簡介：分類號Q28UDC576密級單位代碼10798桃果實質體發(fā)育的細胞分子生物學研究ASTUDYONCELLULARANDMOLECULARBIOLOGYOFPLASTIDDEVELOPMENTINPEACHFRUIT二級學科細胞生物學研究方向植物發(fā)育細胞生物學研究生黎明指導教師郭學民教授所在院所河北科技師范學院2016年6月縮略詞AOIAIEAOFINTEREST選定區(qū)域CARCAMTENOID類胡蘿卜素CHLCHLOROPHYLL葉綠素CDDNACHLOROPLASTDEOXYRIBONUCLEICACID葉綠體基因組F0MINIMALFLUORESCENCE固定熒光FMMAXIMALFLUORESCENCE最大熒光F。ⅧIABLEFLUORESCENCE可變熒光FV／FMMAXIMALQUANTUMYIELDOFPS1IPSII最大光能轉換效率NPQNONPHOTOCHEMICALQUENCHING非光化學淬滅系數(shù)PSIPHOTOSYSTEMI光系統(tǒng)IPSIIPHOTOSYSTEMII光系統(tǒng)IIPTDNAP1ASTIDDEOXYRIBONUCLEICACID質體基因組APCOEFFICLENTOFPHOTOSYNTHETICQUENCHING光化學淬滅系數(shù)蘭皇業(yè)呈坐21型呈里絲蘭2墮L旦些型塑型燮皇_

簡介：ADISSERTATIONSUBMITTEDTOSICHUANAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORMASTERDEGREEOFSCIENCEEFFECTSOFRETINOLON／NVITROCHARACTERIZATIONOFSERTOLICELLSFROMPREPUBERTAIPORCINETESTISHUANHUANLIUSUPERVISORSHUMINYUASSOCIATEPROFESSORWENJIANG，SICHUAN，CHINAJUNE，2015論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行研究工作所取得的成果。盡我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，學位論文中不包含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學或其它教育機構的學位或證書所使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。一虢硼堤垃F(xiàn)咖薩白莎關于論文使用授權的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。同意四川農(nóng)業(yè)大學可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學／位論文的全部或部分內(nèi)容?？诒菊撐牟槐Ｃ?。請在以上口內(nèi)劃“√’’研究生簽名卻坎也研究生簽名A們目?！萆弦覍熀灻诒菊撐谋Ｃ?，在一年解密后適用本授權?！跮年8旯L多三乙印甜年考具CFB

簡介：分類號墨墨壘墨密級公玨學號2Q1321壘Q321雞原始生殖細胞及軟骨干細胞分離培養(yǎng)與生物學特性研究STUDYONISOLATION，CULTUREANDCHARACTERIZATIONOFCHICKENPRIMORDIALGERMCELLSANDCARTILAGESTEM／PROGENITORCELLS學位申請人李璐指導教師李俊杰教授合作導師關偉軍教授學科專業(yè)動物遺傳育種與繁殖學位類別農(nóng)學碩士授予單位河北農(nóng)業(yè)大學答辯日期二。一六年五月三十日試驗所屬項目及資金來源本研究由河北省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術體系蛋雞產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團隊資助。

簡介：南京農(nóng)業(yè)大學博士學位論文香豬卵巢細胞生物學特性和影響母豬卵巢顆粒細胞體外成熟的因素探討姓名孟春花申請學位級別博士專業(yè)動物遺傳育種與繁殖指導教師石放雄20080601香豬卵巢細胞生物學特性和影響母豬卵巢顆粒細胞體外成熟的因素探討均有表達．表明抑制素A，PKB、FOXOS、BAX和BEL．2在香豬卵巢中呈卵泡發(fā)育階段特異性和細胞特異性表達，可能在香豬卵泡的發(fā)育、閉鎖和黃體化中起重要調控作用．2．為了研究FOX06在豬生殖系統(tǒng)的作用，本實驗從4個成年豬卵巢和4只成年小鼠的腦組織中提取RNA，根據(jù)已報道的小鼠FOX06基因引物進行RTPCR，結果從小鼠腦組織中擴增出一條約2500BP的片段，而豬卵巢組織中未見此片段．因此，F(xiàn)OX06基因可能在成年豬卵巢中不表達．3．為了研究豬卵泡發(fā)育過程中影響PGC生長和卵泡閉鎖的因素，本實驗中用機械法從豬卵巢分離有腔卵泡，按直徑大小分為3組小卵泡1．5．3IIIITI、中卵泡3．5NLI／1和大卵泡耋5TONI，統(tǒng)計健康卵泡和閉鎖卵泡分別所占比率，分離PGC并收集PFF．用流式細胞術ANNEXINV．FITC／PI雙染法檢測PGC存活率和FLUO3AM探針標記PGC檢測CA2】I，用WESTERNBLOT檢測PGC內(nèi)FOX03A表達水平，用化學發(fā)光法檢測PFF中E2的濃度．結果表明隨有腔卵泡直徑的增大，閉鎖卵泡的比率逐漸降低P0．05；PGC內(nèi)FOX03A表達水平逐漸升高PO．05；PFF中E2的濃度逐漸升高PO．05．表明CA2I和FOX03A轉錄因子可能通過調控不同直徑有腔卵泡中PGC的生長和凋亡，從而調節(jié)豬有腔卵泡的生長，發(fā)育和閉鎖．4．為研究細胞外游離CA2對PGC的影響，在豬顆粒細胞培養(yǎng)液中添加CACL2或CA2螯合劑EGTA，分別于0H、6H、24H和48HE集PGC和培養(yǎng)液．用流式細胞術檢測細胞內(nèi)CA2濃度CA2I、用WESTERNBLOT檢測PGC內(nèi)FOX03A表達水平、用RIA法檢測培養(yǎng)液中E2的濃度．結果表明1培養(yǎng)液中50MG／MLCACL2對PGC的【CA2】I沒有顯著影響；50舭EGTA．顯著降低了豬顆粒細胞內(nèi)CA2濃度P0．05，但500舭EGTA反而對PGC的CA2】I無顯著影響．2培養(yǎng)液中添H口CACL26H可以顯著提高PGC內(nèi)FOX03A的表達，而添加EGTA顯著抑制了PGC內(nèi)FOX03A的表達P0．05，且抑制程度呈劑量依賴性關系．3培養(yǎng)液中添加CACL2對PGC內(nèi)E2的分泌起抑制作用，而添加EGTA對PGC內(nèi)E2的分泌起顯著的促進作用P0．05，且E2分泌提高幅度與EGTA的添加量呈劑量依賴性正相關．另外，體外培養(yǎng)的PGC中E2的分泌隨時間的延長逐漸升高的趨勢，體外培養(yǎng)的PGC可能存在一個自成熟的過程．所以，細胞外鈣離子可能通過FOX03AF言號通路來調控體外培養(yǎng)的PGC的生長、凋亡和成熟．5．為研究PGC中CA2堆號通路是否受PDK／PKB／FOXO信號通路的調節(jié)，用2NG／MLFSH、1MMOYLEGTA一種CA2螯合劑、10MNOL／LLY294002一種P13K的特異性抑制劑以及FSHEGTA、EGTALY和FSHE∞A十LY共處理體外培養(yǎng)的PGC，用流式細胞儀檢測PGC存活率、用WESTERNBLOT檢測PGC內(nèi)FOX03A等蛋白表達水平、用RIA法檢測培養(yǎng)液中E2的濃度。結果表明處理后2H，各處理組細胞存IL

簡介：南京農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文菊亞族六個種的細胞學及太行菊的生殖生物學研究姓名李健申請學位級別碩士專業(yè)園林植物與觀賞園藝指導教師陳發(fā)棣20080601南京農(nóng)業(yè)大學碩士論文菊亞族六個種的細胞學及太行菊的生殖生物學研究核花粉時期完全消失。最終形成AY四面體型小孢子，成熟花粉有3核，花粉表面具3個萌發(fā)孔。4太行菊單子房，單胚珠，雙珠被，薄珠心，胚珠倒生型，胚囊發(fā)育屬于待宵草型；大孢子母細胞由孢原細胞直接發(fā)育而成，經(jīng)過兩次分裂形成大孢子四分體，呈線型排列，其中珠孔端大孢子為具功能大孢子，而合點端的3個大孢子在發(fā)育過程逐漸解體；胚胎發(fā)育過程經(jīng)歷球形胚，心形胚，魚雷形胚和子葉胚四個階段；花粉活力較高，自交時能在柱頭上大量附著，且都能正常萌發(fā)形成花粉管并進入胚囊。關鍵詞菊亞族；核型；減數(shù)分裂；大小孢子發(fā)生；雌雄配子體；胚胎發(fā)育II

簡介：上海交通大學博士學位論文東方鱟血細胞中兩種脂多糖結合蛋白的基因克隆、表達及其生物學功能研究姓名王東寧申請學位級別博士專業(yè)生物化學與分子生物學指導教師張惟杰吳祥甫200251歲屠支逸名謦博士學位論文新型絲氨酸蛋白酶，同時它具有LPS結合區(qū)，可以結合LPS并抑制G菌的生長。目前用于功能研究的TALFSHFC主要都是從天然鱟血細胞裂解物的分離純化中得來的，這存在以下幾方面問題首先鱟類是一種稀少的物種，這就大大局限了從鱟血裂解物中分離天然TALF和FC的樣品來源；其次TALF和FC含量有限，且需在無菌環(huán)境下純化，這使分離純化相當困難；同時天然裂解物對內(nèi)毒素的敏感性還因每次不同來源的樣品而異。另外，利用氨基酸合成法合成的具有LPS結合活性的肽段成本太高，且化學合成法難以完善肽的修飾加工。因而，為了獲得大量可用于研究與臨床治療的TALF和FC蛋白，只有利用基因工程的手段才有可能大量制備具有生物活性的重組蛋白以滿足應用的需要。目前國際上尚沒有從分子水平克隆TALF基因并用基因工程手段重組表達該蛋白的報道，對于TALF的研究還完全停留于蛋白水平至于東方鱟來源的FC一直也沒有什么基因重組克≮彳。之隆表達的報道。所洲我鐘稍目標就是利用基因工程手段從鱟血細胞的／CDNA一|L克隆TALF和FC基因，同時完成將它們在不同的表達系統(tǒng)II進行重組表達的研究以建立起一種或幾種理想的表達系統(tǒng)用以大量制備具有生物活性的重組蛋白。另外，本論文也包括了從腫瘤患者的淋巴結中克隆次級淋巴趨化因子SECONDARYLYMPHOIDTISSUECHEMOKINE，SLC基因，同時將其在原核表達系統(tǒng)中進行重組表達并純化的研究。F首先，本研究以中國大陸福建、浙江沿海海域的東方鱟為材料，成功L抽提了其覷細胞的總RNA，并首次利用了逆轉錄聚合酶鏈反應RTPCR

簡介：廈門大學碩士學位論文角質細胞生長因子在大腸桿菌中的表達、純化及生物學活性研究姓名黃新強申請學位級別碩士專業(yè)微生物學指導教師鄭忠輝宋思揚200171ABSTRCTUEXPRESSIONOFKERATINOCYTEGROWTHFACTORINESCHERICHIACOLIANDITSPURIFICATIONANDBIOACTIVITYABSTRACTKERATINOCYTEGROWTHFACTORKGFISAMEMBEROFFIBROBLASTGROWTHFACTORFGF71BYACTINGPREDOMINANTLYINAPARAERINEN％ANNERKGFCXTNSTIMULATETHEPROLIFERATION，DIFFERENTIATIONANDMIGRATINNOFEPITHELIALCEILSASERIOUSSTUDIESHAVEPROVIDEDINSIGHTINTOTHEFUNCTIONOFKGFINR礎PROCESSESOFVARIOUSTISSUESANDORGARTS，INELUDINGSKIN，CORNEA，BOWELINADDITIONITISAPROTECTIVEFACTORFORGASTROINTESTINALINJURYINDUCEDBYRADIATIONANDCHEMOTHERAPYINTERESTINPRODUCING】ARGEAMOUNTANDBIOACTIVEKGFTHROU曲GENETICENGINEERINGMETHODHASBEENHEIGHTENEDDUETOTHELIMITEDAMOUNTOFKGFINTHEBODYBASEDONPREVIOUSWORK，THISP卵ERFOCUSONTHEEXPRESSIONPURIFICATIONANDBIOACTIVETESTOFKGFFOR也ESAKEOFPROVIDINGGROUNDWORKFORFUTURESTUDYBYCHANGINGTHEINDUCINGTEMPERATUREINDUCER1PTGCONCENTRATIONTHEDENSITYOFBACTERIAANDINDUCINGTIME，THESATISFYINGCONDITIONFOREXPRESSIONOFSOLUBLEFUSIONPROTEINGSHGFCOULDBEOBTAINEDAT25℃03MMOL，LIPTG，OD600EQUALSTO097，5HINDUCINGTIMEUNDERTHEIMPROVEDCONDITIONTHESOLUBLEGSTKGFCOMPRISEDABOUT420OFTOTALEELLULARPROTELNAND25RAGGSTKGFCOULDBEHARVESTEDINLLFERMENTATIONAMETHODWHICHCOMBINEDTWOSTEPOFAMILITYCHROMATOGRAPHYANDTRYPSININCUBATIONWASUSEDTOACHIEVEKGFPURIFICATIONSINCETHEFUSIONPROTEINGSTKGFCOULDBINDTOGSHSEPHAROSO4BANDHEPARINSEPHAROSACL6BANDHEPARINSEPHAROSECL石BPROTECTSTHEACTIVECORCOFKGFFROM自啊SINPROTEOLYSISTHE17KDKGFDERIVEDFROMGSTKGFWASPURIFIEDTOHOMOGENEITY52RAGPURIFIEDKGFATOTALRECOVERYOF泓KGF懈HARVESTEDWRESTEMBLOTANAL|RSISSHOWEDTHATTHEPMIFIEDKGFCOULDBEDETECTEDBYRABBITAGAIBSTHUMANKGFMTTASSAYWASUSEDTOINVESTIGATETHEEFFECTOFRECOMBINEDKGFONTHEPROLIFERATIONOFMOUSECORNEALEPITHELIALCELLSWHICHWERECULTUREDTHROUGH

簡介：湖南農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文牛蛙T、B淋巴細胞的主要生物學特性研究姓名鄧時銘申請學位級別碩士專業(yè)水產(chǎn)養(yǎng)殖指導教師肖克宇20040401培養(yǎng)結果顯示只有1000№／ML慶大霉素組中T、B淋巴細胞的細胞毒數(shù)為69．94±4．51％和72．36±1．89％，其它均低于50．00％。溫度增至28℃時，環(huán)磷酰胺對T淋巴細胞有毒性作用，對B淋巴細胞無毒性作用；慶大霉素在500№／M1以上對T、B淋巴細胞均有毒性作用；鏈霉素250¨∥M1以上對T、B淋巴細胞均有毒性作用。關鍵詞牛蛙T淋巴細胞B淋巴細胞細胞培養(yǎng)細胞表面標志免疫抑制

簡介：上海第二醫(yī)科大學博士學位論文神經(jīng)元突觸成份轉運的分子和細胞生物學機制研究姓名蔡倩申請學位級別博士專業(yè)神經(jīng)生物學指導教師盛祖杭20050501在本論文工作巾，我們還進一步發(fā)現(xiàn)SYNTABULIN在神經(jīng)元線粒體順行軸漿運輸過程中所發(fā)揮的另一個重要作用。SYNTABULIN屬外周膜相關蛋白，通過它的羧基末端尾部區(qū)域定位至線粒體。采用實時活細胞影像學技術，可見神經(jīng)元中相當數(shù)量的SYNTABULIN與線粒體肓共定位，并能夠沿神經(jīng)元突起共同移動。弘SYNTABULIN特異性SIRNA抑制內(nèi)源性SYNTABULIN的表達或干擾SYNTABULIN與KINESINL重鏈間的相互作用可削弱線粒體在神經(jīng)元軸突中的順行運輸，進而降低了線粒體在其中的正常分布密度。結果提示，SYNTABUFIN作為一個連接分子還能夠將線粒體細胞器附著在以微管細胞骨架為基礎的馬達分子KINESINI上，并參與線粒體在神經(jīng)元的順行軸漿運輸過程。已有報道，KINESINL作為一個候選馬達蛋白分子，同時參與了神經(jīng)元中SNAP25、SYNAPSINL、谷氨酸受體GLUR2、GAP43和線粒體等各種不同類型突觸成份在軸突和樹突中的運輸過程。隨著對SYNTABULIN與KINESINI重鏈羧基末端尾部序列問直接相互作用的闡明，為深入研究與SYNTABULIN和KINESINI相互作用有關的軸漿運輸過程提供了一個重要線索。綜上所述，SYNTABULIN作為一個連接分子或是接合體復合物中的一個重要組成部分，參與神經(jīng)元中KINESINI所介導的多種物質轉運通路，如SYNTAXIN和線粒體細胞器沿神經(jīng)元突起的順行軸漿運輸過程。該研究為進一步研究和理解與神經(jīng)元其它重要突觸成份轉運相關的分子和細胞學機制以及某些神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病機制提供了新思路。國際項尖權威雜志“自然細胞生物學2004年第10期發(fā)表的新聞專題評論認為，此項研究成果是神經(jīng)生物學領域的一項重大突破。關鍵詞SYNTAXIN，線粒體，KINESINI，微管，馬達蛋白。順行軸漿運輸，膜轉運

簡介：天津大學碩士學位論文懸浮培養(yǎng)南方紅豆杉細胞真菌誘導生物學效應的研究姓名張長平申請學位級別碩士專業(yè)生物化工指導教師元英進2000121天津大學在職申請碩士學位論文摘要ABSTRACTTHEPHYSIOLOGYSTATUS，CELLULTRASTRUCTUREANDTHESECONDARYMETABOLISMOFSUSPENSION。CULTUREDTAXUSCHINESISVAR．MAIREIINFLUENCEDBYFUNGALELICITORFROMFUSARIUMOXYSPORUMWHICHWASADDEDINTOTHECULTUREDSYSTEMINTHELATEREXPONENTIALSTAGEWERESTUDIEDTAXOLWASTHEMAINSECONDARYMETABOLITEINTHECELLCULTURESSYSTEMANDELICITATIONBYFUNGALELICITORWASTHEMAINMETHODOFTHISPAPER．AFEWNEWTECHNOLOGIESOFTAXOLPRODUCTIONINCLUDINGELICITINGTHECELLSINFASKSYSTEMANDBIOREACTORSYSTEMBYFUNGALELICITORANDFILLINGUPTHEFRUCTOSEATTHESAWTETIME，ANDINDUCINGTHECELLSBYCOCULTUREMETHODWHICHTHEFUNGIWEREIMMOBILIZEDWEREDEVELOPED．THEBIOLOGICALEFFECTSOFIRAXUSCHINESISVAT．MAIREFBYDIFIERENTFUNGALELICITORWITHPREPARATIONWERERESEARCHEDCRUDEFUNGALELICITORORIGINATEDFROMFUNGALCELLWALLCOULDPROMOTETHETAXOLPRODUCTIONANDREACHED66．2MG／1FOURDAYSAFTERELICITATION．THEPHYSIOLOGICALSTATUSOFCELLSCHANGEDOBVIOUSLY．THEMEDIUMWASALKALINIZEDANDCONTENTOFPROTEININCREASEDMANYOXIDATIVEGROUPSWERERELEASEDBYOXIDATIVEBURSTINASHORTTIMEAFTERELICITATIONANDTHEACTIVITYOFALLKINDSOFENZYMESCHANGEDFLUCTUANTLYTHEACTIVITYOFPALWHICHWASAINTERESTENZYMEINPHENYLPROPANOIDMETABOLISMPATHWAYWASPROMOTEDANDTHEACCUMULATIONOFPHENOLICSWASHIGHER．THEFUNGALELICITORINFLUENCEDTHEEELLULTRSTRUCTURETOO．THEINTENSESTRUCTUREOFEELLAGGREGATESTENDEDTORELAXANDTHEMIDDLEAREAOFCELLAGGREGATESALTEREDMOSTOBVIOUSLYWHICHRESULTEDFROMTHEINHIBITIONOFPRIMARYMETABOLISMBYFUNGALELICITORTHEREWEREELCETRONDENSEPRECIPITATELININGTHETONOPLASTAFTERELICITATIONANDTHEAMOUNTOFELECTRONDENSEPL，ECIPITATEINCREASEDFIRSTANDDECREASEDFOLLOWED．THEMAINCOMPONENTOFWHICHWERECA’ANDCL_．WHICHHADRELATIONSHIPWITHTHECELLSIGNALTRANSMISSION．OVERALL，THECELLSTRUCTUREWASNOTSERIOUSLYDAMAGED，BUTTHESTRUCTURESOFCELLAGGREGATESANDTONPLASTCHANGEDDRAMATICALLY．THEACTIVECOMPONENTOFCRUDEELICITORWASOLIGOSACCHARIDEANDTHENONACTIVECOMPONENTCOULDINFLUENCEDTHEACTIVITYOFOLI20SACCHARIDEBYALTEREDTHEEXPOSURELEVELOFPOLYSACCHARIDETOCELLS．THETAXOLPRODUCTIONINCREASEDCONTRASTTOELICITATIONBYCRUDEFUNGALELICITORANDTHEPEAKVALUEOFTAXOLPRODUCTIONREACHED98．4MG／L1DAYAFTERELICITATIONATTHESAMETIME，THECELLSRESPONDEDTOTHEFUNGALELICITORMOREQUICKLYANDTHEPERIODOFELICITATIONWASSHORTED．THERESEARCHABOUTRELATIONSHIPBETWEENTAXOLPRODUCTIONANDCARBONSOURCEMETABOLISMSHOWEDTHATTHEFRUCTOSEWASBESTCARBONSOURCEFORTAXOLBIOSYNTHESIS．THEELICITATIONPOTENTIALITYOFELICITORWASBROUGHTINTOFULLPLAYBYADDINGTHEFRUCTOSEMEDIUMINTOTHESYSTEM，BYWHICHTHETAXOLPRODUCTIONWASPROMOTEDCOMPARINGTOTHEELICITATIONBYFUNGALELICITORALONE．THEPEAKVALUEOFTAXOLAMOUNTREACHED81．0MG／LINTHEFLASKAND71．7MG／LINTHEBIOREACTOR．THEIMMOBILIZEDFUNGICOULDINDUCETHETAX01ACCUMULATION，THEHIGHESTAMOUNTOFTAXOLREACHED55．3MG／LAFTER4DAYSELICITEDBYTHEM．DIFFERENTELICITATIONBYHADDIFFERENTTIMECOURSEOFELICITAFIONANDTHESPECIESOFMETABOLITEWEREDIFFERENTEITHER．KEYWORDSPLANTCELL，SUSPENSIONCULTURE，F(xiàn)UNGALELICITOR,IMMOBILIZATION，TAXOL，MORPHOLOGY，ENZYME，METABOLISM2

簡介：第三軍醫(yī)大學碩士學位論文HTERT基因轉染對人胚胎成纖維細胞生物學行為的影響姓名梁光萍申請學位級別碩士專業(yè)外科學（燒傷專業(yè)）指導教師羅向東200251驗對HTERT基因轉染細胞是否具有惡性表型進行分析。結果1構建了含有HTERT基因的熒光真核表達載體。2通過脂質體法，將HTERT熒光正義真核表達載體及空載體導入HEF細胞經(jīng)G418篩選，各獲一個陽性克隆，分別命名為HEFHTERT和HEFEGFP，并從DNA、MRNA和蛋白質水平鑒定外源性HTERT基因成功導入HEF細胞，并可轉錄及翻譯。3HZFHTERT細胞端粒酶活性明顯高于HEF和HEFEGFP細胞O290O040VS0110001200930032，P001，端粒長度得到延長，分別為60KB、53KB和54KB。體外培養(yǎng)60代后，HEF、HEFEGFP細胞出現(xiàn)生長減緩，而HEFHTERT細胞在體外培養(yǎng)70代后仍能每23天傳一代。4外源性HTERT轉染對HEF細胞端粒酶RNAHTR、端粒酶相關蛋白1TPL在MRNA水平上的表達無影響。5MTT法顯示，HEFHTERT細胞增殖明顯增快；蛋白免疫印跡檢測發(fā)現(xiàn)，HEFHTERT細胞PCNA、IDL、I和111型膠原表達明顯增強；流式細胞儀測定細胞周期發(fā)現(xiàn)，HEFHTERT細胞GO／GL期細胞數(shù)較HEF和HEFEGFP細胞下降，S期和G2M期細胞數(shù)升高，增殖指數(shù)PI增高；透射電鏡下HEFHTERT細胞中線粒體、粗面內(nèi)質網(wǎng)等細胞器較HEF和HEFEGFP細胞豐富。6核型分析顯示HEFHTERT細胞染色體數(shù)目為46條；流式細胞儀檢測DNA未出現(xiàn)異倍體將HEF及其轉染細胞接種到裸鼠皮下均不產(chǎn)生致瘤性。結論本研究成功構建了攜帶HTERT全長CDNA序列的熒光真核表達載體HTERT，PLRES2EGFP，并將其穩(wěn)定轉染至人胚胎成纖維細胞中，使細胞端粒酶得到活化，端粒長度延長，從而使細胞壽命延長，細胞增殖能力得到明顯增強，并且轉染細胞不產(chǎn)生惡性表型。，關鍵詞人端粒酶蛋白催化亞單位，人胚胎成纖維細胞熒光真核表達載體，細胞增殖，惡性表型／’～～

簡介：‘97717。附⑨西，￡農(nóng)林針教大學2006屆攻讀項士學位研究生學位畢業(yè)論文I、F。瑚P基因轉染表皮干細胞及對其生物學特性影響的研究學科專業(yè)蝤席蛭蘭研究方向動物胚胎工程研究生韓雅婷指導教帥竇忠英教授完成時間2Q06年5月實驗成果及新見解建立起以酶消化法獲取原代表皮干細胞，IV型膠原差速篩選，有血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的山羊表皮干細胞培養(yǎng)體系。構建ESCS多能性維持的關鍵基因NANOG的真核表達載體并導入山羊表皮干細胞，發(fā)現(xiàn)NANOG可以促進表皮干細胞表達一些ESCS特異性的標志，并使表皮干細胞克隆形成能力有一定提高，體外培養(yǎng)能夠自發(fā)分化為神經(jīng)樣細胞，OCT一4陽性，顯示NANOG可以促進表皮干細胞表現(xiàn)部分ESCS的生物學特性。關鍵詞NANOG；表皮干細胞；山羊；胚胎干細胞

簡介：浙江大學博士學位論文CCR7的表達及與配體CCL19對鼠小膠質細胞生物學功能的影響姓名田勇申請學位級別博士專業(yè)生物學（遺傳學）指導教師傅衍TATSUROKOIKE20060401

簡介：第四軍醫(yī)大學博士學位論文人與小鼠神經(jīng)干細胞生物學特性的比較研究姓名姬西團申請學位級別博士專業(yè)外科學（神經(jīng)外科學）指導教師章翔20040501第四軍醫(yī)大學博士學位論文縮略語NSCSEGFHUEGF縮略語表英文全稱NEURALSTEMCELLSEPIDERMALGROWTHFACTORHUMANEPIDERMALGROWTHFACTORBFGFBASICFIBROBLASTGROWTHFACTORBNCTSDGFAPNF一200NGFRAESCSVZSGZBMSCGFPBDNFBMPCNFBORONNEUTRONCAPTURETHERAPYSPRAGUEDAWLEYGLIALFIBDLLARYACIDICPROTEINNEUROFILAMENT200NERVEGROWTHFACTORRETINOICACIDEMBRYONICSTEMCELLSSUBVENTRICULARZONESUBGRANULARZONEBONEMARROWMESENCHYMAISTEMCELLGREENFLUORECENTPROTEINBRAINDERIVEDNEUROTROPHICFACTORBONEMORPHOGENETICPROTEINCILIARYNEUROTROPHICFACTOR中文全稱神經(jīng)干細胞表皮生長因子人源性表皮生長因子堿性成纖維生長因子硼中子俘獲技術大鼠種系膠質纖維酸性蛋白神經(jīng)絲200神經(jīng)生長因子維甲酸胚胎干細胞室管膜下區(qū)齒狀回的亞顆粒區(qū)骨髓間質干細胞綠色熒光蛋白腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子骨形成蛋白睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因

簡介：I盟些叢盥塋也韭L』城亟垡恥捌旦韭地蚶出生縫唑鞋盥娶垡址土盟芏盥蛐螬刪目錄摘第一章綜述～7第一節(jié)CSN復合體概進7凹、CSN復合體的發(fā)現(xiàn)7CSN復合體的結構11I成和分布8CSN復弁體的生化活性9CSN復臺體與泛錄／26S蚩閂酶體臍解途徑J0泛索／26S蛋口酶體降解途徑簡介10二26S蛋白脯體12三CSN復合體與26S蛋白酶體的關系13四CSN復臺體與泛桑／26S蛋臼酶體降解途徑的關系14五、CSN復合體的細胞功能15CSN復合體和細胞捌期～15CSN復合體和摹兇表達16三CSN復合體和DNA修復1A、CSN復合體在植物生長發(fā)育葉的重要作用178七、CSN復合體LLCSNI的功能19幫二節(jié)植物光信號傳遞選釋研究進展。21、概述一2L_二、COP／DEF／FUS蛋白研究進展21三、COPI結構、分布和功能段研究進展22第二節(jié)研究內(nèi)容和意義24第二章CSNL對COPI細胞山定位的影響25引言。25第一竹材料與方法25一、材料25一、方法26一質粒的構建及箍定26二基凼槍法轉化洋蔥表皮蜘胞，29一酵母雙雜交分析實驗32四擬南芥萌發(fā)、雜交與GUS染色36五原核表達體系操作及PULIDOWN實驗37第二符結果與分析一、洋慧表皮細胞中擬南撲CSN復合體的業(yè)基對COPI40業(yè)細胞定位帕影響盟生堅赴世羔韭監(jiān)上J虹恥Ⅱ羔盟型旦韭地必岫丘世咀鞋咀盔垡盟D_塹噬坳監(jiān)蛆韭必摘要刪Y22㈣27㈣595CL】P9信號復合體CSN是一個保守的蛋白復合件由8個下硎的皿_II組成依次命名為CSNICSN8。CSN復合體最初足在對擬南莽光形態(tài)發(fā)生的遺傳學研究TJ被發(fā)現(xiàn)的，R被變體幼苗都呈現(xiàn)組成型光形態(tài)建成的表型。CSN、COPI以及COPIODDBL一DETICDD復合體都是調節(jié)植物光反應和發(fā)育的關鍵因子。COPL受到光信號影響會改變其在細胞核與細胞質巾的丹布比例，早期擬南芥遺傳學研究發(fā)現(xiàn)COPI的細胞核定位需要CSN復合體的存在但CSN復合體影響COPI的細胞內(nèi)定位的分子機制還沒有報道。為了探討COPI在細胞內(nèi)定位的分子機制利用洋蔥表皮細胞瞬間表達系統(tǒng)，我們發(fā)現(xiàn)批表達的CSNI能夠促進GUSCOPI的細胞核定位，且CSNI的N一術端是促進GUSCOPL細胞核定位的關鍵。同時利用擬卣井CSN／突變體，證實CSNI的N一末端是COPL實現(xiàn)細胞核定位不可缺少的蛋白片段。進而利用酵母積雜交系統(tǒng)檢測發(fā)現(xiàn)CSNL通過其N一末端結構域直接和COPL的COILEDCOII結構域發(fā)生相互作用并且通過免疫JT沉淀實驗證實COPL乖LCSN復合體在擬南芥體內(nèi)存在豐F『互作J目。此外TCSNIXJ『COPL細胞棱定位的促進作用需要COPL自身細胞核定位信號的參與，同時也與COP|的COILEDCOLL結構域有關。COPI的COILEDCOIL結構域不僅是CSNI的結合區(qū)。還包含了COPL細胞質定位信號的一部分。這些發(fā)現(xiàn)使我FLCSN復臺體影響COPL的細胞定位的機制有了進一步的了解為々后深入研究CSN復臺體調控植物光形態(tài)發(fā)生的分予機制提供了一定的儆據(jù)。CSN復合體最初被定義為擬南芥光形態(tài)發(fā)生的抑制因子，隨著研究的深入人們發(fā)￡ECSN復合體參與真核生物的各種生長發(fā)育過程以及細胞周期等細胞變化進程。CSNI業(yè)基的卜末端包含一個PCI結構域該結構域負責蛋白業(yè)基與亞基的相互作JIJ以及CSN復臺體的形成。CSNL的N一末端小參與CSN復合體的彤成，但是對CSN復合體的功能起著重要作刷，為了深入R解CSN復合體如何通過CSNL調控植物的生K發(fā)育等過程奉研究利用酵母取雜交文庫篩選技術尋找CSNL的卜未端相互作用蛋白扶得了5個候選蛋白分別是PAD2、TSAL、ELF_2家族蛋白、核糖體60S業(yè)基蛋E3L35以及個含C2結構域的蛋向，州對其中的PAD2、TSAI的相關功能進行了初步研究。PAD2是26S蛋白酶體的棱心組分20S蛋白酶體N勺Ⅱ亞基之一。已有證據(jù)揭示擬南芥中CSN復合體、26S蛋白酶體和SCF型黜連接酶能夠相互站臺形成更大的復臺體而日擬南芥SCF型E3可以通過SKPL亞基SNRK一蛋白激酶的直接相互作用錨定到PADL上。但日前關于CSN復合體通過何種方式參與其中還不是清楚，通過酵母雙雜交文庫篩選，我們發(fā)現(xiàn)PAD2的C一末端片段與CSNI的N很末