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    • 簡介:1分子生物學檢測技術分子生物學檢測技術分子生物學診斷技術是現(xiàn)代分子生物學與分子遺傳學取得巨大進步的結晶,是在人們對基因的結構以及基因的表達和調控等生命本質問題的認識日益加深的基礎上產(chǎn)生的。近年來,分子生物學診斷技術的方法學研究取得了很大進展,先后建立了限制性內(nèi)切酶酶譜分析、核酸分子雜交、限制性片段長度多態(tài)性連鎖分析等方法。1985年由美國CETUS公司人類遺傳學研究室MULLIS等創(chuàng)立并隨后迅速發(fā)展起來的DNA體外擴增技術(POLYMERASECHAINREACTION,PCR),以及90年代發(fā)展起來的DNA芯片技術(DNACHIP),又將分子生物學診斷技術提高到一個嶄新的階段。一、一、核酸分子雜交核酸分子雜交(一)概述具有一定互補序列的核苷酸單鏈在液相或固相中按堿基互補配對原則締合成異質雙鏈的過程叫核酸分子雜交。應用該技術可對特定DNA或RNA序列進行定性或定量檢測。到目前為止,分子雜交技術在基因診斷中仍占重要地位,它按反應支持物可分為固相雜交和液相雜交兩種,前者應用較廣,有SOUTHERN印跡雜交、點雜交、夾心雜交(三明治雜交)、原位雜交和寡核苷酸探針技術等。核酸分子雜交主要涉及兩個方面待測的DNA或RNA,以及用于檢測的DNA或RNA探針。探針標記的好壞決定檢測的敏感性。1、SOUTHERN印跡雜交是最經(jīng)典和應用最廣泛的雜交方法。根據(jù)基因探針與待測DNA限制酶酶解片段雜交的帶譜,可以直接確定宿主基因的缺陷所在或病原體的存在狀態(tài)。3光檢測核酸的含量。BDNA技術是目前核酸直接量化檢測技術中靈敏度最高的方法之一。但該方法成本較高,不利于其普及應用。5、原位雜交直接在組織切片或細胞涂片上進行雜交反應。該技術可檢出細胞中單拷貝MRNA,估算病毒在宿主細胞中復制和轉錄的程度,對于病毒感染(特別是具有長潛伏期的病毒感染)和其它退行性疾病的診斷很有用。6、液相雜交液相雜交酶免疫法量化檢測核酸擴增產(chǎn)物這種方法同固相雜交量化檢測核酸擴增產(chǎn)物原理大致相同,只是將反應體系換為液相環(huán)境。應用液相雜交量化檢測維生素D結合蛋白基因,在PCR擴增時通過摻入法使產(chǎn)物上掛有地高辛分子,再通過液相雜交與標記有生物素的探針結合后,被包被有鏈親和素的酶標微孔板捕獲,利用辣根酶標記的地高辛抗體使酶反應底物OPD或TMB顯色。據(jù)報道,核酸擴增產(chǎn)物與特異性探針在液相中的雜交效率要高于在酶標微孔板上的結合,液相雜交的靈敏度通常是固相雜交的10~20倍,可以檢測到PG水平。二、二、聚合酶鏈反應(聚合酶鏈反應(PCR)PCR是近年來發(fā)展起來的一種快速的DNA片段擴增技術,它通過分別與雙鏈目的DNA序列兩個3’端互補的寡核苷酸引物,由TAQDNA聚合酶從5’到3’進行一系列DNA聚合反應,擴增出所需要的目的DNA。由于每個循環(huán)中合成的引物延伸產(chǎn)物可作為下一循環(huán)中的模板,因而每次循環(huán)中靶DNA的拷貝數(shù)幾乎呈幾何級數(shù)增長,因此,20次PCR循環(huán)將產(chǎn)生約一百萬倍(220)的擴增產(chǎn)物。這種1985年由KARYMULLIS建立的方法最早在美國CETUS公司人類遺傳學
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    • 簡介:第1頁共3頁分子生物學分子生物學B基因組與基因、基因組與基因、DNADNA復制測驗題復制測驗題學號學號專業(yè)專業(yè)班級班級姓名姓名一、名詞解釋(每小題一、名詞解釋(每小題3分,共分,共30分)分)1、復制子復制子2、單復制子、單復制子3、多復制子、多復制子4、端粒端粒是真核生物染色體的兩個末端序列,與特定的蛋白質形成復合物。、端粒端粒是真核生物染色體的兩個末端序列,與特定的蛋白質形成復合物。5、端粒酶是由、端粒酶是由RNARNA和蛋白體組成的復合體,屬專一的依賴和蛋白體組成的復合體,屬專一的依賴RNARNA的逆轉錄酶,能以自身的逆轉錄酶,能以自身RNARNA為模板反轉錄合成端粒為模板反轉錄合成端粒DNADNA序列,以補償細胞分裂時染色體末端的縮短,保持端粒長度序列,以補償細胞分裂時染色體末端的縮短,保持端粒長度的穩(wěn)定,恢復端粒的功能。的穩(wěn)定,恢復端粒的功能。6、滾環(huán)式復制、滾環(huán)式復制DNA聚合酶III以3OH為引物,以負鏈為模板,從3OH端逐步增添脫氧核苷酸,隨著復制的進行,5‘端長度即不斷增加。這一過程中,單鏈尾巴的延伸伴隨著雙鏈DNA的繞軸滾動,故稱為滾環(huán)式復制。7、基因是編碼一條多肽鏈或功能、基因是編碼一條多肽鏈或功能RNARNA所必需的全部核苷酸序列。所必需的全部核苷酸序列。8、基因組是指某一特定生物單倍體染色體的數(shù)目及其所攜帶的全部基因。、基因組是指某一特定生物單倍體染色體的數(shù)目及其所攜帶的全部基因。9、假基因沒有功能的基因稱為假基因。、假基因沒有功能的基因稱為假基因。第3頁共3頁5、真核生物和原核生物復制起點在數(shù)量上有什么不同在復制完成之前,它們復制啟動的、真核生物和原核生物復制起點在數(shù)量上有什么不同在復制完成之前,它們復制啟動的次數(shù)又有什么差異(次數(shù)又有什么差異(5分)分)6、什么叫拓撲異構酶拓撲異構酶、什么叫拓撲異構酶拓撲異構酶Ⅰ和拓撲異構酶和拓撲異構酶Ⅱ各自的特點是什么旋轉酶是屬于哪各自的特點是什么旋轉酶是屬于哪一類(一類(1010分)分)7、多數(shù)生物的遺傳物質是、多數(shù)生物的遺傳物質是DNADNA,請問,請問DNADNA的復制方式有哪些(的復制方式有哪些(1010分)分)
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      上傳時間:2024-03-16
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    • 簡介:第1頁共3頁2014201520142015學年第一學期學年第一學期分子生物學分子生物學B基因組與基因、基因組與基因、DNADNA復制測驗題復制測驗題學號學號專業(yè)專業(yè)班級班級姓名姓名一、名詞解釋(每小題一、名詞解釋(每小題3分,共分,共30分)分)1、復制子復制子2、單復制子、單復制子3、多復制子、多復制子4、端粒端粒是真核生物染色體的兩個末端序列,與特定的蛋白質形成復合物。、端粒端粒是真核生物染色體的兩個末端序列,與特定的蛋白質形成復合物。5、端粒酶是由、端粒酶是由RNARNA和蛋白體組成的復合體,屬專一的依賴和蛋白體組成的復合體,屬專一的依賴RNARNA的逆轉錄酶,能以自身的逆轉錄酶,能以自身RNARNA為模板反轉錄合成端粒為模板反轉錄合成端粒DNADNA序列,以補償細胞分裂時染色體末端的縮短,保持端粒長度序列,以補償細胞分裂時染色體末端的縮短,保持端粒長度的穩(wěn)定,恢復端粒的功能。的穩(wěn)定,恢復端粒的功能。6、滾環(huán)式復制、滾環(huán)式復制DNA聚合酶III以3OH為引物,以負鏈為模板,從3OH端逐步增添脫氧核苷酸,隨著復制的進行,5‘端長度即不斷增加。這一過程中,單鏈尾巴的延伸伴隨著雙鏈DNA的繞軸滾動,故稱為滾環(huán)式復制。7、基因是編碼一條多肽鏈或功能、基因是編碼一條多肽鏈或功能RNARNA所必需的全部核苷酸序列。所必需的全部核苷酸序列。8、基因組是指某一特定生物單倍體染色體的數(shù)目及其所攜帶的全部基因。、基因組是指某一特定生物單倍體染色體的數(shù)目及其所攜帶的全部基因。9、假基因沒有功能的基因稱為假基因。、假基因沒有功能的基因稱為假基因。第3頁共3頁5、真核生物和原核生物復制起點在數(shù)量上有什么不同在復制完成之前,它們復制啟動的、真核生物和原核生物復制起點在數(shù)量上有什么不同在復制完成之前,它們復制啟動的次數(shù)又有什么差異(次數(shù)又有什么差異(5分)分)6、什么叫拓撲異構酶拓撲異構酶、什么叫拓撲異構酶拓撲異構酶Ⅰ和拓撲異構酶和拓撲異構酶Ⅱ各自的特點是什么旋轉酶是屬于哪各自的特點是什么旋轉酶是屬于哪一類(一類(1010分)分)7、多數(shù)生物的遺傳物質是、多數(shù)生物的遺傳物質是DNADNA,請問,請問DNADNA的復制方式有哪些(的復制方式有哪些(1010分)分)
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    • 簡介:第1頁共2頁2014201520142015學年第一學期學年第一學期分子生物學分子生物學B轉錄與翻譯測驗題學號專業(yè)班級姓名一、名詞解釋(每小題一、名詞解釋(每小題3分,共分,共30分)分)1、轉錄2、啟動子3、密碼子的簡并性4、多核糖體循環(huán)5、增強子6、多順反子MRNA7、HNRNA8、SD序列9、分子伴侶10、終止子第2頁共2頁二、問答題(二、問答題(70分)分)1、試列出TRNA分子上與多肽合成有關的位點。(10分)2、試述RNA分類,各類RNA的結構特點及其在蛋白質合成中的作用。(10分)3、真核生物蛋白質合成后的運輸是怎樣進行的(10分)4、原核和真核細胞在蛋白質翻譯過程有哪些不同之處(20分)5、真核生物三種RNA聚合酶的啟動子的結構各有何特點(10分)6、說明原核生物RNA合成的終止機制。(10分)
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    • 簡介:臨床分子生物學檢驗技術試題及答案臨床分子生物學檢驗技術試題及答案1、分子生物學檢驗技術是以核酸或蛋白質為分析材料,通過分析基因的結構、表達的變化和由此而導致的基因功能的改變,為疾病的研究和診斷提供更準確、更科學的信息和依據(jù)的一門學科。2、請說明分子生物學檢驗技術在臨床試驗診斷中的應用。(1)感染性微生物的檢測。如用PCR技術進行甲型肝炎病毒的檢測、乙型肝炎病毒的檢測和解脲脲原體的檢測等。(2)基因突變的檢測。如用PCR一限制性片段長度多態(tài)性(RFLP技術檢測地中海貧血基因突變。(3)法醫(yī)學檢測。如用PCR微衛(wèi)星檢測技術進行親子關系的鑒定和個體識別。(4)基因異常表達的檢測。如用CDNA表達的芯片技術進行基因異常表達的檢測。(5)基因定位。如用原位雜交技術進行組織與細胞中基因表達的定位。3、基因組是一個細胞或一種生物體的整套遺傳物質。4、基因是基因組中一個功能單位,是貯存有功能的蛋白質多肽鏈信息或RNA序列信息及表達這些信息所必需的全部核苷酸序列。5、原核生物是細菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋雙鏈RNA和單鏈RNA;有環(huán)狀分子,也有線性分子。但無論是哪種核酸類型,一種病毒顆粒中核酸成分只能為一種,或DNA,或RNA。(3)基因組中有基因重疊現(xiàn)象,這種結構的意義在于使較小的基因組能攜帶較多的遺傳信息。(4)基因組中具有操縱子結構。(5)病毒基因可連續(xù)也可間斷。(6)基因組中重復序列少。(7)基因組中非編碼區(qū)少。(8)病毒基因組是單倍體。(9)病毒基因組核酸序列中功能相關的蛋白質基因往往叢集在基因組的一個或幾個特定部位,形成一個功能單位或轉錄單元。(10)病毒基因組含有不規(guī)則的結構基因。11、真核生物基因組的結構特點(1真核生物基本上不存在操縱子結構,一個結構基因轉錄生成一條MRNA,即MRNA是單順反子,許多蛋白是由相同或不同的亞基構成,因此涉及多個基因的協(xié)調表達。(2)基因組中非編碼的區(qū)域多于編碼區(qū)域,并且,編碼蛋白質的基因一般是不連續(xù)的斷裂基因,即有外顯子和內(nèi)含子,在轉錄后經(jīng)剪切成成熟MRNA后,才能翻譯成蛋白質。(3)基因組DNA有重度、中度和低度三種重復序列。(4)
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    • 簡介:專業(yè)課復習資料(最新版)專業(yè)課復習資料(最新版)封面
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    • 簡介:最新精品WORD歡迎下載可修改1SNRNA小核RNA,只存在于細胞核或者核質核仁中的一類小分子量的RNA,具有獨特功能并且獨立存在的實體,約為70300個核苷酸,可參與真核生物的RNA剪接。2SIRNA即干擾RNA,一類小分子量的RNA,可以高效,特意地阻斷體內(nèi)同源基因的表達,促使同源MRNA降解,誘使細胞表現(xiàn)出特定的基因缺失。3核酶一類具有催化活性的核糖核酸,呈錘頭狀,參加RNA的剪切和降解。與RNA酶有顯著區(qū)別,它是RNA,后者是蛋白質。4反義RNA又稱調節(jié)RNA,是指能與特定MRNA互補結合的RNA片段,即堿基序列正好與有意義的MRNA互補的RNA分子。5三鏈DNA是在DNA雙螺旋結構基礎上形成的,由多聚嘧啶核苷酸或者多聚嘌呤核苷酸與DNA雙螺旋形成的。/由于雙螺旋的一股輕微折疊后,該股中的堿基可與雙螺旋的堿基以HOOGSTEEN氫鍵相連如TAT、CGC、TAA、CGG。6RNAI即RNAI干擾,SIRNA高效特異地阻斷體內(nèi)同源基因表達,促使同源RNA降解,誘使細胞表現(xiàn)出特定基因缺失的表型的現(xiàn)象。7何謂反義RNA其功能和醫(yī)學意義如何答又稱為調節(jié)RNA,是指能與特定MRNA互補結合的RNA片段,也即堿基序列與有意義的MRNA互補的RNA分子。功能A阻斷MRNA的翻譯,B抑制DNA復制和MRNA的轉錄,C選擇性的關閉基因。意義參與基因調控可用于基因治療(病毒、腫瘤);8什么叫做核酶如何發(fā)揮作用有何應用價值答即一類具有催化活性的核糖核酸。主要催化RNA的剪接反應和剪切反應。應用意義通過設計合成特異性切割病毒以及病毒的RNA的核酶,對病毒和腫瘤的基因治療將發(fā)揮重要作用。9何謂RNAI其作用機理和應用前景如何答即RNAI干擾,SIRNA高效特異地阻斷體內(nèi)同源基因表達,促使同源RNA降解,誘使細胞表現(xiàn)出特定基因缺失的表型的現(xiàn)象。作用機理分為起始階段和效應階段。起始階段DICER酶以依賴ATP的方式切割外源性的雙鏈RNA為小分子干擾RNA,清除病毒,阻斷轉座子表達;效應階段小分子干擾RNA結合核酶復合物形成RNA誘導活化的復合物及RISC,然后RISC結合至MRNA轉錄本上并切割它,從而發(fā)揮作用。應用前景大通量研究基因功能的工具;基因敲除中的應用;用于基因治療;基因表達的調控。第二章第二章1移動基因又叫轉位因子(TRANSPOSABLEELEMENTS),由于它可以在染色體基因組上移動,甚至可在不同染色體間躍遷,故又稱跳躍基因(JUMPINGGENE)。2斷裂基因真核細胞的結構基因,其核苷酸序列中含有與氨基酸編碼無關的DNA間隔區(qū)段,從而被分割成不連續(xù)的若干區(qū)域。將這種編碼序列不連續(xù),有間隔區(qū)段的DNA片斷稱為斷裂基因3RNA剪接將斷裂基因的內(nèi)含子刪除和表達子連接并最終形成成熟MRNA的過程。4重疊基因不同基因的核苷酸序列有時為相鄰兩個基因共用,將核苷酸彼此重疊的兩個基因稱為重疊基因。5假基因在珠蛋白基因簇各片段核苷酸序列分析時發(fā)現(xiàn),除了有正常的功能基因之外,還有功能失活的特殊序列片段,它不能行使表達功能。該類核苷酸序列中存在的無表達功能的畸變核苷酸序列片段。6衛(wèi)星DNA又稱隨體DNA,不編碼蛋白質和轉錄RNA的小片段高度重復一類小片段DNA序列,多富含GC堿基在DNA浮力密度實驗中會在主峰旁形成些小峰,形似衛(wèi)星分布而稱之。一般510BP短序列,人類為171BP,保護和穩(wěn)定染色體7基因組表示某物種單倍體的總DNA。對于二倍體高等生物其配子的DNA總和即為一組基因組不同生物基因組數(shù)目不同。8LTR即長末端重復序列,為RNA基因組的兩端含有的U3RU5兩個完全相同的正向重復序列。具隨機整和能力,可用作病毒載體問答1什么叫做基因何謂基因的新概念基因的主要功能是什么答基因就是指編碼有最新精品WORD歡迎下載可修改活性,可獨立存在與上游區(qū)、下游區(qū)或基因內(nèi)部,可進行遠距離增強啟動作用,而且無方向性。問答1真核表達調控的順式作用元件有哪些其作用特點是什么答順式作用元件有啟動子,增強子,沉默子,衰減子,終止子。作用特點是能夠與DNA結合蛋白質結合的特定序列的DNA片段,決定轉錄起始位點和RNA聚合酶的轉錄效應。2真核表達調控的反式作用因子有哪些其作用特點答反式作用元件主要分為通用轉錄因子和轉錄調節(jié)因子兩大類。作用特點一,同一DNA序列可被不同蛋白質識別;二同一蛋白質因子可與多種不同DNA序列發(fā)生聯(lián)系,多通過蛋白質蛋白質先結合再影響DNA。三蛋白質蛋白質或蛋白質DNA的結合,導致構象上細微的改變,從而發(fā)揮調控作用。四反式作用元件在合成過程中有相當大的可變性和可塑性。4常用的真核表達載體有哪些并簡述其特點。答主要有一下幾種逆轉錄病毒載體,痘類病毒載體,HSVI單純皰疹病毒載體。特點一,逆轉錄病毒載體對細胞的感染效率高,并能表達整合的病毒基因;可以同時感染大量細胞;長時間感染細胞并不會發(fā)生毒害作用;宿主范圍十分廣泛;可以進行DNA的單拷貝整合;但穩(wěn)定性差,安全性差,重組病毒滴度不高而且局限于感染分裂細胞。二,痘類病毒載體對多種細胞敏感易于培養(yǎng)利于大量生產(chǎn)制備;對外環(huán)境相對穩(wěn)定并易于保存運輸;接種途徑簡單易行;利于多價疫苗的研究開發(fā);利于大片段的外源性基因的插入,且不影響病毒的正常復制和表達,但是基因組分子量大不易操作,沒有MRNA的剪切功能故不宜采用基因組DNA,需使用無內(nèi)含子的CDNA。三,HSVI單純皰疹病毒載體比較大利于大片段的外源性基因插入提供條件,而且插入容量大;可以感染神經(jīng)細胞。5簡述真核,原核倆大表達系統(tǒng)的優(yōu)缺點答一,真核生物DNA只有一小部分是裸露的,有核膜包裹;原核生物大部分屬于非結合狀態(tài),且無核膜的阻隔,轉錄的MRNA直接在胞質中進行蛋白合成。二,真核生物DNA都有內(nèi)含子,可以剪接加以去除;原核生物MRNA的剪接加工能力。三,真核生物可以在需要時可以重排某些DNA片段和擴增特定基因的機制,而原核生物沒有。四,真核生物有三種MRNA酶,可參與不同類型的RNA分子轉錄作用,而原核生物只有一種RNA酶。五,真核生物產(chǎn)生的MRNA分子壽命大多比原核生物長。六,真核生物具有對初級轉錄產(chǎn)物的剪接能力。七,真核生物不存在操縱子結構,原核生物多是。八,真核生物基因多拷貝,而原核生物含有很少的重復序列。第五章第五章名詞解釋1限制性核酸內(nèi)切酶是一類能夠識別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列,并由此切割DNA雙鏈結構的核酸內(nèi)切酶。2同尾酶有一些限制性核酸內(nèi)切酶識別的堿基順序不完全恒定,即識別順序不同,但酶切后產(chǎn)生同樣黏性末端的兩種酶稱為同尾酶,如BAMHⅠ和BGLⅡ。3同裂酶識別序列相同,對甲基化切點敏感性不同的兩種酶。如MBOⅠ和SAU3AⅠ共同識別序列GATC,但對GMEATC切點,前者不能切,后者能切。4甲基化酶常見的有DAM甲基化酶和DCM甲基化酶,可使相應堿基甲基化。常用于使酶切位點中的堿基甲基化而避免降解,保護酶切位點。5KLENOW酶為DNA聚合酶Ⅰ大片段,分子質量為76KD,是經(jīng)過枯草桿菌蛋白酶或胰蛋白酶分解DNA聚合酶Ⅰ,切除小亞基,保留的大亞基部分。這種酶只有DNA聚合酶的活性和3/外切酶的活性,但是沒有5/外切酶活性。6堿性磷酸酶該酶的功能是以單鏈或雙鏈的DNA、RNA為基質,將DAN或RNA片段的5’端的磷酸切除,產(chǎn)生5’OH7逆轉錄酶又稱為依賴RNA的DNA聚合酶,可以RNA為模板,逆轉錄成CDNA第一鏈,這種酶具有聚合酶活性和3’外切酶活性。8DNA連接酶LIGASE)是一種能夠催化在雙股DNA鏈的3′OH和5′P之間形成磷酸二酯鍵的酶,可連接互補粘性末端或平端以及缺口修復,不能連接單鏈DNA,被連接的DNA鏈必須是雙螺旋DNA分子的一部分。
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    • 簡介:最新精品WORD歡迎下載可修改分子生物學知識點(修改)分子生物學知識點(修改)染色體與染色體與DNADNA▲基因基因DNA分子中含有特定遺傳信息的一段核苷酸序列,是遺傳物質最小的功能單位?!虻姆肿由飳W定義基因的分子生物學定義產(chǎn)生一條多肽鏈或功能RNA所必需的全部核苷酸序列▲基因組基因組單倍體細胞中含有的整套染色體?!旧w染色體細胞在有絲分裂(或減數(shù)分裂)時遺傳物質存在的特定形式,是間期細胞染色質結構緊密組裝的結果?!旧w組成DNA、組蛋白、非組蛋白、部分RNA▲染色體的特征1、分子結構相對穩(wěn)定2、能夠自我復制,使親子代之間保持連續(xù)性3、能夠指導蛋白質的合成,掌握整個生命過程4、可以產(chǎn)生可遺傳的變異▲組蛋白組蛋白與DNA結合但沒有序列特異性的蛋白,是染色體的結構蛋白,與DNA共同組成真核生物染色質的基本結構單位核小體▲組蛋白的特性1、進化上保守,不同生物組蛋白的氨基酸組成和相似2、無組織特異性3、肽鏈上氨基酸分布不對稱4、組蛋白有修飾作用▲非組蛋白非組蛋白與DNA結合但有序列特異性的蛋白▲非組蛋白的特性1、具有多樣性和異質性,不同組織細胞中其種類和數(shù)量都不相同2、具有識別、結合特異性,能夠識別特異的DNA序列,在不同的基因組之間,這些非組識別的DNA序列在進化上是保守的3、具有功能的多樣性,包括基因表達的調控和協(xié)助染色質高級結構的形成★真核與原核生物基因組的區(qū)別★真核與原核生物基因組的區(qū)別原核生物基因組真核生物基因組結構簡單,幾乎所有基因都用來編碼蛋白質結構龐大,存在大量重復序列和非編碼序列功能相關的RNA和蛋白質基因,往往集中在一起形成功能或轉錄單位,可以一起被轉錄為多個MRNA(多順反子MRNA)基因的轉錄產(chǎn)物為單順反子有重疊基因(完全重疊、部分重疊、只有一個堿基對的重疊)基因分布在一個染色體上基因分布在多個染色體上幾乎每一個基因都是完整的連續(xù)的DNA片段基因是不連續(xù)的,中間存在不被翻譯的內(nèi)含子序列基因轉錄和翻譯是同步的基因組轉錄后的絕大部分前體RNA必須經(jīng)過剪接過程才能形成成熟的MRNA原核生物的基因組一般是一個復制子基因組的復制起點多,缺少明顯的操縱最新精品WORD歡迎下載可修改有關),拓撲異構酶II(切斷雙鏈,作用是將負超螺旋引入DNA分子,同復制有關)?!艚庑甘墙忾_雙鏈的酶蛋白,每解開1對堿基,需要消耗2分子ATP?!魡捂溄Y合蛋白(SSB)是一些能夠和單鏈DNA結合的蛋白質因子,用于穩(wěn)定DNA單鏈,保護單鏈DNA,避免核酸酶的降解。◆引發(fā)酶參與構成引發(fā)體,合成RNA引物,提供復制所需要的3’OH端,引發(fā)體由引發(fā)酶和引發(fā)前體組成?!鬌NA聚合酶需DNDP為原料,MG2激活,需模板和3’OH端引物?!鬌NA連接酶催化兩段DNA之間磷酸二酯鍵的形成,但不能將兩條游離的單鏈連接起來◆DNA復制的過程起始(DNA母鏈形成復制叉,DNA合成從復制起始點出沿著兩個方向進行,和RNA引物形成的階段)。延長(復制叉的移動和新生鏈的延長,包括前導鏈和后隨鏈的延長)。終止(新生子鏈和母鏈形成新生的雙鏈DNA)▲原核生物DNA聚合酶◆DNA聚合酶I5’3’的聚合酶活性,3’5’,5’3’外切酶活性,在切除因紫外線照射而形成嘧啶二聚體中有重要作用,也可用來切除岡崎片段5’端的RNA引物,使岡崎片段間缺口消失,保障連接酶的連接?!鬌NA聚合酶II5’3’的聚合酶活性,3’5’外切酶活性,主要是起修復DNA的作用?!鬌NA聚合酶III5’3’的聚合酶活性,3’5’外切酶活性提高復制的保真性,是DNA復制中鏈延長的主導聚合酶?!婧松顳NA聚合酶◆DNA聚合酶Α(分布在核內(nèi),主要作用是引物合成)◆DNA聚合酶Β(分布在核內(nèi),主要起對損傷的修復,屬高忠實性修復酶)◆DNA聚合酶Γ(分布在線粒體內(nèi),對線粒體DNA的復制發(fā)揮作用)◆DNA聚合酶Δ(分布在核內(nèi),主要負責DNA復制的酶,參與前導和后隨鏈的合成)◆DNA聚合酶Ε(分布在核內(nèi),與后隨鏈的合成有關)▲DNA的復制體系DNDP為原料,DNA的兩條鏈為模板鏈,一段RNA引物,引物酶,聚合酶等多種酶?!鳧NA的復制的幾種方式◆線性DNA復制(主要是真核生物)◆環(huán)狀DNA復制(大腸桿菌Θ型,質粒滾環(huán)型(不需要RNA引物,只有一個復制叉),線粒體D型)★真核與原核生物★真核與原核生物DNADNA復制的比較復制的比較相同點1、都以DNTP為底物,需要MG激活,需要能量2、聚合時需要模板和引物,都為半保留、半不連續(xù)復制3、方向為5’3’不斷延長的是3’OH4、復制為高保真、有多種機制不同點真核生物原核生物多復制子,多復制起點,雙向為主也有單向單個復制子,單個復制起點,雙向一個復制單元一個復制叉,復制叉移動慢一個復制單元有多個復制叉,復制叉移動快DNA聚合酶種類較多,有15種以上DNA聚合酶種類相對較少DNA復制需要起始點識別復合物不需要
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    • 簡介:最新精品WORD歡迎下載可修改第二章DNA的結構一、選擇題單選或多選1.證明DNA是遺傳物質的兩個關鍵性實驗是肺炎球菌在老鼠體內(nèi)的毒性和T2噬菌體感染大腸桿菌。這兩個實驗中主要的論點證據(jù)是A從被感染的生物體內(nèi)重新分離得到DNA,作為疾病的致病劑BDNA突變導致毒性喪失C生物體吸收的外源DNA而并非蛋白質改變了其遺傳潛能DDNA是不能在生物體間轉移的,因此它一定是一種非常保守的分子E真核生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代21953年WATSON和CRICK提出A多核苷酸DNA鏈通過氫鍵連接成一個雙螺旋BDNA的復制是半保留的,常常形成親本子代雙螺旋雜合鏈C三個連續(xù)的核苛酸代表一個遺傳密碼D遺傳物質通常是DNA而非RNAE分離到回復突變體證明這一突變并非是一個缺失突變3雙鏈DNA中的堿基對有AAUBGTCCGDTAECA4DNA雙螺旋的解鏈或變性打斷了互補堿基間的氫鍵,并因此改變了它們的光吸收特性。以下哪些是對DNA的解鏈溫度的正確描述A哺乳動物DNA約為450C,因此發(fā)燒時體溫高于420C是十分危險的B依賴于AT含量,因為AT含量越高則雙鏈分開所需要的能量越少C是雙鏈DNA中兩條單鏈分開過程中溫度變化范圍的中間值D可通過堿基在260MM的特征吸收峰的改變來確定E就是單鏈發(fā)生斷裂磷酸二醋鍵斷裂時的溫度5DNA的變性A包括雙螺旋的解鏈B可以由低溫產(chǎn)生C是可逆的D是磷酸二醋鍵的斷裂E包括氫鍵的斷裂6在類似RNA這樣的單鏈核酸所表現(xiàn)出的“二級結構“中,發(fā)夾結構的形成A基于各個片段間的互補,形成反向平行雙螺旋B依賴于AU含量,因為形成的氫鍵越少則發(fā)生堿基配對所需的能量也越少C僅僅當兩配對區(qū)段中所有的堿基均互補時才會發(fā)生D同樣包括有像GU這樣的不規(guī)則堿基配對E允許存在幾個只有提供過量的自由能才能形成堿基對的堿基7.DNA分子中的超螺旋A僅發(fā)生于環(huán)狀DNA中。如果雙螺旋在圍繞其自身的軸纏繞后即增加纏繞數(shù)才閉合,則雙螺旋在扭轉力的作用下,處于靜止B在線性和環(huán)狀DNA中均有發(fā)生。纏繞數(shù)的增加可被堿基配對的改變和氫鍵的增加所抑制C可在一個閉合的DNA分子中形成一個左手雙螺旋。負超螺旋是DNA修飾的前提,為酶接觸DNA提供了條件D足真核生物DNA有絲分裂過程中固縮的原因E是雙螺旋中一條鏈繞另一條鏈的旋轉數(shù)和雙螺旋軸的回轉數(shù)的總和8DNA在10MM纖絲中壓縮多少倍長度A6倍B10倍C40倍D240倍E1000倍F10000倍9DNA在3MM纖絲中壓縮多少倍A6倍BL0倍C40倍D240倍ELO00倍F10000倍10DNA在染色體的常染色質區(qū)壓縮多少倍A6倍B10惜C40倍D240倍E1000倍F10000倍11DNA在中期染色體中壓縮多少倍A6倍B10倍C40倍D240倍E1000倍F10000倍12組蛋白的凈電荷是A正B中性C負13.核小體的電性是A正B中性C負最新精品WORD歡迎下載可修改一選擇題1基因組是“A一個生物體內(nèi)所有基因的分子總量(B)一個二倍體細胞中的染色體數(shù)C遺傳單位D生物體的一個特定細胞內(nèi)所有基因的分子的總量2多態(tài)性可通過表型或DNA分析檢測到是指A在一個單克隆的純化菌落培養(yǎng)物中存在不同的等位基因B個物種種群中存在至少兩個不同的等位基因C個物種種群中存在至少三個不同的等位基因D一個基因影響了一種表型的兩個或更多非相關方面的情況E一個細胞含有的兩套以上的單倍體基因組3.核基因經(jīng)常被斷開“A反映了真核生物的MRNA是多順反子B因為編碼序列“外顯子“被非編碼序列“內(nèi)含子“所分隔C因為真核生物的DNA為線性而且被分開在各個染色體上,所以同一個基因的不同部分可能分布于不同的染色體上D表明初始轉錄產(chǎn)物必須被加工后才可被翻譯E表明真核基因可能有多種表達產(chǎn)物,因為它有可能在MRNA加工的過程中采用不同的外顯子重組方式4下面敘述哪些是正確的AC值與生物體的形態(tài)復雜性呈正相關BC值與生物體的形態(tài)復雜性呈負相關C每個門的最小C值與生物體形態(tài)復雜性是大致相關的5選出下列所有正確的敘述。A外顯子以相同順序存在于基因組和CDNA中B內(nèi)含子經(jīng)常可以被翻譯C人體內(nèi)所有的細胞具有相同的一套基因D人體內(nèi)所有的細胞表達相同的一套基因E人體內(nèi)所有的細胞以相同的一種方式剪接每個基因的MRNA6下列關于酵母和哺乳動物的陳述哪些是正確的A大多數(shù)酵母基因沒有內(nèi)含子,而大多數(shù)哺乳動物基因有許多內(nèi)含子B酵母基因組的大部分基因比哺乳動物基因組的大部分基因小C大多數(shù)酵母蛋白比哺乳動物相應的蛋白小D盡管酵母基因比哺乳動物基因小,但大多數(shù)酵母蛋白與哺乳動物相應的蛋白大小大致相同7下列哪些基因組特性隨生物的復雜程度增加而上升A基因組大小B基因數(shù)量C基因組中基因的密度D單個基因的平均大小8以下關于假基因的陳述哪些是正確的A它們含有終止子B它們不被轉錄C它們不被翻譯D它們可能因上述任一種原因而失活E它們會由于缺失或其他機理最終從基因組中消失F它們能進化為具有不同功能的新基因9假基因是由于不均等交換后,其中一個拷貝失活導致的。選出下面關于此過程的正確敘述。A失活點可通過比較沉默位點變化的數(shù)量和置換位點變化的數(shù)量來確定B如果假基因是在基因復制后立即失活,則它在置換位點比沉默位點有更多的變化C如果假基因是在基因復制后經(jīng)過相當長一段時間才失活,則它在置換位點與沉默位點有相同數(shù)量的變化10下列哪些基因以典型的串聯(lián)形式存在于真核生物基因組A球蛋白基因B組蛋白基因CRRNA基因D肌動蛋白基因11根據(jù)外顯子改組EXONSHUFFLING假說A蛋白的功能性結構域由單個外顯子編碼
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    • 簡介:最新精品WORD歡迎下載可修改一、一、簡述DNA二級結級結構的特點構的特點雙螺旋雙螺旋DNA兩條核苷酸兩條核苷酸鏈反向平行,以一定平行距離反向平行,以一定平行距離繞一個軸盤軸盤旋,形成一個右旋的雙螺旋體。旋,形成一個右旋的雙螺旋體。主鏈磷酸和核苷酸排列在雙螺旋外磷酸和核苷酸排列在雙螺旋外側,彼此通,彼此通過35磷酸二磷酸二脂鍵相連接,形成主接,形成主鏈。堿基配堿基配對兩條主兩條主鏈相對應對應的堿基按照的堿基按照AT和GC的配的配對原則由氫鍵氫鍵相連,其中,其中AT之間由兩個由兩個氫鍵氫鍵相連,GC之間由三個由三個氫鍵氫鍵相連。主。主鏈上堿基排列上堿基排列順序儲藏了藏了遺傳遺傳密碼信息。信息。結構尺寸和大小溝構尺寸和大小溝DNA雙螺旋分子直徑雙螺旋分子直徑為2NM,螺距,螺距為34NM,其中包括,其中包括10個堿基個堿基對,堿基與堿基之,堿基與堿基之間距離距離為034NM。螺旋外部有兩個凹槽,根據(jù)大小分螺旋外部有兩個凹槽,根據(jù)大小分為大小溝,都能使蛋白大小溝,都能使蛋白質分子分子進入而與堿基相接觸。入而與堿基相接觸。二、核酸的二、核酸的變性DNA二級結級結構和三構和三級結級結構受到物理化學因素的破壞而解體,構受到物理化學因素的破壞而解體,但其一但其一級結級結構核苷酸構核苷酸間共價共價鍵并不斷裂。并不斷裂。DNA分子由分子由穩(wěn)定的雙螺旋定的雙螺旋結構松解構松解為無規(guī)則線規(guī)則線性結構的構的現(xiàn)象。象。變性時維時維持雙螺旋持雙螺旋穩(wěn)定性的定性的氫鍵氫鍵斷裂,堿基斷裂,堿基間的堆的堆積力遭到破力遭到破壞,但不涉及到其一壞,但不涉及到其一級結級結構的改構的改變。凡能破壞雙螺旋。凡能破壞雙螺旋穩(wěn)定性的因定性的因素,如加素,如加熱、極端的、極端的PH、有機、有機試劑試劑甲醇、乙醇、尿素及甲甲醇、乙醇、尿素及甲酰胺等,胺等,最新精品WORD歡迎下載可修改DNA損傷損傷又稱前突又稱前突變,如果,如果細胞不能將胞不能將損傷損傷完全修復,完全修復,DNA不能恢復不能恢復損傷損傷前的前的結果形果形態(tài),就形成不可逆的永久性、可,就形成不可逆的永久性、可遺傳遺傳的改的改變,即,即發(fā)生了基因突生了基因突變。因此三者之因此三者之間的關系是,的關系是,DNA損傷損傷是突是突變的基的基礎,而修復,而修復時阻止阻止損傷變損傷變成突成突變的手段,突的手段,突變時損傷變時損傷無法修復造成的后果。無法修復造成的后果。六、六、DNA損傷損傷主要的修復方式主要的修復方式DNA修復可以在三個水平上修復可以在三個水平上進行行1、DNA復制前水平或非復制復制前水平或非復制DNA的修復如回復修復和切的修復如回復修復和切除修復。除修復?;貜托迯桶ɑ貜托迯桶笇W光修復(修復學光修復(修復嘧啶嘧啶二聚體),二聚體),單鏈單鏈斷裂重斷裂重組(連接缺口接缺口5磷酸根和磷酸根和3羥基形成磷酸二基形成磷酸二酯鍵酯鍵),),嘌呤直接插入(修呤直接插入(修復無復無嘌呤位點)。切除修復包括堿基切除修復和核苷酸切除修復。呤位點)。切除修復包括堿基切除修復和核苷酸切除修復。步驟為識別驟為識別、切除、修、切除、修補、連接。接。DNA復制水平的修復,如復制水平的修復,如錯配修復。配修復。錯配修復將配修復將DNA復制復制過程中未得到校正的程中未得到校正的錯配堿基配堿基進行二行二次校正。次校正。DNA復制水平后的修復,如重復制水平后的修復,如重組修復及修復及SOS修復。修復。重組修復利用含有正常修復利用含有正常遺傳遺傳信息的同源姐妹信息的同源姐妹DNA分子分子進行重組修復。修復。這種修復常種修復常發(fā)生在修復后,可以生在修復后,可以對發(fā)對發(fā)生在生在DNA兩條兩條鏈
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    • 簡介:綄氜?耀睭???幣〉Ц??睶ヅ礞????奲賋??????魹??鉘??蚶????????囍奧鵁?娕???紐?咯捗?腰?賉蟊??冺?栭仹諸湷?憌????業(yè)???臲翐葵尷?罻??綞??航得剒?嚯???栞?┤????儋??軸??羼羍姙?軖?篠虇嫛???轂??廓?????位?召??袎謙????????媤??鶛蹧?賎????罬快????酛?帳刯?湍????袋????笎?漅????彍殐???魮??????????鸜?杯葬?薖?葥?扻?鶈??涬??徛?蔥癹礷???蜞瀚??平??熒嘙??碷?O牤??閠?儼????欽猿???榋?檂?徖?訚葒蠈招靎?妍?ǘ欫?轤????㏕??锫夬???蹗跴?襖????騫伐圐蛛??睟飩?攬??皦蛫?猢騖袋???翈??嗏?禥昸?飹?否鶆諣??窵析???嗕??????鰅?華?蓋鶳親???焆?樂匿誚褻鞦肵?棘???袕??弩?欲勭????摔幭?般???鉱幫???呃孖?人????譾餓?鉍瓎??鹟遹鍥???淴???譈????歁?朗??????鶧畊?單戥敄??婱?韴?芘邏?氠?鍴鬩????????四??排觳洭?嚌???匸馢質????哅?頨??王糊?襖??毳戎辵檜???????塷琽餚鮫箇?嶄蠁?轄放???伳???瞥?犎??擾?慄菥???鄋??滾??炲憞??4??鲾??蚓?宣?筂雽????晗??廠?瞿???嫲嘳樆?黬?鲴???諶??喪???彲諮┐???桎????莙????﹨籷???妙????邒銌??蘌懟緈????瞡萃省????傺廛??莛??憯??悛?硫?奐寈芚??榰潮鄼?谼蚳????蕜???轓???馚?榪????崎?潡???狆檍ぬ●醝??櫧??忿躋?褉畼Μ幚璉?????紖?荃??倀????鼀省牯牟汥潤畣敭瑮砮汭爮汥??葬?遝??厴?窗??浼?菨歧?????昋???儶涷滰????㈧?醝?6鑪??董?プ?綳??瑤??挌?馀?鎩敷?た嚢???僚???煡?彉駢??跶???鰾???芲鯴???湙侉?籫镥??歐珍芪??鸆??嫓淮??葲?緡???擄∥??????梂??窞?????衱╳?懍痙???免∪???袙鬢?だ濱?鍟?????挬?摍??呻裘?荑楨玡?愁?觴┤鮫?????濼?家⒌?塵???髷??瀙???峁荙歭肊???汳?立摲搯捯浵湥浸???倿佼各???寬寫??顠???騱覨馷??梊??灘???蠠齏???罟麘劈盳?鍦癆峺?翳緾??????罻??霎?荺?鴯櫧ぷ矨?鰄拝誑???隣?????燭鼇?妻?懗問?覽????盥慠纜鯹?決?????麵孊????鴿???鉜?蝡鉼鳹??說?墥刂?????虨?淞??鏘怞?竧?卾?瑘??汘噭?紗癱????爓粻澡????楨厯??蓋巀???纑燧嘵浬蕀莐???蔐????皭繢?????鉃揮?筶?脛?隵?櫛億?攧?寙淭茖?徯鍯嚦蹃????????????冽亳?橚韖?責??扴?????閔?致轅謕??鮟?縘М?椄摦蚑闟??裰?鴢尅???????馇?哧?徐???拍躔膭???縿憪?僥??繋樑??牑帉?蒦??????寸?柹挈獙??瞗懻??劕ヌ鳹﨏??嗑瞼?????翈烺??鈔??灻?題???藀?泣鍘輚爋???嬯隨蒎諏敵慪???廚?妭欵鼵???磛??????纎帳脙磘?????氨爾???曞????棿??痶茐?織???阫魹?偉挩涑攨?晊帆覠蛌骦??癒鉡????嗆賈?耎?唜亖?寽舲鯁???玌蜅椌??霡??熌懯??娩鞇??講??躆?梙?樍徂訛?鉍枹禙芭??????員暈妭涏?猉躵?褌位鬨??甕?????餑?撲?疾??糲?????匟蕢贅???鱣??K砸??殜??????箏??襧??穤胖克?椔溧???嚈??鶿鶧?偲?蕕?跖??汝???O?耢鶁??暀??惲虧??賊?柩??囥薻?什駠?賀?怞?詨??≥瀓?陳?????寰?嗊??垬??匫悻霪?麕?║??筘???礀?遪?????讉季?彊?貥????ヽ付基????榪??峱錘锽?饉???謝?匝?嗩??淕???恅禿七?Μ?讚??丒??魭?????稱?俤儕???刌吘??????壩?呰?媽鏢?蛬???虦攌鋔溚?鑰蕩??塵??勁???捬梙蠺?覔?雽綐?愾?鑃?刦?癟????澋?喆?????酖觷?????禮?適??儭瘜銼嘩簓??嚙鰼彽玈?????潿漿貥?????漹??嫀??訵?粵琠憁?除蹽?賂擵???苜瓜?????呔女卉?潈,?筕?栦??鐧??諑???唵??牠尚明?????阦?餓??焴數(shù)撣?麌?媎鰰?馷檁?????嚂?槒惡禡??勞???賴茖??恁隭?锳?伅寷漳??畮凮??墎?薃撙?劏??烉??鍙蠃?猔箠薠?崊?鵭?織???徹??煟漷?铚磷??俾?諀?擝?鮯?????擐???咝?執(zhí)??駲窷??府囪萷??鯝絹?定?????罟????睛強?賦??祭?潚媖溏嶾?稅晏馼?縐胗??彟???巛??妝癯禮?甘翖?喙老榽淸?竚棓?峑??槭??綰櫨獊臾?汜舭à琕???確??滭燐鰒?悂澶??瞧謁???敘?頏禡?燒?????撏嶧櫖??勨?㈧???????曹?拀?魲媌趔??倂ゞ茩縧??讖石?荬?蜖??鷻??????椥??侁??硺?珠後瓅?溷懅胹┕?????飺????彆?別?蘇???摯萣??勍傐?烶奣瀞?譂冔??蠡酳??蕭誚?鵇詈易??????偤魙攄?恕甌??憼?姴???嗭?慴鷯???釅啋瞛???栩??魗?????????鰀???簊?????鉠??潷摲是潯湴瑯獥砮汭銬櫛ッ蘌蝻????竬鸀??汥大統(tǒng)燊壇熻撈??啃?鎬厠?霡郺?螗雅?鴳??涼?滋鉯?聜???勱悖???????灙虐涼?邇戲┠?裱??坼???哏?毀?稕楊?罓憥椄??髗????壜?谹蟮????衶????挽餸?▼輎???澂綑趠????撆銞?霏纘??尻?K藘?????晴?柙熍廐?鱟叧?鬿??瘰??????充??潷摲栯慥敤?砮汭埬滍???椻??????汮儈??宑淡烚??誒?嚜??曹??鵋??倏蠟僰鑄?冓辮洜輰??銬瑨???膟ㄣ渚蓃???壎蘨?憗糵嬢悡?橓溦?騁?╃袴??咐??蜣鰢????舎蓫嵊??所荒攝?????峭????鴬戍寇巔??イ姏?諜諞?????債蒿〆?緉?凨??惶????捑鈜優(yōu)獒?腓嘼???箄?柖浡?ê棜?Δ??瞗??恕??奎??峒霧?禆???
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