簡(jiǎn)介：STUDY0NCRE』訂IONANDBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFCOLDRESISTANTTETRAPLOIDNONHEADINGCHINESECABBAGEBYWANGYAMEISUPERVISEDBYASSOCIATEPROFESSORZHANGSHUNINGTHEDISSERTATIONSUBMITTEDTONANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFORMASTERDEGREEOFAGRICULTURESCIENCESCOLLEGEOFHORTICULTURE，NANJINGAGRICULTURALUNIVERSITYNANJING210095，PR，CHINAJUNE，2014目錄目錄摘要。IABSTRACTIII縮略詞表V引言VII第一部分文獻(xiàn)綜述1第一章植物多倍體育種研究進(jìn)展一L1多倍體簡(jiǎn)介12蔬菜多倍體的分類13蔬菜多倍體的獲得途徑231自然突變形成多倍體232人工誘變形成多倍體2321物理學(xué)方法2322化學(xué)方法3323生物學(xué)方法34蔬菜多倍體的特征一441形態(tài)變化442組織學(xué)變化443物質(zhì)含量增高444抗逆性增強(qiáng)55蔬菜多倍體的鑒定一55。L形態(tài)學(xué)鑒定552染色體計(jì)數(shù)鑒定553流式細(xì)胞術(shù)鑒定554分子水平鑒定66多倍體在育種方面的應(yīng)用一661利用多倍體的巨大性，提高蔬菜產(chǎn)量和品質(zhì)662利用染色體多倍化，克服遠(yuǎn)緣雜交障礙763利用多倍體抗逆性增強(qiáng)，擴(kuò)大種植區(qū)域7

簡(jiǎn)介：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文兩種不同體色鳙魚群體生物學(xué)及遺傳差異研究姓名范武江申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)水產(chǎn)養(yǎng)殖指導(dǎo)教師王曉清楊品紅20070601ABSTRACTRANDOMAMPLIFIEDPOLYMORPHICDNA＆APDTECHNIQUETOGETHERWITHTHEMETHODOFMORPHOLOGYWASFIRSTAPPLIEDTOSTUDYGENETICDIVERSITYOFTWOBODILYCOLORSBIGHEADCARPSARISTICHTHYSNOBILISOFXIANNIANGRIVERINTHETESTTOTALTWENTYTHREESAMPLESWHICHARETENBLACKBIGHEADCARPSANDTHIRTEENWHITEBIGHEADCARPS，WERECOLLECTEDFORUSETHEORDINARYREGULATIONSANDTVALUETESTWERECHOSETOSTUDYTHEIRMORPHOLOGICALFEATURESTHERESULTSSHOWEDNOTABLEDIFFERENCEOFFTHECAUDALFINCOLORPECTORA／FINCOLORANDBODYCOLOROFTHETWOSTOCKSTHERATIOSOFHEADLERLGTHTOEYEDIAMETERANDHEADLENGTHTOINTERORBITALSPACEANDBODYLENGTHTOINTERORBITALSPACEANDBODYLENGTHTOCAUDALPEDUNCELLENGTHWEREEXTREMELYREMARKABLE；THEDIFFERENCEOFTHERATIOOFCAUDALPEDUNCELLENGTHTOCAUDALPEDUNCELHEIGHTWASOBVIOUSTHEAGEOF2ANDABOVEOFBLACKBIGHEADCARPHASAGREATERGROWTHRATETHANTHATOFTHEWHITEBIGHEADCARPOF80RANDOMOLIGONUELEOTIDEPRIMERSFORAMPLIFICATIONOFARISTICHTHYSNOBIFISGENOMEDNA25COULDPRODUCEDISTINCTIVEANDREPRODUCIBLEFINGERPRINTSVARYINGINLENGTHFROM95TO2359BPEACHPRIMERUSEDFORTHEDETECTIONCOULDPRODUCEL18MOLECULARMARKERSTOTALLYTWOHUNDREDSANDSIXTYFIVESITESWGREDETECTEDTHEEWERE80POLYMORPHICSITES3390％1OFTHETOTALL236RAPDSITESAMPLIFIEDONBLACKBIGHEADTWOHUNDREDSANDFIFTYSEVENSITESWEREDETECTEDOFFWHITEBIGHEADCARP，OFWHICH96WEREPOLYMORPHIC3813％THEAVERAGESIMILARITYINDEXOFTHETWOSTOCKSWAS08712，ANDTHEGENETICDISTANCEWASO1379ALSO，THEAVERAGESIMILARITYINDEXESBETWEENINDIVIDUALSOFTHEBLACKBIGHEADCARPSWAS09150，THEAVERAGEGENETICDISTANCEWASO0887，ANDTHEVALUEOFAVERAGEHETEROZYGOSITYWAS0085WHILETHEAVERAGESIMILARITYINDEXES，GENETICDISTANCEANDHETEROZYGOSITYWERE09213O0819ANDO0787ONTHEWHITEBIGHEADCARPSEPARATELYTHERESULTILLUSTRATEDTHATTHEREWERELOWPOLYMORPHISMBETWEENTHETWOBODILYCOLORSSTOCKSOFBIGHEADCARPLACKINGOFGENETICDIVERSITYCHALLENGEDTHEEXISTENCEOFBIGHEADCARPONTHEDECLINEINRESOURCESOBVIOUSDIFFERENCEBANDSCABBEDETECTEDBETWEENTHETWOSTOCKSFROMTHREEELECTROPHORESISAMPLIFIEDBYS7，26AND28，WERERECORDEDBS7537BP，WS7608BP，WS71523BP，WS71682BP，W26324BP，W26283BP，W26224BP，W26175BPANDW28365BPTHECLUSTERANALYSISOFTHETOTALTWENTYTHREESAMPLESWASPERFORMEDWITH

簡(jiǎn)介：弋7．14,5267分類咎UDC四門L農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文密級(jí)學(xué)號(hào)豎至QQ堡QQ魚玉米C型細(xì)胞質(zhì)雄性不育的分子生物學(xué)研究許珂指導(dǎo)教師姓名榮廷昭哲怒菊院士四川農(nóng)業(yè)大學(xué)教授四川農(nóng)業(yè)大學(xué)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別盟±’P業(yè)名稱縫塑塑絲離拙論文提交日期2鯉2笙12目論文答辯日期2QQ2生12目學(xué)位授予單位和日期四刪叁羔￡叁堂．生旦旦答辯委員會(huì)主席評(píng)閱夕。2007年12月PQ川農(nóng)業(yè)人學(xué)博I論義下米C型細(xì)胞質(zhì)雄件小育的分了生物學(xué)研究對(duì)玉米C型細(xì)胞質(zhì)雄性不育系C482及其保持系N482苗期葉片線粒體蛋白質(zhì)、單核期和雙核期花藥線粒體蛋白質(zhì)進(jìn)行了分離，經(jīng)過考馬斯亮藍(lán)染色，得到了重復(fù)性較好的雙向電泳圖譜。PDQUEST軟件分別在苗期、單核期和雙核期的雙向電泳圖譜上可識(shí)別約280、260、220個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)，將其中23個(gè)重復(fù)性比較好且差異表達(dá)在兩倍以上的蛋白質(zhì)點(diǎn)采用基質(zhì)輔助激光解析分離飛行時(shí)間質(zhì)譜進(jìn)行了肽指紋圖譜分析，然后用MASCOT軟件對(duì)NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)搜索，其中7個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)得到了鑒定。這7個(gè)蛋白質(zhì)分別是FI．ATP合成酶、ATP合成酶、磷脂酰肌醇．3激酶、蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶、谷氨酸脫氫酶和電壓依賴陰離子通道蛋白2個(gè)點(diǎn)。它們分別參與ATP的合成、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、新生肽段的折疊、氮代謝和線粒體外膜的通透性等?？傊?，本文利用AFLP和雙向電泳技術(shù)分別對(duì)玉米線粒體DNA和線粒體蛋白質(zhì)進(jìn)行了分析，為闡明玉米C型細(xì)胞質(zhì)雄性不育的分子機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞玉米；細(xì)胞質(zhì)雄性不育；線粒體DNA；AFLP；線粒體蛋白質(zhì)雙向電泳

簡(jiǎn)介：東北林業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文長(zhǎng)白鳶尾生殖生物學(xué)研究姓名張荻申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)園林植物與觀賞園藝指導(dǎo)教師卓麗環(huán)王玲20070601ABSTRACTTHISPAPERSTUDIESPOLLENVIABILITYPOLLINATIONCAPABILITYANDEMBRYOGCNESISOFIRISMANDSHURICABYMEANSOFINDOOREXPERIMENT，OUTDOOROBSERVINGANDPARAFFINWAXTHEMAINRESULTALEASFOLLOWS1THEPOLLENVIABILITYBECOMEGRADUALLYFRAGILEWITHTHETIMEPROLONGING；THEPOLLENWHICHINDARKNESSANDSTORESINREFRIGERATORTHATTHETEMPERATUREASLOWAS4DEGREECENTIGRADE，STILLCOULDMAINTAINMORETHAN30PERCENTVIABILITYWITHIN24HOUMTHEFLOWERINGOFIRISMANDSHURICAISLARGELYINFLUENCEDBYCLIMATICFACTORS2IRISMANDSHURICACOULDBEARFRUITSARTIFICIALLYINOWNFLOWERSANDTHERATEOFBEARINGFRUITISHIGILER；THEEFFECTSOFCROSSPOLLINATIONWEREWELL；THEBESTTIMEFORPOLLINATIONWAS830INTHEMORNING；THERATEOFBEARINGFRUITBYNATURALPOLLINATIONISALSOHI【GHERTHEFLOWERINGPERIODIS20DAYS，SINGLEFLOWERLASTS8HOURS3CYTOKINESISINTHEMICROSPOROCYTEMEIOSISWASOFTHECONTINUOUSTYPEMICROSPORETETRADSWERETETRAHEDRALMATUREPOLLENGRAINSWERE2CELLED4THEOVARYWASTHREELOCULARAXIALPLACENTAOVULESWEREANATROPOUS，BITEGMINOUSANDERASSINUCELLATETHEMEIOSISOFMEGASPOREMOTHEREELLALENORMALLYTHEMEGASPORETETRADISLINEALBUTONLYTHEMEGASPORENEARTHECHALAZALENDREMAINTHEFORMATIONOFEMBRYOSACISPOLYGONUMTYPE5THEMATUREPERIODOFMALEGAMETOPHYTEALEEARLIERTHANFEMALEGAMETOPHYTE6AFTERARTIFICIALPOLLINATION24HOU墻，POFIENTUBEGETINTOONEOFSYNERGIDSANDOCCURSFERTILIZATIONPHENOMENONDOUBLEFERTILIZATIONISTHETYPEOFTHEPREMITOTICGAMETOGAMY仍THEDURATIONOFZYGOTEDORMANCYWASABOUTTHREEDAYSAFTER46HOURSTHEPRIMARYENDOSPERMNUCLEUSBEGINSDIVIDINGANDTHENFORMS2ENDOSPERMCELLS，ANDTHEDEVELOPMENTOFENDOSPERMISNUCLEARTYPEKEYWORDSIRISMANDSHURICA；POLLENVIABILITY；POLLINATIONCAPABILITY；EMBRYOLOGYN

簡(jiǎn)介：中英文摘要不同氮效率水稻品種增硝營(yíng)養(yǎng)的生理與分子生物學(xué)機(jī)制摘要水稻是我國(guó)最重要的糧食作物，其種植面積和糧食產(chǎn)量為世界糧食種植面積扣產(chǎn)量的228％和369％，稻谷產(chǎn)量占中國(guó)糧食總產(chǎn)的437％傳統(tǒng)條件下，水稻都是在淹水條件下生長(zhǎng)，但水資源短缺已成全球面，J盞的危機(jī)，我國(guó)農(nóng)業(yè)用水占總用水量的80％，而水稻用水占農(nóng)業(yè)用水的70％左右。調(diào)整種植業(yè)結(jié)構(gòu)，壓縮耗水較多的水稻栽培面積，推廣節(jié)水灌溉是緩解水資源緊缺的有效途徑從營(yíng)養(yǎng)學(xué)意義上講，NH和NO，‘是植物生長(zhǎng)過程中主要的兩種礦質(zhì)氮源淹水條件下硝化作用被強(qiáng)烈抑制，使土壤中的NM濃度大大增加，NH成為水稻田土壤N的主要存在形態(tài)，因此前人對(duì)水稻N營(yíng)養(yǎng)的研究主要側(cè)重在NH營(yíng)養(yǎng)而忽略了對(duì)NO，一營(yíng)養(yǎng)的研究但我國(guó)目前逐漸興起的水稻節(jié)水栽培技術(shù)使水稻根系的通氣條件有了很大的改善，在較好的通氣條件下，肥料N和土壤有機(jī)N礦化釋放出的NH易被氧化成N0，一，在這種情況下，水稻則完全以硝營(yíng)養(yǎng)為主而且值得注意的是，水稻根系能分泌O，這些0能被土壤硝化微生物利用，從而將NH氧化成NO，一，在根表形成的NO，一立即被水稻吸收，因而通常從水稻土壤中采集的土樣中較難測(cè)到NO，’或數(shù)量極微，但實(shí)際情況下，即便是完全淹水，水稻根系也是處于銨，硝混合營(yíng)養(yǎng)中本論文在水培條件下研究了不同氮效率水稻的差異，從中篩選出對(duì)增硝營(yíng)養(yǎng)響應(yīng)差異大且氮效率差異大的水稻基因型；在此基礎(chǔ)上研究不同氮效率基因型水稻對(duì)NO，一的吸收和生理利用過程，闡明水稻增硝營(yíng)養(yǎng)的生理機(jī)制；豐富水稻氮營(yíng)養(yǎng)理論，提出氮效率與增硝營(yíng)養(yǎng)之間的關(guān)系，為氮高效水稻品種的選育提供理論依據(jù)水培試驗(yàn)包括以后4部分在南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江浦試驗(yàn)站在兩個(gè)氮水平O爭(zhēng)180KGHA。下進(jìn)行了的氮效率基因型評(píng)價(jià)，從中選出作為以后的供試材料；2003年研究了在不同銨硝配比條件下，本深題組從177個(gè)粳稻品種中篩選的8個(gè)氮效率差異較大的水稻基因型的生長(zhǎng)情況，從中篩選出對(duì)增硝營(yíng)養(yǎng)響應(yīng)差異較大的品種作為以后的供試材料；2004年研究了氮高效水稻品種南光和氮低效水稻品種ELIO在全生育時(shí)期內(nèi)對(duì)增硝營(yíng)養(yǎng)的響應(yīng)情況；200S年采用水培試驗(yàn)研究了兩個(gè)品種苗期根系生長(zhǎng)對(duì)增硝營(yíng)養(yǎng)的生理響應(yīng)，同時(shí)采用”N示蹤法研究了一個(gè)氮高效水稻南光和一個(gè)氮低效水稻ELL0在生育前期吸收NH和NO，’的動(dòng)態(tài)變化；2006年采用”N示蹤法和定量PCR，研究了氮高效水稻南光和氮低效水稻ELIO在苗期對(duì)NM吸收動(dòng)力學(xué)參數(shù)對(duì)增硝營(yíng)養(yǎng)的響應(yīng)及增硝營(yíng)養(yǎng)對(duì)銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白出刪刀I卜JI表達(dá)的影響。中英文摘要研究結(jié)果表明，增硝營(yíng)養(yǎng)不僅能夠促進(jìn)南光根系的生長(zhǎng)，也能夠促進(jìn)其地上部的生長(zhǎng)，其根系的生物量和氮積累量在三個(gè)生育時(shí)期平均增加了18％和31％，地上部的生物量和氮積累量在三個(gè)生育時(shí)期平均增加了18％和17％增硝營(yíng)養(yǎng)能夠促進(jìn)南光對(duì)15N鞏的吸收效率，但對(duì)ELIO的吸”N吼效率沒有顯著影響，南光的根系和地上部在三個(gè)生育時(shí)期的吸”NM‘效率平均增加了57％和46％兩個(gè)不同氮效率水稻品種均能夠吸收大量的NO，‘，其最大吸收量達(dá)到了吸氮總量的44％，且其吸N0，。量在分蘗盛期最高，苗期次之，分蘗盛期最少。5用15N標(biāo)記”NH的方法研究了氮高效水稻品種南光和氮低效水稻品種ELL0苗期對(duì)”NH的吸收動(dòng)力學(xué)特征及增硝營(yíng)養(yǎng)對(duì)其吸收特征的影響。研究結(jié)果表明增硝營(yíng)養(yǎng)可以促進(jìn)南光對(duì)”NH的吸收速率，進(jìn)而提高其氮素利用效率，但對(duì)ELL0的”NH的吸收速率沒有影響NO，一的存在促進(jìn)了南光對(duì)NH的吸收，增加水稻吸收NH。的V。值增加了141％，而對(duì)其L值影響不大增加了298％，說明NO，一對(duì)NH吸收的影響主要在于影響NH載體的運(yùn)轉(zhuǎn)速率而非吸收位點(diǎn)與NH之間的親和性6采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)。在轉(zhuǎn)錄水平上的定量分析了在純銨和增硝營(yíng)養(yǎng)條件下，氮高效水稻南光和氮低效水稻BLIO根系和葉片中的表達(dá)情況研究結(jié)果表明，OS棚I1往南芄和ELW的根條和葉琺寺確表達(dá)量垮較甍，而0S心豫2和OSA塒I；3在南先和ELL0的根系的表達(dá)量也較高，但在葉片的表達(dá)量均較低增硝營(yíng)養(yǎng)能夠促進(jìn)以JILF7，IJ、弧D孵07爭(zhēng)強(qiáng)4膨R，；J在南光和ELL0根系中的表達(dá)，同時(shí)促進(jìn)了以朋秘在南光和ELIO葉片中的表達(dá)，但抑止了匆D櫻蠢，在南光爭(zhēng)ELIO葉片的表達(dá)西A朋DJ在南光葉片的表達(dá)幾乎沒有變化，但在ELIO葉片的表達(dá)量的降幅達(dá)到了所有基因總表達(dá)量的103％總的來說，在增硝營(yíng)養(yǎng)條件下，口，4以H在南光的表達(dá)提高了145JL，而在ELIO中僅提高了O29JI這兩個(gè)品種對(duì)增硝響應(yīng)的不同主要是由于西刪刀JJ在葉片的表達(dá)對(duì)增硝營(yíng)養(yǎng)的響應(yīng)不同關(guān)鍵詞增硝營(yíng)養(yǎng)；氮效率；水稻；氮素吸收；根系；NH吸收；銨轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Ⅲ

簡(jiǎn)介：分類號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)碩士學(xué)位論文減毒鼠傷寒沙門菌CRPCYAASDSL1344缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性學(xué)位申請(qǐng)人人胡寧指導(dǎo)教師師程相朝學(xué)科專業(yè)業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)學(xué)位類別別農(nóng)學(xué)20142014年5月摘要論文題目論文題目減毒鼠傷寒沙門菌Δ減毒鼠傷寒沙門菌ΔCRPCRPΔCYACYAΔASDSL1344ASDSL1344缺失缺失株的構(gòu)建及其生物學(xué)株的構(gòu)建及其生物學(xué)特性特性專業(yè)業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)研究生生胡寧胡寧指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師程相朝教授程相朝教授摘要沙門菌是一種胞內(nèi)菌，既可以作為原核質(zhì)粒的表達(dá)載體，也可以作為真核質(zhì)粒的表達(dá)載體。其不僅具有制備簡(jiǎn)單、免疫方便、有較強(qiáng)的免疫原性等優(yōu)勢(shì)，而且其誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)更強(qiáng)更持久。鼠傷寒沙門菌作為沙門菌載體的研究應(yīng)用比較廣泛，但以其為載體攜帶外源抗原表達(dá)外源基因時(shí)，由于生存壓力，其所攜帶的外源基因可能不能穩(wěn)定遺傳。最近研究的一種無抗性的宿主載體平衡致死系統(tǒng)為高效表達(dá)外源基因且無抗性標(biāo)記提供了解決途徑。ASDASPARTICSEMIALDEHYDEDEHYDROGENASE基因編碼天冬氨酸Β半乳糖脫氫酶，該酶是合成二氨基庚二酸DIAMINOPIMELICACIDDAP的必需酶，在無外源DAP條件下，含ASD基因的載體會(huì)與缺失ASD基因的減毒菌株互補(bǔ)結(jié)合，否則，減毒菌株會(huì)溶菌死亡。研究?jī)?nèi)容主要包括1鼠傷寒沙門菌CRPCYAASDSL1344缺失株的構(gòu)建及篩選以含有重組自殺性質(zhì)粒Χ7213PREΔASD為供體菌，CRPCYASL1344為受體菌，利用重組自殺性質(zhì)粒介導(dǎo)細(xì)菌基因等位交換的作用，兩步法篩選出蔗糖抗性（SUCR）及DAP依賴菌落，并通過PCR及測(cè)序鑒定，確定構(gòu)建成功。2缺失株ΔCRPΔCYAASDSL1344與其它菌株生物學(xué)特性的比較研究缺失株ΔCRPΔCYAASDSL1344的血清型與親本株CRPCYASL1344及強(qiáng)毒株SL1344相同，均為14512I12；缺失株ΔCRPΔCYAASDSL1344能穩(wěn)定遺傳缺失后的ASD基因；缺失株ΔCRPΔCYAASDSL1344的生化特性及生長(zhǎng)速度與強(qiáng)毒株SL1344相比有很大差異，但與親本株CRPCYASL1344基本保持一致，缺失株ΔCRPΔCYAASDSL1344失去了利用麥芽糖、乳糖、山梨醇等碳源的能力，也不能分解H2S、半乳糖和鼠李糖，但仍保留了利用葡萄糖的能力，缺失株ΔCRPΔCYAASDSL1344的生長(zhǎng)速度比強(qiáng)毒株更加緩慢，但與親本株CRPCYASL1344相差不大；1日齡雛雞攻毒試驗(yàn)表明ΔCRPΔCYAASDSL1344互補(bǔ)攜帶ASD基因的PYA3493質(zhì)粒后，重組菌株ΔCRPΔCYAASDSL1344PYA3493毒力較強(qiáng)毒株SL1344降低了至少105倍，與親本株ΔCRPΔCYASL1344相比毒力僅相差

簡(jiǎn)介：分類號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)碩士學(xué)位論文副豬嗜血桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究學(xué)位申請(qǐng)人王樂指導(dǎo)教師鄧雯教授趙戰(zhàn)勤副教授學(xué)科專業(yè)業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)學(xué)位類別別農(nóng)學(xué)2014年05月摘要論文題目論文題目副豬嗜血桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究副豬嗜血桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究專業(yè)業(yè)基礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)礎(chǔ)獸醫(yī)學(xué)研究生生王樂王樂指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師鄧雯鄧雯教授教授趙戰(zhàn)勤趙戰(zhàn)勤副教授教授摘要近年來，副豬嗜血桿菌病在我國(guó)廣泛流行并致病。本研究采用病原菌的形態(tài)學(xué)觀察、生化鑒定和PCR鑒定，從我國(guó)河南等省份有疑似副豬嗜血桿菌臨床癥狀的137個(gè)病例中分離鑒定出57株副豬嗜血桿菌。不同組織部位的分離結(jié)果表明，副豬嗜血桿菌在肺臟分離率最高，達(dá)到397；其次是心血（279）、腦（174）、關(guān)節(jié)（143）、淋巴結(jié)（88）；脾臟的分離率最低（53）。57株副豬嗜血桿菌的KRG瓊脂擴(kuò)散血清分型結(jié)果表明，在我國(guó)河南及其周邊省份以血清4型（13株，占228）和5型（12株，占211）最為流行，其次為12型（6株，占105）、13型（6株，占105）和14型（5株，占88），而1型（2株）、2型（1株）、6型（1株）、10型（1株）均較少。另外有10株（175）的菌株不能進(jìn)行分型。小鼠毒力試驗(yàn)結(jié)果表明，毒力最強(qiáng)的是血清12型和14型，其次是5型和4型，毒力最弱的是13型。本研究將篩選的副豬嗜血桿菌5種血清型中毒力最強(qiáng)的菌株，包括血清4型4株、5型4株、12型3株、13型2株和14型3株，共16株細(xì)菌作為研究對(duì)象進(jìn)行進(jìn)一步研究。對(duì)前期篩選的16株副豬嗜血桿菌進(jìn)一步進(jìn)行了豚鼠毒力試驗(yàn)，結(jié)果表明16株副豬嗜血桿菌候選疫苗菌株的豚鼠毒力試驗(yàn)結(jié)果與小鼠毒力試驗(yàn)結(jié)果基本一致。但攻毒豚鼠具有更長(zhǎng)的發(fā)病死亡周期，且具有與豬相似的病理變化，更適合作為豬的替代實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。不同感染劑量對(duì)仔豬的毒力試驗(yàn)結(jié)果表明，同一血清型的不同兩株細(xì)菌的毒力相近，對(duì)仔豬的致死劑量分別為S4S1株，68109CFU；S4S2株，72109CFU；S5S2株，44109CFU；S5S3株，37109CFU；S12S2株，39109CFU；S12S3株，30109CFU。生長(zhǎng)曲線測(cè)定結(jié)果顯示，副豬嗜血桿菌血清4型S4S1株，血清5型S5S3株和血清12型S12S3株在液體培養(yǎng)基中菌量分別在第10H，12H，14H時(shí)達(dá)到峰值，分別為25109CFUML，16109CFUML和11109CFUML。對(duì)3株副豬嗜血桿菌16SRRNA基因PCR產(chǎn)物進(jìn)行序列測(cè)定，發(fā)現(xiàn)與3株候選疫苗菌株16SRRNA基因序列同源性最高的5個(gè)序列均為NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)已發(fā)布的副豬嗜血桿菌16SRRNA基因序列，其同源性均在99以上。在不同條件下保存時(shí)間的測(cè)定試驗(yàn)中，在TSA和TSB培養(yǎng)基中置2–8℃的保存期確定為10D，在含有30甘油的TSB菌液中置20℃的保存期確定為12個(gè)月，置80℃的保存期確定為3年，在真空冷凍干燥的脫脂牛奶（15）中置20℃和80℃

簡(jiǎn)介：南京應(yīng)案戈蓬1215962分類號(hào)簍曼學(xué)號(hào)呈QQ壘2QZQQZ博士學(xué)位論文雞骨保護(hù)素CHOPG基因的克隆、表達(dá)及生物學(xué)活性研究姚靜研究方向畜禽置髓生物堂摘要層掃描顯示OPG占菌體總蛋白的119％，WESTERNBLOTTING分析顯示，表達(dá)的OPG蛋白具有良好的免疫反應(yīng)性以經(jīng)鎳離子親和層析柱純化的OPG蛋白免疫新西蘭白兔，制備抗0PG多克隆抗體，ELISA結(jié)果顯示抗體效價(jià)達(dá)到110240WESTERN印跡結(jié)果表明，該抗體可以和雞OPG酵母表達(dá)產(chǎn)物特異性結(jié)合5設(shè)計(jì)另一對(duì)引物用于亞克隆雞OPG成熟蛋白編碼基因不合信號(hào)肽，然后構(gòu)建雞OPG真核表達(dá)載體PPICZAACHOPGM’，以電穿孔法轉(zhuǎn)化酵母X33，用ZEOCIN平板篩選重組子，經(jīng)甲醇誘導(dǎo)表達(dá)后，SDSPAGE和免疫印跡分析表達(dá)產(chǎn)物，由于糖基化不同，表達(dá)產(chǎn)物有兩種，其相對(duì)分子量分別為43KD和53KD，表達(dá)量約為200MG／L，經(jīng)WESTERNEF跡驗(yàn)證，有較好的抗原性表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)處理后加入到體外培養(yǎng)的雞胚破骨細(xì)胞上，能顯著抑制成熟破骨細(xì)胞的骨吸收活性，使骨吸收陷窩個(gè)數(shù)和面積均減少，證實(shí)表達(dá)的OPG蛋白具有抑制成熟破骨細(xì)胞骨吸收活性的功能6100羽56周齡ISA蛋雞分為5組，組為對(duì)照組，B，C，D，B組每隔3D肌肉注射劑量分別為100／ZG、200／G，300口G、400／TG的雞骨保護(hù)素酵母表達(dá)凍干產(chǎn)物水溶物每周采血測(cè)血鈣，血磷，堿性磷酸酶、抗酒石酸酸性磷酸酶和骨鈣素每天記錄產(chǎn)蛋量、破殼蛋數(shù)，測(cè)定蛋殼強(qiáng)度和厚度最后測(cè)定骨生物力學(xué)性能和骨密度結(jié)果表明B、C兩組總平均產(chǎn)蛋率顯著高于對(duì)照組和其它實(shí)驗(yàn)組與A組相比，用藥組總平均軟破殼蛋率下降，其中B、C兩組差異顯著PO05各組蛋殼厚度和強(qiáng)度無明顯差異；用藥組血鈣顯著低于對(duì)照組，血磷無明顯差異；B，C、D組堿性磷酸酶活性顯著高于對(duì)照組只005；C，D兩組骨鈣素水平顯著高于對(duì)照組尺005；E組抗酒石酸酸性磷酸酶活性顯著低于對(duì)照組P005；C組脛骨生物力學(xué)性能和放射骨密度顯著高于對(duì)照組。結(jié)論適當(dāng)劑量約200BTG的外源OPG蛋白可以改善骨代謝，提高產(chǎn)蛋量關(guān)鍵詞ISA蛋雞；骨保護(hù)素；克??；表達(dá)；生物活性；破骨細(xì)胞；骨質(zhì)疏松V

簡(jiǎn)介：上海水產(chǎn)大學(xué)博士學(xué)位論文熱帶水域大眼金槍魚漁業(yè)生物學(xué)研究姓名朱國(guó)平申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)捕撈學(xué)指導(dǎo)教師周應(yīng)祺20070610ANOVA、KS檢驗(yàn)等非參數(shù)檢驗(yàn)，比較了三個(gè)調(diào)查海域大眼金槍魚的生長(zhǎng)與死亡。結(jié)果表明熱帶大西洋中部、熱帶印度洋中西部和熱帶太平洋中東部水域大眼金槍魚體長(zhǎng)體重關(guān)系不存在顯著性差異。三個(gè)調(diào)查海域大眼金槍魚呈現(xiàn)不同的生長(zhǎng)模式，熟帶大西洋中部大眼金槍魚呈近似的等速生長(zhǎng)63，而熱帶印度洋中西部和熱帶太平洋中東部大眼金槍魚則呈異速生長(zhǎng)6≠3。熱帶大西洋中部、熱帶印度洋中西部和熱帶太平洋中東部水域大跟金槍魚的極限叉長(zhǎng)分別為217．88、212．63和207．38CM，生長(zhǎng)率分別為O．14、O．18和0．23YR“1，總死亡率分別為O．59、0．63和0．58，自然死亡率分別為0．29、0．34和0．41，捕撈死亡率分比為0．30、0，29和O．18，開發(fā)率分別為0．23、0．22和O．14，TO分別為．1．16、．O．90和一0．70YR。熱帶水域大眼金槍魚極限叉長(zhǎng)自西向東呈減小趨勢(shì)，而生長(zhǎng)率則由西向東呈增加趨勢(shì)。在大眼金槍魚繁殖生物學(xué)方面，本研究從性比、性腺指數(shù)、繁殖季節(jié)性、首次性成熟叉長(zhǎng)等四個(gè)角度，利用KS檢驗(yàn)、KRUSKAL．WALLIS檢驗(yàn)、最大似然估計(jì)、ANOVA等數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法分析了大眼金槍魚的繁殖生物學(xué)。結(jié)果表明1除熱帶大西洋中部12月和熱帶印度洋中西部4月外，三個(gè)調(diào)查水域大眼金槍魚各月性比均大于0．5，即雄性個(gè)體占優(yōu)。三個(gè)調(diào)查水域相同月份大眼金槍魚性比月變化差異不顯著。2除個(gè)別叉長(zhǎng)組外，熱帶水域各叉長(zhǎng)組大眼金槍魚性比均大于O．5。當(dāng)叉長(zhǎng)處于某個(gè)范圍86．190ERA熱帶大西洋；81～170EM熱帶印度洋中西部和86,195EM熱帶太平洋中東部時(shí)，性比隨叉長(zhǎng)變化較為穩(wěn)定，基本維持在0．50．7之間；當(dāng)叉長(zhǎng)大于某一尺度時(shí)，性比開始增大，到某一叉長(zhǎng)后，性比為L(zhǎng)。三個(gè)調(diào)查水域大眼金槍魚隨叉長(zhǎng)的變化并不存在顯著性差異。3三個(gè)調(diào)查海域大眼金槍魚應(yīng)為周年產(chǎn)卵，且3～8月份應(yīng)該為熱帶水域大眼金槍魚的產(chǎn)卵高峰期。4從統(tǒng)計(jì)角度上看，熱帶大西洋中部和熱帶太平洋中東部水域大眼金槍魚繁殖季節(jié)周期性并不明顯。而熱帶印度洋中西部水域大眼金槍魚則具有明顯的繁殖季節(jié)周期性。5熱帶大西洋中部、熱帶印度洋中西部和熱帶太平洋中東部水域大眼金槍魚首次性成熟叉長(zhǎng)LJO分別為122．43EM、118，96CM和117．69CM，而成熟率6分別為0．078CM“‘、0．077CRN“和0．085EM“1。在大眼金槍魚食性方面，本研究從食物組成及其隨月份和叉長(zhǎng)的變化、空胃率、飽滿指數(shù)等方面，利用KS檢驗(yàn)、KRUSKAL．WALLIS檢驗(yàn)和ANOVA等數(shù)理統(tǒng)計(jì)方法分析了太眼金槍魚的攝食。結(jié)果表明1帆蜥、鮐魚、烏魴、蝦和魷魚為熱帶大西洋中部、熱帶印度洋中西部和N

簡(jiǎn)介：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文不同葡萄砧穗組合根系構(gòu)型及其生物學(xué)效應(yīng)姓名王曉芳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)果樹學(xué)指導(dǎo)教師翟衡20070612關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對(duì)在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留和按要求向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名泓導(dǎo)師簽名日期

簡(jiǎn)介：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文設(shè)施杏生長(zhǎng)發(fā)育特性及授粉生物學(xué)研究姓名李玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)果樹學(xué)指導(dǎo)教師高東升20071017關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對(duì)在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均在文中明確說明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留和按要求向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文儲(chǔ)躲如令導(dǎo)師簽名壟壟鹽日期竺’G

簡(jiǎn)介：分類號(hào)S8148單位代碼10364密級(jí)公開學(xué)號(hào)11720673安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文豬不完全重編程誘導(dǎo)多能干細(xì)胞豬不完全重編程誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的獲取及獲取及生物學(xué)特性生物學(xué)特性GENERATIONACTERIZATIONOFPCINEPARTIALLYREPROGRAMMEDINDUCEDPLURIPOTENTSTEMCELLS研究生魏超指導(dǎo)教師張運(yùn)海教授合作指導(dǎo)教師章孝榮教授申請(qǐng)學(xué)位門類級(jí)別農(nóng)學(xué)碩士專業(yè)名稱動(dòng)物遺傳育種與繁殖研究方向動(dòng)物胚胎工程所在學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院答辯委員會(huì)主席二零一四年六月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名時(shí)間年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名時(shí)間年月日導(dǎo)師簽名時(shí)間年月日

簡(jiǎn)介：摘要水稻不同栽培模式的節(jié)水效應(yīng)、生產(chǎn)力特征及土壤微生物學(xué)性狀研究摘要我國(guó)南方部分地區(qū)的季節(jié)性干旱非常嚴(yán)重，且于旱多發(fā)生在夏、秋季節(jié)，正是農(nóng)作物尤其是水稻生長(zhǎng)的關(guān)鍵需水期，嚴(yán)重影響了作物的正常生長(zhǎng)為減小南方季節(jié)性干旱對(duì)水稻生長(zhǎng)的影響，提高水分利用效率，于20032006年在江西省余江縣進(jìn)行了水稻節(jié)水的田問試驗(yàn)，采用水稻旱作秸稈覆蓋作為主要節(jié)水措施依據(jù)試驗(yàn)所在地區(qū)早，晚雙季稻耕作模式以及降雨量的分配特點(diǎn)早稻生長(zhǎng)季為雨季，晚稻為旱季，建立了稻一稻水旱輪作的新型栽培模式并針對(duì)水稻旱作較之于淹水栽培容易導(dǎo)致地力耗竭的問題，相應(yīng)研究了秸稈覆蓋和免耕對(duì)地力的維持作用鑒定和監(jiān)測(cè)微生物是微生物生態(tài)學(xué)研究的重要內(nèi)容之一，對(duì)土壤微生物群落的定性和定量分析有助于深化我們對(duì)農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)可持續(xù)性的評(píng)價(jià)和認(rèn)知土壤微生物種群的分布和活性主要取決于以下三個(gè)方面A土壤水分及氧化狀況，B有機(jī)質(zhì)的輸入，C土壤結(jié)構(gòu)的變化水稻旱作直接改變了稻田的水分和氧4E_A五原狀態(tài)，并在很大程度上影響了有機(jī)質(zhì)的分解轉(zhuǎn)化以及土壤容重，土壤孔隙等物理性狀，從而對(duì)稻田微生物的分布、數(shù)量和種群結(jié)構(gòu)產(chǎn)生顯著的影響分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用極大的推動(dòng)了環(huán)境微生物的研究進(jìn)展熒光原位雜交FISH和酶聯(lián)原位熒光雜交法CARD。FISM是目前從細(xì)胞水平上分析微生物群落結(jié)構(gòu)的常用分子生態(tài)學(xué)方法，但目前應(yīng)用上述方法對(duì)土壤微生物進(jìn)行檢測(cè)依然存在障礙，主要是細(xì)胞損失、土壤集聚難以分散以及標(biāo)記率低等會(huì)影響結(jié)果的可靠性本研究中我們?cè)诜椒ㄉ厢槍?duì)FISH和CARDFISH在土壤微生物分析中的應(yīng)用進(jìn)行了一些重要改進(jìn)，并應(yīng)用其對(duì)水稻土細(xì)菌，古生茵和甲烷產(chǎn)生菌類群的群落結(jié)構(gòu)和種群數(shù)量進(jìn)行了研究主要結(jié)果如下一水稻不同栽培模式的節(jié)水效應(yīng)該部分試驗(yàn)于2003年和2004年晚稻生長(zhǎng)季內(nèi)進(jìn)行2003年和2004年常規(guī)水作CF處理灌溉水總量分別為19950IN3HA。1和15850M3HA～，而覆蓋旱作NFSM和裸地旱作NFZM的平均灌溉水量分別是7200RLL3HA。和5045M飛A1兩個(gè)生長(zhǎng)季田間滲漏量CF處理為13442M3HA～，NFZM和NFSM相應(yīng)為5510MJHA_1和5424M3HA～與常規(guī)淹水和裸地旱作相比，秸稈覆蓋旱作處理的騰發(fā)量可分別減少33％和63％2003，365％和571％2004水稻旱作條件下，較之于裸地旱作，秸稈覆蓋能顯著增加作物的葉面積、主根長(zhǎng)度、根系干重等指標(biāo)。兩個(gè)生長(zhǎng)季內(nèi)，CF摘要應(yīng)用辣根HRP一寡核苷酸標(biāo)記和酪胺TYRAMIDC增強(qiáng)標(biāo)記信號(hào)的CARDFISH方法對(duì)不同節(jié)水栽培模式下的水稻土細(xì)菌和古生菌分別進(jìn)行了檢測(cè)分析樣品取自常規(guī)水作、裸地旱作和覆蓋旱作三個(gè)不同處理的田間定位試驗(yàn)小區(qū)，分別對(duì)兩個(gè)層次袁層07CMH_壤扣下層714CM土樣進(jìn)行了分析檢測(cè)應(yīng)用CARDFISH在玻片和濾膜上都清晰地觀測(cè)到了細(xì)菌信號(hào)，但總體上利用分于濾膜作為裁體的檢測(cè)效率DAPI％要高于玻片對(duì)相同處理而言，無論用分子濾膜還是玻片進(jìn)行檢測(cè)，表層土壤細(xì)菌臺(tái)臺(tái)密度均顯著高于7CM處土壤細(xì)菌密度在10B這個(gè)數(shù)量級(jí)用兩種方法檢測(cè)到不同處理間表層土壤中細(xì)菌數(shù)量由大到小均依次為NFSMNFZMCF；而在下層土壤中順序?yàn)镹FSMCFNFZM在表層土壤中，旱作處理NRFSM和NFZM的樣品中均檢測(cè)不到古生菌的信號(hào)，而同層次淹水處理中古生菌的密度為266X107CELLS／G干土下層3個(gè)處理地土壤樣品中均檢測(cè)到古生菌的存在，最高密度仍然存在于淹水處理的土壤中，密度為636X107CEIL啦干土3對(duì)甲烷產(chǎn)生菌類群的檢測(cè)應(yīng)用專屬性探針對(duì)淹水處理和裸地旱作的甲烷產(chǎn)生菌類群進(jìn)行了鑒定和計(jì)數(shù)結(jié)果表明，甲烷產(chǎn)生茵各個(gè)類群在底層土壤的數(shù)量顯著高于表層土壤裸地旱作表層土壤中所有專性類群檢測(cè)均未發(fā)現(xiàn)熒光信號(hào)對(duì)冷藏狀態(tài)下4“C淹水處理表層土壤樣品進(jìn)行分析，檢測(cè)到的古生茵數(shù)量為216X107CELL／G干土用MX825探針檢測(cè)到的METTHANOSAETA類群的數(shù)量為L(zhǎng)63X107CEL敬干土；MSL414和MSMX860探針檢測(cè)的METLIANIOSARCINARELATIVES以及METHANIOSARCINACEAE類群的數(shù)量分別為044X107CD垤千土和059XI07CELL／G干土各類群在底層土壤的分布數(shù)量均高于表層。淹水種植處理的土壤從冰箱取出后進(jìn)行加水密閉培養(yǎng)，并在室溫培育48H后測(cè)定時(shí)數(shù)量顯著增加；而裸地旱作土壤培養(yǎng)前后數(shù)量無顯著變化對(duì)全部結(jié)果進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，室溫培育48H和168H后各類群數(shù)量均無顯著變化關(guān)鍵詞水稻節(jié)水栽培；作物生產(chǎn)力；酶聯(lián)原位熒光雜交；細(xì)菌；甲烷產(chǎn)生菌Ⅲ

簡(jiǎn)介：I

簡(jiǎn)介：揚(yáng)州大學(xué)博士學(xué)位論文禽病原性大腸桿菌的生物學(xué)特性及其可能毒力相關(guān)基因的鑒定姓名陳祥申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師焦新安高崧20060501II揚(yáng)州大學(xué)博士學(xué)位論文分離到的大腸桿菌中很少見。與臨床分離株相比，泄殖腔分離株的06、09和0107血清型的出現(xiàn)頻率明顯較高，差異極顯著P0．01。選取不同時(shí)間、地點(diǎn)和I陸診病癥的243個(gè)分離株20個(gè)血清型進(jìn)行致病性試驗(yàn)，以每株107CFU細(xì)菌氣管內(nèi)接種1日齡雞6羽，根據(jù)接種后7天內(nèi)雞的死亡率，確定出高致病株、中等致病株和低致病株分別占受試菌株的78．2％F190／243、18．J％44／243和3．7％9／243，其中，在0I、02和078血清型分離株中，高致病株分別占所試血清型菌株的84．6％11／13、82．4％42／51和87．9％109／124，中等致病株占所試血清型菌株的15．4％2／13、13．7％7／51和113％14／124，低致病株占所試血清型菌株的0％0／13、3．9％2／51和O．8％1／124。結(jié)果顯示在243個(gè)禽源大腸桿菌分離株中的高、中等致病株和01、02和078血清型分離株中的高、中等致病株均在96％以上。2．抑制差減雜交篩選禽病原性大腸桿菌基因組差異片段及其分析采用抑制差減雜交技術(shù)SUPPRESSIONSUBTRACTIVEHYBRIDIZATION，SSL{對(duì)禽病原性大腸桿菌高致病株E037血清型078與非致病菌株K一12MGL655以及同02血清型高致病菌株E058與低致病菌株E526進(jìn)行基因組差異片段克隆與分析。從E037株中共檢出17個(gè)特異性差異片段，其大小為180一1519BP，GC含量為31．8％一58．5％，E058株中共檢出32個(gè)特異性差異片段，其大小為216．120LBP，GC含量為34．6％．56．1％。經(jīng)同源分析，這些序列可分為4類質(zhì)粒相關(guān)序列、噬菌體相關(guān)序列、已知功能序列、未知功能序列。這些差異片段包含許多重要的大腸桿菌毒力相關(guān)因子，如大腸桿菌素、氣桿菌素AEMBACTIN受體、血清耐受因子、鐵系統(tǒng)IMSYSTEM等。從禽病原性大腸桿菌中獲得的49個(gè)片段中，有14個(gè)片段與其它微生物基因組同源性較高。結(jié)果表明，大腸桿菌高致病菌株與低致病菌株或非致病菌株基因組問存在較多差異基因，其中包括毒力基因、毒力相關(guān)基因、代謝以及噬菌體等基因成分。3．選擇性捕獲禽病原性大腸桿菌體內(nèi)轉(zhuǎn)錄序列采用選擇性捕獲轉(zhuǎn)錄序列SELECTIVECAPTUREOFTRANSCRIBEDSEQUENCES，SCOTS方法鑒定禽病原性大腸桿菌E037株血清型078在感染SPF雞過程中的細(xì)菌表達(dá)基因。通過總RNA分離、CDNAS合成、PCR擴(kuò)增、SCOTS對(duì)CDNAS選擇和致病性特異NONE．COLIK．12轉(zhuǎn)錄序列的富集，致病性特異的CDNAS被分離鑒定，共獲得31個(gè)轉(zhuǎn)錄序列命名為AEC，其中分別有2、L、4、14、2和8個(gè)AEC序列