席夫堿釩、銅配合物的合成及抑制PTPs研究.pdf

1、蛋白酪氨酸磷酸酶(PTPs)參與多種細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)，如細(xì)胞增殖、代謝、細(xì)胞間通訊等。許多人類疾病如糖尿病、癌癥、肥胖癥、免疫功能紊亂癥都與PTPs活性的調(diào)節(jié)異常有關(guān)。抑制PTPs活性能夠提高細(xì)胞磷酸化水平，調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。因此以PTPs為靶蛋白的抑制劑研發(fā)引起人們的極大關(guān)注。
　　以金屬配合物為PTPs抑制劑的研究報道主要集中在釩化合物，研究表明釩化合物的類胰島素性能與其對PTP1B的抑制有關(guān)。但針對其他PTPs抑制劑以及釩化合物選

2、擇性的研究卻少有報道。最新的研究顯示體外篩選的金屬PTP抑制劑在細(xì)胞中表現(xiàn)出與體外一致的選擇性，表明體外篩選出的金屬PTP抑制劑在體內(nèi)也很有可能表現(xiàn)出選擇性。因此，對釩化合物抑制不同PTPs以及篩選PTP1B選擇性抑制劑具有重要意義。
　　對PTPs銅配合物抑制劑的研究，本課題組走在該領(lǐng)域的前列。近期連續(xù)報道了幾類配體銅配合物對PTPs的活性抑制。為進(jìn)一步探討不同配體的釩、銅配合物對PTPs活性的抑制，篩選高效、選擇性好的PTPs

3、抑制劑，本論文研究了一系列席夫堿釩、銅配合物對PTPs的活性抑制作用。主要工作如下:
　　1.設(shè)計(jì)合成了一系列以2-(5-溴-2-羥基苯-亞胺)苯甲酸(H2bhbb，H2L1)、2-(5-氯-2-羥基苯-亞胺)苯甲酸(H2chbb，H2L2)、2-(5-硝基-2-羥基苯-亞胺)苯甲酸(H2nhbb，H2L3)、4-溴-2-(甲苯亞胺基)苯酚(Hbpmp，HL4)、4-氯-2-(甲苯亞胺基)苯酚(Hcpmp，HL5)、4-硝基-2-

4、(甲苯亞胺基)苯酚(Hnpmp，HL6)為配體的席夫堿釩、銅配合物。通過元素分析、紅外光譜、紫外光譜、電噴霧質(zhì)譜、pH電位滴定等方法對其進(jìn)行了表征，闡明該類配合物在固態(tài)及生理?xiàng)l件下的存在組分。X-ray單晶衍射進(jìn)一步確認(rèn)了配體Hbpmp(HL4)和配合物1[VⅣO(bhbb)(H2O)2]的晶體結(jié)構(gòu)。
　　2.氧釩配合物1-5{[VⅣO(L1)(H2O)2](1)，[VⅣO(L3)(H2O)2](2)，[VⅣO(L5)2](3)，

5、[VⅣO(L4)2](4)，[VⅣO(L6)2](5)}對不同PTPs顯示出不同的抑制能力，但幾乎都對PTP1B表現(xiàn)出最強(qiáng)的抑制效果。配合物1、2對PTP1B的抑制作用(IC50值，0.21-0.23μM)稍強(qiáng)于3、4、5(IC50值，0.69-0.93μM)。配合物2、4對PTP1B表現(xiàn)出較好選擇性，2對PTP1B的抑制能力(IC50值，0.23μM)分別是TCPTP，PTP-MEG2，SHP-1和SHP-2的5，3，8和20倍。4對

6、PTP1B的抑制(IC50值，0.69μM)分別是TCPTP，PTP-MEG2，SHP-1和SHP-2的3，4，10，50倍。對C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞提取物中PTPs活性抑制的研究，說明該類配合物不僅能抑制重組PTPs，還能較好地抑制細(xì)胞內(nèi)PTPs。動力學(xué)研究表明配合物2對PTP1B，TCPTP, SHP-1的抑制類型為非競爭性，對PTP-MEG2，SHP-2為競爭性。熒光淬滅研究得出2與PTP1B，TCPTP和PTP-MEG2的作用方式都為靜

7、態(tài)淬滅，結(jié)合位點(diǎn)數(shù)都接近1，310K時的結(jié)合常數(shù)分別為6.86×105 M-1,9.58×104 M-1,4.64×104 M-1。
　　3.除SHP-2以外，銅配合物6-10{[Cu(L1)(H2O)](6)，[Cu(L2)(H2O)](7)，[Cu(L3)(H2O)](8)，[Cu(L5)3](9)，[Cu(L6)2·4.5H2O](10·4.5H2O)}對PTPs有很強(qiáng)的抑制能力，但對不同PTPs的抑制效果不同。配合物6和7

8、對TCPTP有選擇性，10對PTP1B有選擇性。除SHP-2以外，銅配合物對PTPs的抑制能力明顯強(qiáng)于釩配合物，但選擇性卻相對弱于釩配合物。銅配合物也能夠抑制C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞提取物中PTPs。動力學(xué)研究表明配合物6與PTP1B，TCPTP, PTP-MEG2，SHP-1的作用方式均為非競爭性抑制。
　　以上研究得出:化合物配體結(jié)構(gòu)不同，對PTPs的抑制效果就不同;配體相同的前提下，配位金屬不同，對PTPs的抑制效果大不相同;配合物和