基于末端保護(hù)分析的比色生物傳感技術(shù)的研究.pdf

1、蛋白質(zhì)是一類重要的生物大分子,它是生命活動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ),也是構(gòu)成生物體最基本的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和功能物質(zhì)。蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的研究,不僅可以從分子水平上解釋生命現(xiàn)象的化學(xué)本質(zhì),而且能促進(jìn)生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等學(xué)科的發(fā)展。生物傳感器作為一種新的生物分析方法,具有選擇性好、靈敏度高、穩(wěn)定性強(qiáng)、成本低廉且能在復(fù)雜的體系中進(jìn)行在線連續(xù)監(jiān)測(cè)等優(yōu)點(diǎn),被廣泛用于生物、醫(yī)學(xué)、環(huán)境科學(xué)、食品等領(lǐng)域。
　　 本文基于末端保護(hù)分析方法,針對(duì)生物體內(nèi)一些重要酶的活性檢

2、測(cè)和生物小分子與其結(jié)合蛋白之間的相互作用研究發(fā)展了幾種新型生物傳感技術(shù)。主要內(nèi)容包括：⑴建立了一種基于末端保護(hù)分析介導(dǎo)納米金團(tuán)聚的生物傳感技術(shù),用于人DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶(Dnmt1)和DNA糖基化酶(hOGG1)活性的檢測(cè)。Dnmt1或hOGG1與納米金標(biāo)記的DNA底物鏈結(jié)合形成的共價(jià)復(fù)合物可以有效的保護(hù)DNA鏈不被ExoⅠ和ExoⅢ酶切降解,保存下來(lái)的單分散納米金通過(guò)對(duì)其特征等離子共振吸收峰強(qiáng)度的檢測(cè),從而對(duì)Dnmt1和hOGG1活性

3、進(jìn)行定量,該方法用于檢測(cè)Dnmt1和hOGG1活性具有方便、快速、靈敏度高、可視化等優(yōu)點(diǎn)。⑵基于末端保護(hù)分析發(fā)展的比色和熒光檢測(cè)技術(shù)用于研究葉酸與其結(jié)合蛋白之間的相互作用,以及對(duì)葉酸結(jié)合蛋白進(jìn)行定量分析。通過(guò)葉酸與其結(jié)合蛋白之間的特異性結(jié)合,將葉酸結(jié)合蛋白共價(jià)結(jié)合到修飾葉酸的DNA鏈上,形成的復(fù)合物能夠有效的保護(hù)DNA鏈不被ExoⅠ酶切降解,通過(guò)血紅素結(jié)合G-四股螺旋適配體催化氧化2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(