生物兼容性化學(xué)反應(yīng)在識(shí)別蛋白質(zhì)氧化性修飾中的應(yīng)用.pdf

1、生物體系中的活性氧（ROS）和活性氮（RNS）是不可避免的代謝產(chǎn)物，具有較高的反應(yīng)活性，能夠?qū)Φ鞍踪|(zhì)發(fā)生氧化性修飾。其中蛋白質(zhì)巰基可以被氧化形成二硫鍵（RS-SR'）、亞硝基硫醇（RS-NO）和次磺酸（RSOH）等，這些都屬于可逆性氧化修飾，可以重新被還原成巰基。ROS/RNS對(duì)生物巰基的可逆性修飾構(gòu)成了氧化還原調(diào)節(jié)的化學(xué)基礎(chǔ)。除了巰基以外，蛋白質(zhì)酪氨酸殘基也可以被RNS氧化修飾成3-硝基酪氨酸（3-NT），3-NT已經(jīng)發(fā)展成為生物體內(nèi)

2、活性氮的生物標(biāo)志物。此外，這種修飾目前已經(jīng)被確認(rèn)為與阿爾茲海默癥、帕金森綜合征等一些神經(jīng)退行性疾病有關(guān)。本論文的研究工作是基于生物兼容性的化學(xué)反應(yīng)來(lái)標(biāo)記識(shí)別蛋白質(zhì)的氧化性修飾，開(kāi)展了以下工作：（1）利用生物巰基的親核性，設(shè)計(jì)合成了探針?lè)肿觼?lái)檢測(cè)生物巰基及蛋白質(zhì)巰基的氧化性修飾；（2）發(fā)展了兩種方法來(lái)標(biāo)記蛋白質(zhì)酪氨酸殘基的硝基化，實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)3-NT殘基的選擇性識(shí)別。主要內(nèi)容包擴(kuò)以下幾章：
　　第一章：簡(jiǎn)單介紹了一些利用生物兼容性化

3、學(xué)反應(yīng)來(lái)對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行化學(xué)修飾的工作，接著概述了生物體內(nèi) ROS和 RNS的產(chǎn)生以及對(duì)蛋白質(zhì)的氧化性修飾，最后對(duì)檢測(cè)識(shí)別生物巰基和蛋白質(zhì)酪氨酸殘基硝基化的方法進(jìn)行概述。
　　第二章：基于生物巰基的芳香環(huán)親核取代反應(yīng)，設(shè)計(jì)合成了一系列萘酰亞胺衍生物，篩選出其中響應(yīng)效果最好的化合物 MSBN。MSBN可以用于檢測(cè)識(shí)別體外及細(xì)胞內(nèi)的生物巰基和蛋白質(zhì)巰基可逆性氧化修飾，并且在 MSBN上接入質(zhì)量標(biāo)簽后實(shí)現(xiàn)對(duì)硫氧還蛋白的氧化還原態(tài)的檢測(cè)。

4、r>　　第三章：通過(guò)將3-NT轉(zhuǎn)換為3-氨基酪氨酸，然后在六氰合鐵酸鉀的氧化作用下，3-氨基酪氨酸可以與苯胺發(fā)生氧化偶聯(lián)反應(yīng)?；谶@個(gè)模型反應(yīng)，我們?cè)O(shè)計(jì)合成了帶分子標(biāo)簽的對(duì)甲基苯胺衍生物RB-aniline和Biotin-aniline，用這兩個(gè)分子成功標(biāo)記識(shí)別了蛋白質(zhì)酪氨酸殘基的硝基化，同時(shí)實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜的生物體系中蛋白3-NT殘基的檢測(cè)。
　　第四章：對(duì)第三章的檢測(cè)識(shí)別蛋白質(zhì)酪氨酸殘基硝基化的方法進(jìn)行改進(jìn)，將3-NT轉(zhuǎn)化為3-疊氮