基于代謝組學(xué)技術(shù)研究交泰丸干預(yù)對氯苯丙氨酸致失眠的作用機制.pdf

1、目的：基于核磁共振（1H-NMR）代謝組學(xué)技術(shù)，結(jié)合生化指標(biāo)分析，研究交泰丸對失眠模型大鼠的干預(yù)作用，探討交泰丸干預(yù)失眠的作用機制。
　　方法：將雄性SD大鼠隨機分為正常組、模型組和交泰丸組。交泰丸組灌胃交泰丸水提液，每天1次，連續(xù)5天，正常組和模型組灌胃等體積生理鹽水。實驗第3天，模型組和交泰丸組一次性腹腔注射 PCPA甲酯鹽酸鹽（564mg·kg-1，相當(dāng)于PCPA450mg·kg-1）建立失眠模型，正常組一次性腹腔注射等體積

2、生理鹽水。實驗期間觀察大鼠自發(fā)活動變化。基于1H-NMR代謝組學(xué)技術(shù)測定尿液樣本、血清樣本和海馬組織的代謝物圖譜，對代謝物圖譜進行正交偏最小二乘判別分析（Orthogonal Partial Least-Squares Discriminant Analysis,OPLS-DA），運用變量重要性投影（Variable Importance in the Projection，VIP）和t檢驗篩選出組間具有顯著差異的代謝物。用酶聯(lián)免疫吸附

3、法（ELISA）檢測大鼠下丘腦、海馬、前額葉皮質(zhì)和血清中神經(jīng)保護因子如腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）、神經(jīng)生長因子（NGF）水平，凋亡相關(guān)因子如B細(xì)胞淋巴瘤因子-2（Bcl-2）及其相關(guān)X蛋白（Bax），神經(jīng)遞質(zhì)如谷氨酸（Glu）、膽囊收縮素8（CCK-8）水平，細(xì)胞因子白細(xì)胞介素（IL）-2、IL-6和膠質(zhì)原纖維酸性蛋白（GFAP）水平，并采用考馬斯亮藍(lán)法（Bradford法）測定組織樣品蛋白含量。
　　結(jié)果：
　　1.交

4、泰丸能明顯抑制失眠大鼠自發(fā)活動。
　　2.
　?。?）與正常組相比，模型組大鼠尿液中N-乙酰糖蛋白、丙酮、丙酮酸、琥珀酸、α-酮戊二酸、二甲胺水平顯著降低（P＜0.05），二甲基甘氨酸、?；撬?、苯乙酰甘氨酸水平顯著升高（P＜0.05），與模型組比較，交泰丸組大鼠尿液中N-乙酰糖蛋白、丙酮酸、琥珀酸、α-酮戊二酸、二甲胺水平顯著升高（P＜0.05），二甲基甘氨酸、牛磺酸、苯乙酰甘氨酸水平顯著降低（P＜0.05）；
　?。?/p>

5、2）與正常組相比，模型組大鼠血清中LDL/VLDL、不飽和脂肪酸、異亮氨酸、N-乙酰糖蛋白、谷氨酸、O-乙酰糖蛋白、膽堿、磷酸膽堿、氧化三甲胺水平顯著升高（P＜0.05），與模型組比較，交泰丸大鼠血清中LDL/VLDL、異亮氨酸、N-乙酰糖蛋白、谷氨酸、膽堿、磷酸膽堿水平顯著降低（P＜0.05）；
　?。?）與正常組比較，模型組大鼠海馬中丙氨酸、γ-氨基丁酸、肌醇水平顯著降低（P＜0.05），N-乙酰天冬氨酸、肌酸/磷酸肌酸、甘油

6、磷酸膽堿、?；撬崴斤@著升高（P＜0.05），與模型組比較，交泰丸大鼠丙氨酸、γ-氨基丁酸、肌醇水平顯著升高（P＜0.05），甘油磷酸膽堿、?；撬崴斤@著降低（P＜0.05）。
　　3.與正常組比較，模型組大鼠下丘腦、海馬、前額葉皮質(zhì)和血清中IL-2、IL-6、BDNF、NGF、CCK-8水平顯著降低（P＜0.05），下丘腦、海馬、前額葉皮質(zhì)和血清中GFAP、Glu水平顯著升高（P＜0.05），下丘腦、海馬和前額葉皮質(zhì)中的Bcl-

7、2/Bax比值顯著降低（P＜0.05），血清中Bcl-2/Bax比值沒有顯著差異；與模型組比較，交泰丸組大鼠下丘腦、海馬、前額葉皮質(zhì)和血清中IL-2、IL-6、BDNF、NGF、CCK-8水平顯著升高（P＜0.05），下丘腦、海馬、前額葉皮質(zhì)和血清中GFAP、Glu水平顯著降低（P＜0.05），同時交泰丸組大鼠下丘腦、海馬和前額葉皮質(zhì)中的Bcl-2/Bax比值顯著升高（P＜0.05），但血清中Bcl-2/Bax比值沒有明顯改變。