聚脲多孔材料的酶固定及其應(yīng)用.pdf

1、本文以甲苯二異氰酸酯(TDI)與二乙烯三胺(DETA)為單體、以乙腈為溶劑，不使用任何致孔劑和穩(wěn)定劑，采用沉淀聚合的方法，無需改性制備得到了聚脲多孔材料(PPU)。PPU的表面形貌通過掃描電子顯微鏡(SEM)進行觀察，采用壓汞法和氮氣吸附-脫附法(BET)對PPU的孔結(jié)構(gòu)進行了測定。結(jié)果表明，PPU產(chǎn)物為尺寸介于30μm至50μm的顆粒，其形狀不規(guī)則，大小不均一。通過壓汞法測得其孔徑分布在30 nm～300μm之間，比表面積為36.4

2、m2·g-1，孔體積為4.2 cm3·g-1。利用對硝基苯甲醛(NBA)法測得PPU表面的伯胺基含量為0.631 mmol/g。
　　PPU經(jīng)戊二醛(GA)改性后引入了醛基，醛基可以與熒光假單胞菌脂肪酶(PFL)上的胺基反應(yīng)生成Schiff堿實現(xiàn)PFL在PPU載體上的固定。實驗過程探討了GA改性過程中GA濃度對PPU固定PFL的影響，考察了固定過程中反應(yīng)時間、反應(yīng)溫度和酶溶液濃度對PFL分子在PPU上的固定量和固定酶活性的影響。結(jié)

3、果表明，以pH值為8.0的緩沖溶液為反應(yīng)介質(zhì)，利用濃度為0.66 mol/L的GA溶液對PPU進行改性得到GA-PPU，當PFL濃度為2.6 g/L時，PFL在GA-PPU上的最大固定量為108.8 mg/g，采用棕櫚酸對硝基苯酯(NPP)水解法測得固定酶的活性為253 U/mg。最后比較了固定酶和游離酶在不同溫度和pH值下的活性及其二者的儲存穩(wěn)定性。結(jié)果顯示，相同的反應(yīng)條件下，固定酶比游離酶具有更好的活性和儲存穩(wěn)定性。
　　以制

4、得的固定酶作為(R，S)-1-苯乙醇與乙酸乙烯酯酯交換反應(yīng)的催化劑，分別考察了有機溶劑的種類、酶加入量、反應(yīng)溫度、底物摩爾比和?；w對脂肪酶催化效果的影響，并給出了固定酶在最佳拆分條件下的重復利用性。結(jié)果表明，以正己烷為溶劑，以0.2 mg脂肪酶催化苯乙醇和乙酸乙烯酯在10℃下的酯交換反應(yīng)，在獲得較高光學純度(eep＞99.5％，E＞200)的前提下，反應(yīng)54 h，苯乙醇的轉(zhuǎn)化率可達到49.3％。固定酶重復使用5次后，轉(zhuǎn)化率降低至46