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1、meso-酒石酸(meso-tartaric acid,內(nèi)消旋酒石酸)在鹽業(yè)、膜電解等方面具有重要的用途。meso-酒石酸主要是由反式環(huán)氧琥珀酸水解酶(TESH)水解底物反式環(huán)氧琥珀酸而得。迄今已見(jiàn)的關(guān)于meso-酒石酸生物轉(zhuǎn)化技術(shù)的報(bào)道僅限于野生菌篩選和發(fā)酵工藝研究,其TESH酶活低且酶穩(wěn)定性差。因此,獲得高活力和高穩(wěn)定性的TESH酶及其高效活性表達(dá)菌株對(duì)于工業(yè)化應(yīng)用具有重要的意義。
本文從土壤中篩選到一株可產(chǎn)TESH的野生
2、菌,經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察、生理生化試驗(yàn)以及16S rDNA序列比對(duì)鑒定為韓國(guó)假單胞菌,命名為Pseudomonas koreensisBK-9。利用硫酸銨沉淀、陰離子柱層析和疏水柱層析技術(shù),從Pseudomonaskoreensis BK-9中分離得到純的TESH酶。經(jīng)蛋白質(zhì)質(zhì)譜檢測(cè),其分子量為32.25kDa。該TESH在溫度小于40℃、pH3.5-11時(shí)比較穩(wěn)定。該TESH不是金屬離子依賴(lài)型酶,對(duì)反式環(huán)氧琥珀酸的動(dòng)力學(xué)參數(shù)Km和max分別為
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