渤海海濱濕地螺旋藻及相關(guān)微型生物多樣性分析.pdf

1、分類號：學(xué)校代碼：10069密級：研究生學(xué)號：120140177渤海海濱濕地渤海海濱濕地螺旋藻及螺旋藻及相關(guān)相關(guān)微型生物多樣性分析微型生物多樣性分析DiversityAnalysisofSpirulinaCrelativeMicroganismintheBohaiSeaCoastalWetl研究生姓名：謝麗丹專業(yè)名稱：發(fā)酵工程指導(dǎo)教師姓名：王素英教授論文提交日期：2017年5月學(xué)位授予單位：天津商業(yè)大學(xué)I摘要螺旋藻因富含蛋白質(zhì)、碳水化合

2、物、維生素、不飽和脂肪酸及微量元素，已被成功開發(fā)應(yīng)用并實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，但隨著螺旋藻應(yīng)用領(lǐng)域的擴大，功能藻株的需求也隨之加強，為了獲得優(yōu)良藻株本課題組進行了連續(xù)三年的水樣采集，對樣品的顯微觀察發(fā)現(xiàn)，螺旋藻、節(jié)旋藻在渤海海濱及其周圍內(nèi)陸濕地廣泛存在。但由于尚未找到有效的藻株富集方法，且挑取單藻絲進行純培養(yǎng)常常遭到失敗，致使一些水樣中的螺旋藻、節(jié)旋藻藻株丟失，未能獲得純培養(yǎng)，推測藻株的生長受到了水樣理化環(huán)境的影響，因此為了獲得更多的純培養(yǎng)藻株

3、，2015年7月2015年9月，對海岸線較長、濕地類型比較多樣化的渤海濕地及周邊水域進行了細菌、藍細菌和真核微型生物多樣性分析，一方面對分類結(jié)果進行補充分析，另一方面為富集條件的選擇提供依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：1.對渤海濕地及周邊水域的18個采樣點水樣的螺旋藻進行計數(shù)，發(fā)現(xiàn)不同來源水樣中螺旋藻的數(shù)量存在明顯差異；當(dāng)水樣TN和TP分別在4.915.8mgL和0.10.63mgL之間時，適宜螺旋藻的生長。2.通過IlluminaHiSeq高

4、通量測序，18個采樣點中細菌的優(yōu)勢類群為變形桿菌門(Proteobacteria)、藍細菌門(Cyanobacteria)、硬壁菌門(Firmicutes)；真核微型生物的優(yōu)勢類群為輪形動物門(Rotifera)、節(jié)肢動物門(Arthropoda)、綠藻門(Chlophyta)；藍細菌在屬的水平上優(yōu)勢類群為聚球藻(Synechococcus)、微胞藻屬(Microcystis)、Halanaerobacter、浮絲藻屬(Planktot

5、hrix)。分析18個樣品中微生物樣性差異，河北北戴河濕地(B1)細菌物種豐度最高，遼寧盤錦紅海灘度假村周邊天然濕地(L1)細菌種類多樣性最大，內(nèi)蒙古巴哈爾北湖(N2)的細菌多樣性和物種豐度均最低；河北北戴河濕地(B1)真核微型生物物種豐度最高，天津海河教育園區(qū)天然濕地(T5)真核微型生物物種多樣性最高，內(nèi)蒙古科研鎮(zhèn)天然濕地(N5)的真核微型生物物種豐富度最低，內(nèi)蒙古巴彥淖爾堿湖(N4)的真核微型生物物種多樣性最低；天津海河教育園區(qū)天然

6、池塘(T5)藍細菌物種最豐富，北戴河濕地(B1)藍細菌多樣性高于其他地方，內(nèi)蒙古索貝爾湖(N3)的藍細菌豐富度、多樣性低于其他樣點。通過測定18個樣品的環(huán)境因子，發(fā)現(xiàn)其與藍細菌群落分布相關(guān)性由高到低依次是：COD、總氮、pH、氨氮、葉綠素a、DO、溫度、鹽度、總磷。3.以實驗室保存和本人分離純化的98株不同來源螺旋藻、節(jié)旋藻為對象，采用細菌通用引物和藍細菌特異引物對16SrRNA基因進行擴增，從基因序列的變異位點和平均GC百分含量來看，