簡介：學校名稱華中農業(yè)大學分類號華中農業(yè)大學碩士學位論文單位代碼10504密級基于生境分析的遠安縣生物植物多樣性保護規(guī)劃研究PLANTBIODIVERSITYCONSERVATIONPLANNINGOFYUANANCOUNTYBASEDONTHEHABITATANALYSIS研究生學號指導教師學位類型領域李曉瑋2011305120027姚崇懷副教授風景園林碩士風景園林華中農業(yè)大學園藝林學學院園藝植物生物學教育部重點實驗室中國武漢COLLEGEOFHORTICULTRUEANDFORESTRYSCIENCESHUAZHONGAGRICULTURALUNIVERSITYWUHAN，CHINA基于生境分析的遠安縣生物植物多樣性保護規(guī)劃研究目錄摘要IABSTRACTII1前言1L刖舌L11研究背景112國內外研究概況2121國外研究概況2122國內研究概況313研究目的與意義42研究內容與方法521研究內容5211遠安縣生態(tài)環(huán)境調查分析52。12生物植物多樣性資源調查5213生境規(guī)劃5214遠安縣生物植物多樣性保護規(guī)劃522研究對象6221研究范圍6222研究區(qū)域概況623研究方法8231資料收集8232植物多樣性調查及研究方法8233調查資料整理及現(xiàn)狀分析9234生境適宜性分析方法924技術路線133結果與分析1431生境分析14311縣域生境分析。14312縣城生境分析18

簡介：NORTHWEST婦NNANBYTIANXIANGYUADISSERTATIONSUBMITTEDTOUNIVERSITYOFCHINESEACADEMYOFSCIENCESINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORTHEDEGREEOFMASTEROFSCIENCEKUNMINGINSTITUTEOFBOTANYCHINESEACADEMYOFSCIENCESJUNE，2014A一研究生學位論文版權使用授權聲明本人完全了解并同意遵守中科院昆明植物研究所有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即研究所有權保留送交論文的復印件和電子文件，并提供論文的目錄檢索及借閱、查閱；研究所可以公布論文的全部或部分內容，可以將本學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其它復制手段保存和匯編本學位論文。保密的論文在解密后遵守此規(guī)定。作者簽名＼移孕釓乎導師簽名物乙時間二M沙土，2炙?！?，Y’【7J／√

簡介：分類號工匕避2UDC專業(yè)學位碩士學位論文基于植物多樣性保護的梧州市城市綠地系統(tǒng)規(guī)劃研究吳訪專業(yè)學位名稱王猩亟建筮皇丕王猩塑邀2指導教師逝堡數(shù)拯墓渲塾握級直級工猩巫論文答辯日期2Q至生旦2墨目學位授予日期2Q生12旦三Q旦答辯委員會主席董險蝰熬援基于植物多樣性保護的梧州市城市綠地系統(tǒng)規(guī)劃研究摘要邁進2L世紀之后，我國的現(xiàn)代化和城鎮(zhèn)化程度進一步加快，在經濟GDP不斷增長的同時，城市的發(fā)展也出現(xiàn)了各種問題。由于城市人口高密度聚集，管理無序和各類配套設施明顯滯后，導致城市的土地資源、水資源等越來越緊缺，而隨之而來的廢氣增多、垃圾填滿池不足、工業(yè)廢水和生活污水隨意排放以及溫室效應等城市病現(xiàn)象在全國蔓延開來，這對各城市的建設發(fā)展起到了嚴重的制約。因此迫切需要調整城市戰(zhàn)略布局，通過調整城市綠地系統(tǒng)布局結構模式來緩和城市病現(xiàn)象，使得城市重新煥發(fā)大自然的生態(tài)之貌。廣西壯族自治區(qū)梧州市地處南疆，自身依山傍水，生態(tài)環(huán)境優(yōu)美。其當前也處于城市大開發(fā)、大建設的時期，因此通過研究當?shù)刂参锒鄻有员Ｗo并依托其構建完善的城市綠地系統(tǒng)布局對梧州市未來的城市發(fā)展意義十分重大。論文采用了文獻資料研究法、實地調研和典型樣地調查方法、定量和定性以及采用由寬到窄，由淺入深分層逐類分析等研究方法，以梧州市植物多樣性和城市現(xiàn)狀綠地布局為研究對象，按照國家城市綠地分類標準對梧州市現(xiàn)狀綠地情況進行資料收集和現(xiàn)場實地典型樣方抽樣調查的工作。同時對調研數(shù)據借助FRAGSTATS軟件和人工整理分析，充分研究梧州市城區(qū)植物多樣性現(xiàn)狀特征和綠地現(xiàn)有景觀格局特征，指出其存在的問題，探討建立植物生態(tài)廊道的城市綠地系統(tǒng)規(guī)劃的理論與方法，恢復綠地景觀之間被人類活動中止或破壞的相互聯(lián)系，將城市綠地系統(tǒng)的重新布局和整合，重新恢復和打造新的綠色生態(tài)廊道系。立足區(qū)域整體視野，結合梧州市本地的情況和特色，具體問題具體分析，力爭找到最適合實現(xiàn)梧州市生態(tài)效益、社會效益和經濟效益三者合一的城市綠地系統(tǒng)規(guī)劃布局結構模式。關鍵詞植物多樣性梧州市城市綠地系統(tǒng)；生態(tài)廊道；綠地分類；布局結構

簡介：分類號TU986密級公開UDC635全日制碩士學位論文全日制碩士學位論文世界遺產世界遺產視野下視野下植物景觀植物景觀的保護管理的保護管理研究研究以杭州西湖文化景觀為例以杭州西湖文化景觀為例作者姓名名殷曉彤殷曉彤指導教師包志毅包志毅教授教授專業(yè)學位名稱專業(yè)學位名稱園林植物與觀賞園藝園林植物與觀賞園藝研究方向向園林植物應用與效益園林植物應用與效益評估評估所在學院院風景園林與建筑學院風景園林與建筑學院論文提交日期論文提交日期2014年6月浙江農林大學2014年6月獨創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文，在指導教師指導下，通過我的努力取得的成果，并且是自己撰寫的。盡我所知，除了文中作了標注和致謝中已經作了答謝的地方外，論文中不包含其他人發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含在浙江農林大學或其他教育機構獲得學位或證書而使用過的材料。與我一同對本研究做出貢獻的同志，都在論文中作了明確的說明并表示了謝意。如被查有嚴重侵犯他人知識產權的行為，由本人承擔應有的責任。學位論文作者親筆簽名日期論文使用授權的說明論文使用授權的說明本人完全了解浙江農林大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權送交論文的復印件，允許論文被查閱和借閱；學校可以公布論文的全部或部分內容，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文。保密，在年后解密可適用本授權書?！醪槐Ｃ鼙緦W位論文屬于不保密?！酰ㄕ堅诜娇騼却颉啊獭保W位論文作者親筆簽名日期指導教師親筆簽名日期

簡介：LLLFLJLL／LLLLFFLJII／LLRLLLJIII／LLLLLLLLIJJIL／LL件黌號U蚪8I苗緶壘五西北農林講杖大學屆攻讀碩士學位研究生學位畢業(yè)論文陜西米倉山國家級自然保護區(qū)種子植物資源研究學科專業(yè)研究方向研究生指導教師完成時間焦塑堂生塑墨搓絲堡豎皇堡遁型旦刻麴壓鯊亙』塾堡至5旦研究生學位畢業(yè)論文的獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的碩士學位畢業(yè)論文是我個人在導師指導下獨立進行的研究工作及取得的研究結果；論文中的研究數(shù)據及結果的獲得完全符合學校關于規(guī)范西北農林科技大學研究生學術道德的暫行規(guī)定，如果違反此規(guī)定，一切后果與法律責任均由本人承擔。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究結果，也不包含其他人和自己本人已獲得西北農林科技大學或其它教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同事對本研究所做的任何貢獻均已在論文的致謝中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名主0哏I帆≯77年／月Z日導師指導研究生學位畢業(yè)論文的承諾、本人承諾我的碩士研究生童IIL≯K所呈交的碩士學位畢業(yè)論文是在我指導下獨立開展研究工作及取得的研究結果，屬于我現(xiàn)崗職務工作的結果，并嚴格按照學校關于規(guī)范西北農林科技大學研究生學術道德的暫行規(guī)定而獲得的研究結果。如果違反學校關于規(guī)范西北農林科技大學研究生學術道德的暫行規(guī)定，我愿接受按學校有關規(guī)定的處罰處理并承擔相應導師連帶責任。導師簽名刁事、艫帆矽『7年鄉(xiāng)月≥日

簡介：以植物乳桿菌299為研究菌株，為了提高植物乳桿菌299的最終活菌數(shù)，為其將來的商業(yè)化生產提供參考，分別對發(fā)酵培養(yǎng)基、高密度發(fā)酵工藝、真空冷凍干燥的凍干工藝和保護劑濃度以及菌粉包裝及儲藏期進行了研究，并得到了以下結論1通過單因素、PB和響應面試驗分析，以MRS培養(yǎng)基為基礎，優(yōu)化得到植物乳桿菌299的最佳培養(yǎng)基為蛋白胨233％，酵母膏141％，葡萄糖252％，檸檬酸氫二胺040％，乙酸鈉030％，磷酸氫二鉀080％，TWEEN80030％，硫酸錳00025％。培養(yǎng)得到的菌體OD600可達到12687，比相同條件下在MRS培養(yǎng)基中菌體OD600提高了289％，同時，優(yōu)化后的培養(yǎng)基去掉了牛肉膏和硫酸鎂兩種成分，簡化了培養(yǎng)基配方。2在確定最適培養(yǎng)基以及前期實驗室工作的基礎上，在30L半自動發(fā)酵罐上對影響高密度發(fā)酵工藝的因素進行優(yōu)化，得到最佳高密度發(fā)酵工藝為發(fā)酵恒定PH值為55，中和劑為25％的氨水，攪拌轉速為100RMIN，菌體生長限制性底物為碳源和氮源，補料液碳源和氮源最佳比例為3∶2，同時在對數(shù)期末期對發(fā)酵體系進行相隔4H的兩次補料。在此條件下，植物乳桿菌299經過高密度發(fā)酵培養(yǎng)24H后，發(fā)酵液的菌體OD600可達到13422，較普通發(fā)酵培養(yǎng)提高約44％。3對影響真空冷凍干燥的條件及保護劑配方進行優(yōu)化。得到該菌株的最佳凍干工藝為預凍溫度為80℃，預凍時間為2H，菌泥與保護劑的最佳比例為2∶5，最佳凍干厚度為12CM，脫脂乳濃度為16％，凍干時間為20H。經過優(yōu)化后，最終獲得的菌粉中植物乳桿菌299的活菌數(shù)達到2111011CFUG，凍干存活率為898％。4對植物乳桿菌299的菌粉包裝及儲藏條件進行了研究。發(fā)現(xiàn)在20℃保藏1年時間內，用鋁箔袋和PETPE袋（普通真空包裝袋）進行包裝時，兩者無顯著性差異，菌活仍可維持在1011CFUG在4℃及25℃下保藏時，鋁箔袋對菌體的保護效果較PETPE袋效果好，并且溫度越高，差異性越大用鋁箔袋進行充氣包裝時，發(fā)現(xiàn)混合氣體為95％N25％CO2時菌體存活率最高。

簡介：中國科學院昆明植物研究所博士學位論文瀕危藥用植物云南黃連的保護生物學研究姓名黃驥申請學位級別博士專業(yè)植物學指導教師裴盛基20040927瀕危藥用植物云南黃連的保護生物學研究瀕危藥用植物云南黃連的保護生物學研究II3民族植物學研究民族植物學研究運用民族植物學原理，采用野外面上調查、定點社區(qū)調查和文獻研究相結合的辦法，深入調查高黎貢山地區(qū)傈僳族和勒墨人對云南黃連的各種傳統(tǒng)利用方式及歷史，總結他們管理、保護和開發(fā)這一名貴藥用植物的傳統(tǒng)知識和經驗，進而研究云南黃連產區(qū)的民族民間傳統(tǒng)知識與利用、保護、栽培黃連的互動關系，通過民族植物學定點研究，確定人類活動對云南黃連種群、群落和生態(tài)系統(tǒng)的影響程度，結果表明1）130年前，由于云南黃連的經濟價值，過度的采挖使其野生種群幾近枯竭，為了維持這一寶貴的經濟來源，傈僳族發(fā)展了一套行之有效、并且具有深刻科學意義的種植、撫育和采收的資源可持續(xù)利用管理方法，不僅持續(xù)有效地利用了這一資源，并且也保護了其賴以生存的森林生境；2）傈僳族對云南黃連的引種栽培盡管更多是出于經濟目的，但有效地保護了這一瀕于滅絕的藥用植物，他們建立和發(fā)展起來的種植、管理模式可以看作是我們現(xiàn)代保護學者所推崇的就地保護，它不僅是傳統(tǒng)文化與植物資源直接相互作用的一個范例，也是當?shù)厝藢ι锒鄻有再Y源進行管理的一種方式，對野生種群很少的藥用植物進行栽培和管理，對于當?shù)厣锒鄻有缘谋Ｗo和經濟植物的可持續(xù)利用，無疑起到了積極的推動作用；3）在傳統(tǒng)信仰文化的背景下，以經濟利益為強大動力的對某一物種的利用，客觀上起到了在多個層次上對生物多樣性發(fā)生影響的作用，體現(xiàn)了各少數(shù)民族和植物之間的互動關系。傳統(tǒng)文化通過對云南黃連的利用及引種栽培，在物種水平上發(fā)揮作用；通過對云南黃連適生生境的特定植物群落類型的利用和維護，使系統(tǒng)的結構和組成發(fā)生改變，從而在系統(tǒng)水平上發(fā)揮作用；通過對自然景觀的塑造和文化－自然景觀的建立而在景觀水平上發(fā)揮作用；4）云南黃連混農林生態(tài)系統(tǒng)并不是孤立存在的，它是傳統(tǒng)生產和保護系統(tǒng)的有機組成部分。通過鄉(xiāng)土自然保護體系而發(fā)揮著綜合的作用，并與現(xiàn)代的自然保護區(qū)存在著密切的聯(lián)系，是以現(xiàn)代科學為基礎的正式保護體系十分必要和積極的補充。它是傳統(tǒng)文化與特定自然環(huán)境相互作用、相互統(tǒng)一和協(xié)同進化的結果。作為一種迄今仍然發(fā)揮著重要作用，并對群眾日常生產和生活產生持續(xù)影響的自然保護體系，鄉(xiāng)土自然保護體系體現(xiàn)了傳統(tǒng)信仰文化對自然保護的積極貢獻，是山地民族文化的一個組成部分，也是他們的祖先留給我們的寶貴遺產。4解剖生態(tài)學研究解剖生態(tài)學研究黃連屬植物的葉片由表皮、葉肉和葉脈構成，上下表皮細胞從縱切面上看，排列整齊，呈近長方形扁平狀，具角質層；上下表皮內的葉肉薄壁細胞排列較整齊，類圓形，沒有明顯分化為柵欄組織和海綿組織；葉脈為大型的薄壁細胞包圍著一個維管束而成。這些特征都說明了黃連屬植物不耐干旱的生物學特性和對溫涼、濕潤生境的生態(tài)學要求。從解剖特征來看，黃連屬植物，特別是云南黃連在根、葉各器官的結構、功能上存在著明顯的抗旱和其它抗逆性弱點，致使種群適應力、擴展力較弱，從而可

簡介：密級論文編號中國農業(yè)科學院學位論文植物精油植物精油對LPS誘導誘導的奶牛乳腺上皮細胞奶牛乳腺上皮細胞損傷損傷的保護作用保護作用研究研究STUDYOFPLANTDERIVEDESSENTIALOILPROTECTIONINJURYOFBOVINEMAMMARYEPITHELIALCELLSINDUCEDBYLIPOPOLYSACIDE碩士研究生生林杰指導教師師楊志強楊志強申請學位類別申請學位類別農學農學碩士碩士專業(yè)業(yè)基礎獸醫(yī)學基礎獸醫(yī)學研究方向向獸醫(yī)藥理與毒理學獸醫(yī)藥理與毒理學培養(yǎng)單位位中國農業(yè)科學院中國農業(yè)科學院蘭州畜牧與獸藥研究所蘭州畜牧與獸藥研究所2016年6月I獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農業(yè)科學院或其它教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名時間年月日關于論文使用授權的聲明本人完全了解中國農業(yè)科學院有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即中國農業(yè)科學院有權保留送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意中國農業(yè)科學院可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學位論文的全部或部分內容。研究生簽名時間年月日導師簽名時間年月日

簡介：目的近年來，研究者應用組織工程學原理和方法，對周圍神經進行脫細胞處理，制備了神經細胞外基質移植物；并用此種移植物修復周圍神經缺損，獲得了促進受損神經纖維再生及其功能恢復良好的效果。然而該種移植物對發(fā)出相關神經纖維的神經母細胞如脊神經的脊髓前角細胞和神經節(jié)細胞有何作用，尚未見有文獻報導。該研究對此問題進行了探討。方法用WISTAR大鼠30只，10只用化學提取法制備坐骨神經脫細胞基質移植物；另20只分為實驗組坐骨神經缺損脫細胞基質移植物橋接組和對照組坐骨神經缺損組，每組10只。動物飼養(yǎng)3到4個月后取移植物，脊髓腰7骶2節(jié)段和同節(jié)段脊神經節(jié)，做HE，尼氏染色標本以及電鏡標本，進行組織學和超微結構觀察，并對脊髓前角和脊神經節(jié)細胞的數(shù)量進行統(tǒng)計學分析。結果用化學提取法制備脫細胞周圍神經基質移植物的各步驟如果改在室溫下進行，可縮短制備時間710天。實驗組脫細胞移植物橋接神經缺損術后跟蹤觀察大鼠的自然狀態(tài)可見，術后3或4個月時，移植術側下肢行走時后蹬動作有力，足趾能分開，步態(tài)趨于正常；針刺足底有逃避動作。對照組神經缺損動物術側下肢的運動和感覺功能未見恢復。術后3或4個月實驗組動物移植物的HE染色橫切片和縱切片標本上，見有大量的再生1神經纖維；在電鏡標本上，再生軸突，髓鞘及施萬細胞也清晰可見。實驗組和對照組正常側的脊髓L7S2節(jié)段前角細胞的HE和尼氏染色標本可見，細胞形體較大，分為內側群和外側群，胞質內有較豐富的呈斑塊狀的尼氏體。實驗組移植物和對照組缺損側脊髓L7S2節(jié)段前角細胞的形態(tài)結構基本正常，但是分群已不明顯，并有膠質細胞增生。特別是支配四肢肌的前角細胞的數(shù)量減少，尤以對照組為甚。統(tǒng)計分析結果表明，脊髓前角細胞數(shù)實驗組移植側1037±145與正常側1440±181以及移植側與對照組缺損側597±169比較，差異均顯著P＜001。實驗組和對照組正常側L7S2脊神經節(jié)HE和尼氏染色標本可見，細胞形態(tài)結構正常，胞質內充滿細砂粒狀尼氏體，由大、中、小細胞組成。實驗組移植側和對照組缺損側的L7S2脊神經節(jié)細胞的形態(tài)結構基本正常。但是其數(shù)量較正常側減少，并以對照組缺損側最為明顯。統(tǒng)計分析結果表明，脊神經節(jié)細胞數(shù)實驗組移植側4557±588與正常側5357±657以及移植側與對照組缺損側3690±515比較，差異均有顯著性意義P＜001。結論該實驗在無菌，室溫條件下制備周圍神經細胞外基質移植物能夠縮短時間，可供急用。該實驗表明，此移植物免疫原性基本消失，具有良好的組織相容性，能有效的引導和促進受損神經再生。該實驗首次證明，此移植物對發(fā)出脊神經的脊髓前角細胞和脊神經節(jié)細胞具有較強的保護作用。

簡介：第一部分改良三袖套法建立大鼠左肺原位移植動物模型目的采用改良袖套法技術建立大鼠同種異體左肺移植模型。方法對供肺獲取、套管制作、自體肺切除、血管和氣管袖套套接技術進行改進。30例清潔級SD大鼠左供肺獲取后置于4℃的LPDG液保存3小時，隨后行肉眼直視下同種異體左肺移植術，再灌注4H后阻斷右肺門，分別測定阻斷前后氣道壓力、動脈血氣變化、肺WD比率及光鏡下肺組織結構變化。評價該模型復制移植物IRI的能力。結果周種異體左肺移植模型在肉眼直視下單人完成，供受體動靜脈和支氣管套管吻合時間分別為肺動脈4±1MIN、肺靜脈8±3MIN、支氣管2±05MIN?？偸中g時間55±10MIN。手術成功率90％2730，術后生存率100％。實驗結果顯示該模型成功復制出同種異體肺移植IRI的變化。結論本模型符合大鼠肺移植模型建立的優(yōu)點，全部操作在肉眼直視下單人完成；供肺的獲取較為快速，使用的套管更簡單，套管技術趨于簡化，肺移植時血管套接技術成功率高，整體手術時間操作縮短。該模型復制出移植肺IRI的變化，是適合肺移植IRI研究的理想模型。第二部分內源性HO1高表達對大鼠同種異體肺移植物缺血再灌注損傷的作用研究目的觀察COPP誘導內源性HO1高表達對大鼠同種異體左肺移植物IRI的影響并探討其作用機制。方法以SD大鼠為供受體，采用改良袖套法技術建立同種異體左肺移植模型。設立空白對照組A組、COPPZNPP組B組和COPP組C組，離體供肺靜脈40C的LPDG液逆行灌注，灌注后供肺保存3H后行左肺原位移植，移植肺再灌注4H后，阻斷右肺門，測量氣道壓力，動脈血PAO2、PACO2。隨后處死大鼠，分別測定肺WD比率、肺組織中SOD活性、MDA含量、MPO活性；光鏡觀察移植物病理組織學變化；PCR和免疫組化了解HO1表達ELISA檢測移植肺TNFΑ量的變化；免疫組化檢測TNFΑ、IL10、BCL2表達情況；TUNEL法檢測移植肺細胞凋亡水平。結果基因和蛋白水平檢測顯示C組肺組織HO1較A組、B組明顯升高P001，表明C組供肺成功高表達HO1。與A、B組相比，C組氣道壓力降低、PAO2上升、肺WD比率下降，SOD活性增高，MDA含量和MPO活性下降P001；病理檢查C組肺泡間質水腫明顯減輕，炎癥細胞浸潤減少，肺泡腔內水腫液和紅細胞少見；免疫組化TNFΑ表達減弱、IL10表達增強，BC12表達增強P001TUNEL法檢測移植肺細胞凋亡減少P001。結論COPP有效誘導移植肺高表達內源性HO1。HO1通過其抗氧化、抗炎和抗凋亡等多種途徑明顯減輕供肺IRI，提高肺移植術后早期肺功能。因此應用COPP誘導移植肺局部高表達內源性HO1可成為預防和減輕同種異體肺移植IRI的一種策略。第三部分腺病毒介導HO1離體轉基因對大鼠同種異體肺移植物缺血再灌注損傷的影響目的觀察腺病毒介導HO1轉基因對大鼠同種異體左肺移植物IRI的影響并探討其作用機制。方法以SD大鼠為供受體，采用改良袖套法技術建立同種異體左肺移植模型。設立空白對照組I組行離體供肺靜脈4℃LPDG液逆行灌注，空載體對照組Ⅱ組和基因轉染組Ⅲ組分別行肺靜脈逆行灌注4℃LPDG液稀釋的空病毒載體和重組腺病毒載體611010VPML。供肺保存3H后行左肺原位移植，移植肺再灌注4H后，阻斷右肺門，測量氣道壓力，動脈血PAO2、PACO2。隨后處死大鼠測定肺WD比率、肺組織中SOD活性、MDA含量、MPO活性；光鏡觀察移植物病理組織學變化；PCR和免疫組化法測定肺組織HO1表達ELISA檢測移植肺TNFA量的變化；免疫組化檢測TNFΑ、IL10、BCL2表達情況TUNEL法檢測移植肺細胞凋亡水平。結果基因和蛋白水平檢測顯示Ⅲ組肺組織HO1表達較Ⅰ組、Ⅱ組明顯升高P001，表明Ⅲ組供肺成功特異性轉染外源性HO1目的基因。與Ⅰ組、Ⅱ組相比，Ⅲ組氣道壓力降低、PAO2上升、肺WD下降、SOD活性增高、MDA含量和MPO活性下降P001；光鏡檢查Ⅲ組肺泡間質水腫明顯減輕，炎性細胞浸潤、肺泡腔內水腫和滲出改變明顯減輕；免疫組化移植肺TNFΑ表達減弱，IL10表達增強BCL2表達增強P001，TUNEL法檢測移植肺細胞凋亡減少P001。結論AD5HO1的構建為開展HO1基因治療創(chuàng)造了有利條件。腺病毒介導HO1轉基因治療能成功地在移植肺高表達外源性HO1目的基因。HO1通過其抗氧化、抗炎和抗凋亡等多種途徑明顯減輕供肺IRI，提高肺移植術后早期肺功能。因此應用腺病毒介導轉基因技術在移植肺局部高表達HO1可成為預防和減輕同種異體肺移植物IRI的一種新策略。

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簡介：點擊查看更多骨髓間充質干細胞與胰島共移植對胰島移植物β細胞早期凋亡的保護作用及機理研究.pdf精彩內容。

簡介：全文分為二部分第一部分含人肝細胞生長因子基因的腺病毒載體的構建及病毒體外感染骨髓間充質干細胞目的構建含人全長肝細胞生長因子HUMANHEPATOCYTEGROWTHFACTHHGF基因與綠色熒光蛋白GREENFLUESCENCEPROTEIN，GFP基因融合的腺病毒表達載體PDC316HGFIRESEGFP，經293細胞包裝，同源重組產生重組腺病毒ADHGF。病毒液感染骨髓間充質干細胞BONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLS，BMMSCS，研究病毒感染效率，以及HHGF基因在BMMSCS中表達情況。方法將人全長HGFCDNA亞克隆入腺病毒質粒載體PDC316IRESEGFPLACZA，建立含HHGF基因的腺病毒表達載體PDC316HGFIRESEGFP，采用酶切法、PCR法和測序法分別鑒定。采用同源重組法獲得含HHGF的重組腺病毒AD5HGFIRESEGFP簡寫為ADHGF。用CSEL密度梯度超離心法純化病毒，用空斑形成試驗進行病毒滴度測定。體外分離、培養(yǎng)BMMSCS。以僅表達GFP基因的重組腺病毒AD5IRESEGFP簡寫為ADGFP為對照，體外分別感染MSCS。熒光顯微鏡下觀察MSCS有無GFP基因表達；用熒光激活細胞分選術FLUESCENCEACTIVATEDCELLSTER，F(xiàn)ACS檢測受染細胞的GFP標記以判定HGF表達。酶聯(lián)免疫吸附測定法ENZYMELINKEDIMMUNOSBENTASSAY，ELISA檢測轉導細胞培養(yǎng)上清HHGF表達的濃度和持續(xù)時間。感染ADHGF，ADGFP的MSCS細胞分別命名為HGFMSCS，GFPMSCS。結果腺病毒表達載體PDC316HGFIRESEGFP經限制性內切酶切電泳后顯示有23KB的HHGF目的基因片段和52KB的線性化PDC316IRESEGFP載體片段，顯示構建的腺病毒表達載體中含有HHGF基因；目的片段測序結果與GENEBANK中HHGFCDNA序列一致。經293包裝所產生病毒ADHGF，純化后滴度可以達到5010PFUML。熒光顯微鏡下觀察到HGFMSCS，GFPMSCS細胞都有GFP基因表達。HGFMSCS細胞培養(yǎng)上清中HHGF水平升高，能持續(xù)表達HHGF大約14天；最高濃度達到103NGML。結論本實驗中腺病毒表達載體構建正確；重組腺病毒液ADHGF滴度高；轉導MSCS后在MSCS中獲得高效、穩(wěn)定和持續(xù)表達的HHGF。該載體達到實驗設計要求，為其在進一步的體內、外研究奠定了物質基礎。第二部分HGFMSCS促進小移植肝再生的實驗研究目的建立大鼠原位30％小體積肝移植模型，并在此基礎上進一步了解大鼠行同種原位減體積肝移植后，經門靜脈輸注表達HHGF的骨髓間充質干細胞HGFMSCS，研究其對移植后小移植肝的保護作用。方法1采用LEWIS大鼠，改良“二袖套法”建立大鼠30％肝移植模型，分別稱取受體肝臟重量及供肝重量。術后1，3，5，7天處死大鼠，稱取肝臟重量并取肝組織行組織學檢查，了解移植后肝臟再生的初步情況。2在模型建立的基礎上，將受體分為4組，每組5只，實驗組在供肝植入、門靜脈開放后，立即經門靜脈輸注510HGFMSCS。對照組則分別輸注相同體積的生理鹽水，510GFPMSCS，或1010PFUADHGF以上都定容至1ML。分別于術后1，3，5，7天在實驗組和對照組中各隨機抽取5只大鼠處死。取血檢測血清ALT。記錄移植物濕重。取肝組織用免疫組化法檢測肝細胞凋亡和增殖活性，或行相關的分子生物學實驗。結果1對照組大鼠30％肝移植模型7天存活率333％。而實驗組大鼠生存率為733％；2對照組移植物組織學檢查示術后1天中央靜脈以及肝竇擴張、部分肝細胞增大氣球樣變，3天和5天組可見匯管區(qū)單核細胞浸潤多；而實驗組肝臟結構損傷輕，炎性細胞浸潤少，二倍體和多倍體肝細胞多見；3HGFMSCS輸注的大鼠在術后3天和5天時血ALT水平較對照組明顯降低；4實驗組移植物濕重在術后3天和5天時較對照組明顯增加；5術后3天和5天實驗組大鼠的肝移植物增殖和凋亡細胞明顯較對照組高；6實驗組大鼠28天生存率較對照組高，且移植肝肝纖維化發(fā)生率低。結論1大鼠原位部分肝移植是研究肝再生的良好實驗模型，移植肝仍具有良好的增殖活性；2大鼠部分肝移植后，輸注HGFMSCS能夠保護肝細胞和移植物，促進肝功能的恢復，提高7天生存率；3HGFMSCS輸注能夠明顯促進大鼠部分肝移植后供肝的再生4HGFMSCS能夠維持移植肝的正常結構，提高長期生存率。

簡介：胰島移植治療糖尿病具血糖易控制、手術安全簡單、可重復性佳、免疫抑制要求較低等優(yōu)點。然而，供體嚴重短缺限制了其在臨床上的應用。異種移植具近無限的胰腺供給能力，是目前最有望突破這一“瓶頸”的途徑之一。但異種移植異種間的免疫排斥反應問題，目前尚無有效的解決方案。血紅素加氧酶HEMEOXYGENASE，HO是血紅素分解代謝的起始酶和限速酶，可將血紅素分解為一氧化碳CO、亞鐵離子FE2＋）和膽綠素?，F(xiàn)有的研究證實，HO1及其分解血紅素的產物組成的HO1系統(tǒng)可通過抗炎、抗氧化及抗凋亡作用在同種異體移植中保護移植胰島，另外，研究者還發(fā)現(xiàn)HO1尚可在動物心、肝等異種移植模型中發(fā)揮保護移植器官的作用，而HO1是否可保護異種移植胰島、延長其有功能存活期，目前尚不得而知，我們進行了如下研究。第一部分大鼠胰島分離改良研究目的探討SD大鼠胰島分離、純化的較優(yōu)方案，并評價依該法分離所得胰島的生物性特性。方法以濃度為075MGML的Ⅺ型膠原酶經膽管充分灌注SD大鼠胰腺完整分離后37℃水浴振蕩消化17MIN，DEXTRON70不連續(xù)密度梯度（1091、1081及1037）離心法分離、純化胰島，DTZ染色鑒定胰島并計數(shù)得率，AO－PI染色檢測胰島活性，糖刺激試驗判定胰島功能光鏡觀察體外培養(yǎng)胰島的形態(tài)學變化。結果純化后每只大鼠胰島收獲量為74360±4307，胰島純度90％，胰島細胞活率90％。胰島細胞在低糖和高糖刺激下分泌的胰島素濃度分別為2535±700和8648±1275UIUML110ISLET145MIN1。結論依改良后的分離純化方案分離大鼠胰島可獲得高純度高活率的胰島細胞，且細胞形態(tài)正常、功能良好。第二部分鈷卟啉誘導胰島血紅素加氧酶1過表達研究目的探討鈷卟啉腹腔注射誘導大鼠胰島血紅素加氧酶1（HO1）過表達的量效關系及其對胰島功能的影響。方法大鼠分為5組，A、B、C、D等4組分別在提取胰島前24H予腹腔注射25、5、75及10MGKG體重的鈷卟啉溶液，對照組予15ML生理鹽水。改良GOTH法提取胰島，計數(shù)胰島得率、估定純度，REALTIMEPCR和WESTERN印跡法檢測胰島組織內HO1MRNA及蛋白表達，糖刺激試驗評價胰島功能。結果C、D組大鼠在注射COPP溶液后出現(xiàn)機體損傷，D組部分大鼠死亡。A、B、C及對照組胰島得率及純度差異無統(tǒng)計學意義（P005），B組HO1MRNA及蛋白表達量為4組中最高（B組HO1MRNA表達量達對照組的8418倍）。A、B及對照組胰島于低糖刺激時，胰島素分泌量差異無統(tǒng)計學意義（P005），而高糖刺激下，胰島素分泌量以B組最高，差異有統(tǒng)計學意義（A、B及對照組分別為17237±164、18768±1993及9125±1264UIUML110ISLETS145MIN1，P005）。實驗組移植物內IL10MRNA表達量高于對照、阻斷兩組（P005）。實驗組受體血清IL10含量亦高于對照、阻斷兩組（P005）。而3組移植物和受體血清TNFA、IL1B及INF表達、含量比較無顯著差異。實驗組移植物內淋巴細胞浸潤情況少于對照及阻斷組。結論HO1過表達可延長異種移植胰島的有功能存活期，IL10在其中起重要作用?？偨Y腹腔注射5MGKG體重鈷卟啉相對安全，不影響大鼠胰島分離的得率及純度，可大幅提高大鼠胰島組織中HO1的表達量，并能增強胰島功能。而經鈷卟啉誘導HO1過表達的胰島在異種移植模型中有功能存活期明顯延長，其中，IL10的表達上調起重要作用。

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