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1、隨著現(xiàn)代化學(xué)工業(yè)的發(fā)展,人類(lèi)向自然環(huán)境中排放大量難降解有毒有機(jī)物。如氯酚類(lèi)化合物,給生態(tài)環(huán)境帶來(lái)巨大的危害。因此,如何去除環(huán)境中的酚類(lèi)物質(zhì)是當(dāng)下比較關(guān)注的課題,利用厭氧微生物降解氯酚類(lèi)物質(zhì)是一種經(jīng)濟(jì)有效的方法。本文利用馴化厭氧污泥降解2,4,6-三氯苯酚(2,4,6-TCP),研究其降解規(guī)律、代謝特性以及環(huán)境因子對(duì)降解效果的影響并利用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)——高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)脫氯微生物的種屬等生物信息進(jìn)行測(cè)定和分析,揭示氯酚厭氧還原脫氯規(guī)律
2、,深入脫氯機(jī)理,為加速還原脫氯的方法、實(shí)現(xiàn)多氯酚的徹底礦化及實(shí)際應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。本論文取得了如下研究成果。
利用可密封厭氧反應(yīng)裝置,接種活性污泥,以乳酸鈉為電子供體2,4,6-TCP為電子受體,成功獲得可快速降解2,4,6-TCP的厭氧污泥,說(shuō)明通過(guò)馴化的方法能夠富集具有脫氯能力的厭氧菌群。馴化污泥可快速脫除氯酚的鄰位氯,對(duì)對(duì)位氯的脫除十分有限,表現(xiàn)出明顯的底物專(zhuān)一性。對(duì)代謝產(chǎn)物進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),2,4,6-TCP厭氧降解的中間
3、產(chǎn)物有2,4-DCP、4-氯酚(4-CP)、苯酚,且2,4-DCP的檢出率很低,因此推測(cè)可能有2種代謝途徑,即直接一步脫除兩個(gè)氯原子生成4-CP或者先脫除一個(gè)氯原子生成2,4-DCP再進(jìn)一步脫氯生成4-CP。
通過(guò)掃描電子顯微鏡觀察馴化污泥的微觀形態(tài),與接種污泥比較發(fā)現(xiàn),馴化污泥球菌數(shù)量增多,推測(cè)厭氧污泥馴化出較多脫氯球菌。通過(guò)高通量測(cè)序分析馴化污泥的種群結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn),馴化污泥富集了大量的產(chǎn)氫產(chǎn)乙酸菌,是馴化污泥的優(yōu)勢(shì)種群,說(shuō)明
4、這類(lèi)菌的存在對(duì)脫氯有重要意義。雖然產(chǎn)氫產(chǎn)乙酸菌并不具有脫氯功能,但可與脫氯菌互營(yíng)共生,起到釋氫作用。此外,馴化污泥中還含有一定數(shù)量的硫還原細(xì)菌,此類(lèi)微生物一直被認(rèn)為與脫氯現(xiàn)象密切相關(guān),有的種屬具有脫氯功能,這個(gè)發(fā)現(xiàn)對(duì)認(rèn)識(shí)脫氯現(xiàn)象有重要的意義。
通過(guò)厭氧間歇實(shí)驗(yàn)考察電子受體對(duì)厭氧污泥脫氯降解影響。結(jié)果表明,馴化污泥可進(jìn)行硫酸鹽還原,硫酸鹽的存在抑制2,4,6-TCP的降解,濃度越高,抑制越明顯,明顯抑制濃度為5mM。同時(shí),系統(tǒng)內(nèi)
5、亦存在硝酸鹽還原作用,且硝酸鹽對(duì)2,4,6-TCP的抑制作用較硫酸鹽顯著,當(dāng)加入1mM硝酸鹽時(shí),便可明顯抑制2,4,6-TCP的脫氯速率。
利用亨蓋特厭氧技術(shù)研究各種環(huán)境因素對(duì)馴化污泥脫氯的影響,發(fā)現(xiàn),一定濃度的電子供體對(duì)實(shí)現(xiàn)馴化污泥快速脫氯是必要的。乳酸鈉濃度在0-10mM時(shí),其濃度和脫氯速度成正比。以甲酸鈉、乙酸鈉、乳酸鈉和葡萄糖作為馴化厭氧污泥的電子供體,同摩爾加入時(shí),其降解效率依次為:乳酸鈉>乙酸鈉>甲酸鈉≥葡萄糖,與
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