c o n t e n t ,2 .S O Da c t i v i t y i n p e t a l s w a s r e m a r k a b l y i n h i b i t e d b y 2 0m MD D T Cp r e t r e a t m e n t ,a n d f l o w
11、e rt o l e r a n c et o w a t e r d e f i c i tW a So b v i o u s l yd e c r e a s e d ,w h i c hw a s e v i d e n c e db yt h eo b v i o u s i n c r e a s eo fb e n tn e c k r a t e ,t h e s i g n i f i c a n td e c r e
12、 a s e o f w a t e rr e c o v e r y r a t ea n df l o w e rw a t e rp o t e n t i a l a n dt h ed r a m a t i cr e d u c t i o n o fv a s e l i f e .T h r e et y p e s o fS O Dw e r eo b s e r v e d i n t h e p e t a l s
13、o fc o n t r o l i n t h ee a r l i e r s t a g e so f f l o w e ro p e n i n g , a n dt h e r ew e r e t h r e eF e S O D i s o f o n n s ,t w o C u - Z n S O Di s o f o r m sa n do n eM n S O D i s o f o r m ,r e s p e
14、 c t i v e l y .T h e t u r n o f m o b i l i t y W a S C u —Z n S O D > F e S O D > M n S O D ;a n db a n d s a c t i v i t yW a sF e S O D > C u - Z n S O D > M n S O D .B y w a t e r d e f i c i ts t r e s
15、 s .t h r e e n e w b a n d s .n a m e dF e S O D 4 ·6 ,w e r ei n d u c e d a n dM n S O Dd i s a p p e a r e d s i m u l t a n e o u s l y .H o w e v e r , t h en e w l yi n d u c e db a n d sb y w a t e rd e f i
16、c i ts t r e s sa b o v ew e r e i n h i b i t e db yD D T C p r e t r e a t m e n t .3 .C o m p a r e dw i t hS t r e s sc o n t r o l ,p r e t r e a t m e n tw i t h 1 0 0 0m g /LA s A ,a s u b s t r a t e o fA P X ,i
17、n c r e a s e de f f e c t i v e l yw a t e rr e c o v e r yr a t e o f f l o w e r s ,e x t e n d e dv a s el i f e a n di m p r o v e df l o w e ro p e n i n gp r o c e s s .T h ep r e t r e a t m e n t a l s oe n h a
18、n c e de f f e c t i v e l y A P X a c t i v i t y a n dA s A c o n t e n ti n p e t a l s ,b u td e c r e a s e dr e l a t i v e e l e c t r i cc o n d u c t i v i t y .A s o u r e x p e c t a t i o n ,p r e t r e a t m
19、 e n t w i t h 5 0 0m g /L p - a m i n o p h e n o l ,as u i c i d ei n h i b i t o ro f A P X ,a c q u i r e dc o n t r a r yr e s u l t s .4 .A P X a c t i v i t yi np e t a l so f w a t e r d e f i c i ts t r e s s e
20、df l o w e r sw a s e f f e c t i v e l yr e g u l a t e db y 5m M A s A a n d6m M 1 3 - a m i n o p h e n 0 1 .C o m p a r e dw i t hS t r e s sc o n t r o l ,v a s el i f e W a s e x t e n d e d ,f l o w e ro p e n i n
21、 gp r o c e s sa n d w a t e rr e l a t i o nW a s a l l e v i a t e d ,M D Ac o n t e n t w a sd e c r e a s e da n dS O D a c t i v i t yW a si n c r e a s e di nf l o w e r si nw h i c hA P X a c t i v i t yW a s i n
22、c r e a s e d .I d e a lc o u n t e r e v i d e n c ew a s o b t a i n e di nf l o w e r si nw h i c hA P X a c t i v i t yW a s i n h i b i t e d .5 .Ac D N A f r a g m e n to f5 6 9b pw a si s o l a t e df r o mp e t a
23、 l s o fc u tr o s e ‘S a m a n t h a ’u s i n gd e g e n e r a t e dp r i m e r s .a(chǎn) n d i t w a si n f e r r e d f r o ma m i n oa c i ds e q u e n c e a n a l y s i st h a tR h - A P X lc l o n e db e l o n g e d t oc
24、 y t o s o l i cA P X g e n ef a m i l y .I tw a ss h o w nb yN o r t h e r na n a l y s i st h a te x p r e s s i o nc h a n g i n gp a t t e m so fR h - A P X l w e r ea l m o s ti d e n t i c a lw i t ht h o s e o f A
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