基于銀外襯液芯波導(dǎo)管的微流控CE熒光檢測(cè)系統(tǒng)的研究.pdf

1、隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，分析儀器不斷向微型化、自動(dòng)化和便攜化發(fā)展。微型全分析系統(tǒng)正是為適應(yīng)這一要求而提出的。微流控CE系統(tǒng)，具有分析速度快、效率高、試樣和試劑消耗少等優(yōu)勢(shì)，而成為一項(xiàng)重要的分析方法。與此同時(shí)，待檢測(cè)的樣品量不斷減少，這就需要使用高靈敏度的檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。液芯波導(dǎo)管具有限定光信號(hào)沿特定路徑通過(guò)內(nèi)全反射進(jìn)行傳播的功能，有效的降低了光信號(hào)在傳播中的損失，增加了有效吸收光程長(zhǎng)度，同時(shí)可作為分離檢測(cè)池，進(jìn)而可以簡(jiǎn)化光路，提高系統(tǒng)的檢測(cè)

2、靈敏度，因此得到了廣泛的應(yīng)用。本文自主研制了銀外襯液芯波導(dǎo)管，并結(jié)合自動(dòng)樣品引入系統(tǒng)，建立了結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、具有較高檢測(cè)靈敏度的微流控CE熒光檢測(cè)系統(tǒng)。
　　第一章首先綜述了微流控CE熒光檢測(cè)系統(tǒng)的研究進(jìn)展，并對(duì)分別由空氣、低折射率非金屬及金屬三類外襯材料構(gòu)成的液芯波導(dǎo)管進(jìn)行了介紹，同時(shí)按照液芯波導(dǎo)管應(yīng)用系統(tǒng)的不同，對(duì)液芯波導(dǎo)管在光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)中的應(yīng)用進(jìn)行了介紹。最后，提出本文的工作目的及設(shè)計(jì)思想。
　　第二章自主研制了銀外襯液芯波

3、導(dǎo)管，建立了基于銀外襯液芯波導(dǎo)管的微流控CE熒光檢測(cè)系統(tǒng)。對(duì)液芯波導(dǎo)管的外襯材料、鍍膜方式以及外襯的保護(hù)方式進(jìn)行了選擇。利用銀鏡反應(yīng)在熔融石英毛細(xì)管外壁鍍銀，并使用一種快干膠對(duì)銀外襯進(jìn)行保護(hù)，同時(shí)在銀外襯液芯波導(dǎo)管上激光照射位置開(kāi)設(shè)光窗，成功制作了具有較大數(shù)值孔徑的銀外襯液芯波導(dǎo)管。將其用于微流控CE熒光檢測(cè)，對(duì)其熒光收集效率進(jìn)行了理論計(jì)算和分析，對(duì)銀膜厚度對(duì)液芯波導(dǎo)效率的影響進(jìn)行了考察。以羅丹明6G熒光染料為試樣，測(cè)得系統(tǒng)的檢出限為7

4、.0×10-13 mol/L(S/N=3)，該結(jié)果同基于商品化的Teflon AF1600液芯波導(dǎo)管的微流控CE熒光檢測(cè)系統(tǒng)的靈敏度在同一水平。使用銀外襯液芯波導(dǎo)管微流控CE芯片對(duì)ΦX174-HaeⅢ digest DNA marker標(biāo)準(zhǔn)樣品和大腸癌CCL187細(xì)胞系p16基因第二外顯子的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物427 bp DNA樣品進(jìn)行分析檢測(cè)，均實(shí)現(xiàn)了各片段的基線分離。連續(xù)9次引入大腸癌CCL187細(xì)胞系K-ras基因的-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物1