碳納米材料增敏的食品中轉(zhuǎn)基因成分電化學(xué)傳感方法研究.pdf

1、近年來，隨著轉(zhuǎn)基因食品的出現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因食品的安全問題成為公眾擔(dān)心的問題。轉(zhuǎn)基因食品特定堿基序列的檢測越來越重要。開發(fā)簡便、迅速、廉價(jià)、微型化的DNA傳感器成為了研究熱點(diǎn)。電化學(xué)DNA傳感器因其響應(yīng)較快、選擇性好、靈敏度高、成本低等優(yōu)點(diǎn)，成為了生物學(xué)、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的新型課題。
　　本文以特定轉(zhuǎn)基因堿基序列為檢測對(duì)象，利用血紅素-還原氧化石墨烯(Hemin-rGO)納米復(fù)合物、金納米粒子(AuNPs)、多壁碳納米管(WMCNTs)及硫堇-金

2、納米粒子(THi-AuNPs)等納米材料修飾玻碳電極(GCE)，構(gòu)建了操作方便、靈敏度高、檢測限低的新型電化學(xué)DNA生物傳感器。對(duì)食品中轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行分析。
　　本文研究內(nèi)容主要包含以下四個(gè)部分:
　　1.Hemin-rGO納米復(fù)合物的制備及表征
　　用氧化石墨及Hemin混合，然后加入還原劑水合肼及氨水，攪拌、油浴、離心清洗得到穩(wěn)定存在的Hemin-rGO納米復(fù)合物。用紫外-可見光光譜儀(UV-vis)和X射線光電子

3、能譜分析(XPS)表征其結(jié)構(gòu)及表面形態(tài)。用AuNPs和Hemin-rGO納米復(fù)合物修飾GCE制備電化學(xué)傳感器，并用電化學(xué)方法表征其電化學(xué)性能。
　　2.基于Hemin-rGO納米復(fù)合物和AuNPs的玻碳電極超低檢測cDNA的無標(biāo)記電化學(xué)基因傳感器
　　用AuNPs和Hemin-rGO納米復(fù)合物修飾GCE制備電化學(xué)傳感器。由HS-DNA與cDNA堿基互補(bǔ)配對(duì)成為雙鏈DNA，阻斷Hemin的氧化還原反應(yīng)，使電流相應(yīng)降低。在沒有任

4、何外部標(biāo)簽下，構(gòu)建一個(gè)簡單，靈敏和選擇性好的傳感平臺(tái)檢測cDNA。cDNA的濃度檢測范圍從1×10-18～1×10-13M，系數(shù)為0.998，檢出限達(dá)到1.41×10-19M。該方法對(duì)樣品施加和標(biāo)準(zhǔn)樣品的回收百分比進(jìn)行了驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)表明該傳感器具有可靠性、高選擇性、再生性等優(yōu)點(diǎn)，是檢測DNA的理想平臺(tái)。
　　3.THi-AuNPs-DNA納米復(fù)合物的制備與表征
　　將THi固定到由氯金酸還原的AuNPs表面，生成THi-AuN

5、Ps納米復(fù)合材料。然后與經(jīng)活化的巰基標(biāo)記DNA(S1)混合，成功制備了THi-AuNPs-S1納米復(fù)合材料。用紫外-可見光光譜儀對(duì)其結(jié)構(gòu)及表面形態(tài)進(jìn)行表征。并用電化學(xué)方法表征其電化學(xué)性能。
　　4.基于氨基化的WMCNTs、THi-AuNPs-DNA納米復(fù)合物及辣根過氧化物酶雙重信號(hào)放大檢測DNA技術(shù)
　　基于氨基化的WMCNTs、AuNPs、THi及辣根過氧化物酶修飾GCE制備電化學(xué)DNA傳感器。用辣根過氧化物酶催化過氧化