農(nóng)業(yè)廢物好氧堆肥過程中物化參數(shù)對(duì)放線菌種群的影響.pdf

1、堆肥技術(shù)已經(jīng)在農(nóng)業(yè)廢物處理方面得到了廣泛的應(yīng)用，并在一定程度上使農(nóng)業(yè)固體廢物減量化、無害化、資源化，但是木質(zhì)素的降解效率低仍然是一個(gè)亟待解決的問題，放線菌對(duì)木質(zhì)素的降解有著不容忽視的作用，所以，研究放線菌種群與堆肥過程中物化參數(shù)的對(duì)應(yīng)關(guān)系具有重要的實(shí)際意義。本研究從農(nóng)業(yè)固體廢物堆肥樣品中提取總DNA，采用放線菌特異性引物F243/R1378進(jìn)行PCR擴(kuò)增，再以擴(kuò)增的產(chǎn)物為模板，采用引物GC-F984/R1378進(jìn)行第二輪擴(kuò)增獲得適合DG

2、GE的DNA片段，采用DGGE技術(shù)對(duì)獲得的放線菌16S rDNA進(jìn)行電泳分離。應(yīng)用QuantityOne2.0軟件處理放線菌的DGGE指紋圖譜獲得農(nóng)業(yè)廢物垃圾堆肥過程中放線菌種群多樣性的信息。DGGE圖譜顯示，在堆肥初期放線菌種類迅速增加;堆肥中期放線菌種類基本保持不變，優(yōu)勢菌明顯;堆肥后期，放線菌種類逐漸增多，種群均勻度較高，各種群豐度差異不大。
　　 采用Real-time qPCR對(duì)放線菌數(shù)量進(jìn)行監(jiān)測，所用引物為F984/

3、R1378。結(jié)果表明，放線菌在農(nóng)業(yè)固體廢物堆肥過程中，在數(shù)量上呈“升高-降低-升高”的規(guī)律。
　　 為了檢驗(yàn)?zāi)男┒逊饰锘瘏?shù)或組合能夠在一定程度上解釋堆肥樣品中放線菌種群的變化。用Canoco4.5軟件對(duì)種群數(shù)據(jù)和物化參數(shù)(含水率、水溶性有機(jī)碳(WSC)、C/N、環(huán)境溫度、堆體溫度、pH、水溶性氨氮(NH4+-N)和硝氮(NO3--N》進(jìn)行冗余分析(redundancy analysis，RDA)，做出樣點(diǎn)、物化參數(shù)的二維排序圖

4、。冗余分析結(jié)果表明，8個(gè)物化參數(shù)與放線菌前兩個(gè)排序軸的相關(guān)性大小依次為:含水率＞W(wǎng)SC＞pH＞硝態(tài)氮＞銨態(tài)氮＞C/N＞堆體溫度＞環(huán)境溫度。其中，含水率和WSC達(dá)到了極顯著水平(P＜0.01)，pH則為顯著相關(guān)(P＜0.05)。
　　 為了考察物化參數(shù)與放線菌16S rDNA基因數(shù)之間的相關(guān)性。應(yīng)用SPSS軟件對(duì)物化參數(shù)和放線菌16S rDNA的基因數(shù)做回歸分析，并作出回歸直線與散點(diǎn)分布圖。結(jié)果表明，含水率與放線菌16S rDNA