EZH2、p130及p16在子宮內膜癌變過程中的表達及意義.pdf

1、目的：子宮內膜癌(endometrial carcinoma，EC)是女性生殖系統(tǒng)常見的一種惡性腫瘤，它的發(fā)生、發(fā)展是一個多因素、多步驟的復雜過程。原癌基因的激活，抑癌基因的失活、突變、抗細胞凋亡等不同的機制都可能參與其中。一般認為子宮內膜增生-不典型增生-癌是子宮內膜腺癌癌變的經典過程。子宮內膜增生，特別是不典型增生是子宮內膜癌的重要癌前病變。研究子宮內膜癌的癌變對子宮內膜癌的防治具有重要意義。 EZH2基因是1996年發(fā)現(xiàn)的

2、一種新的人類基因，定位于人染色體7q35。EZH2基因是果蠅E(z)基因的同源基因，與細胞生長調節(jié)相關，通過抑制染色質中的靶基因因而促進細胞增殖。pRb-E2F通路在細胞增殖和腫瘤形成過程中起重要作用。EZH2位于pRb-E2F通路的下游，由于去磷酸化的pRb能夠結合E2F，抑制E2F啟動S期的基因轉錄，pRb-E2F復合物結合于EZH2啟動子結合位點，抑制EZH2啟動子的轉錄。下調EZH2表達顯著性地抑制了細胞生長，阻滯細胞于G2/M

3、期。通過原位雜交技術，發(fā)現(xiàn)EZH2在多種腫瘤中基因擴增，認為EZH2是一候選癌基因。EZH2作為轉錄抑制因子，在基因水平上抑制多種基因的活性，尤其明顯抑制腫瘤轉移抑制基因，表現(xiàn)為EZH2蛋白促進腫瘤細胞的侵襲轉移。p130是一個典型的抑癌基因，屬Rb基因家族。p16基因又稱為多種癌抑制因子，是腫瘤抑制基因。生理狀態(tài)下p130和p16通過對轉錄因子(E2Fs)的活性調節(jié)而影響EZH2的轉錄。p130和p16的表達抑制了E2F的活性以及后來

4、細胞周期的阻滯。研究表明，EZH2異常表達與白血病的發(fā)生、前列腺癌的轉移有關。迄今為止，有關EZH2在子宮內膜癌變過程中的表達及意義的研究工作尚未見文獻報道。為探討EZH2在子宮內膜癌的發(fā)生、發(fā)展的作用及其與p130和p16的表達相互關系，本研究對正常增殖期子宮內膜、子宮內膜單純性增生、復雜性增生、不典型增生和子宮內膜癌組織中EZH2、p130和p16在蛋白水平上的表達情況進行了免疫組化分析。 方法：應用免疫組織化學(Immun

5、ohistochemistry，IHC)法檢測20例增殖期宮內膜、20例單純性增生、20例復雜性增生、20例不典型增生和43例子宮內膜腺癌組織中EZH2、p130、p16的表達與臨床病理特征的關系及三者之間相互作用關系。 結果： 1 EZH2在不同性質子宮內膜組織中的表達EZH2基因蛋白陽性反應主要定位于細胞核，在正常組織間質細胞中也有EZH2蛋白的表達。在增殖期宮內膜、子宮內膜單純性增生、復雜性增生、不典型增生和子宮內

6、膜腺癌中陽性表達率分別為15.0％、30.0％、40.0％、55.0％、74.4％。EZH2在子宮內膜腺癌中的表達顯著高于正常增殖期宮內膜、子宮內膜單純性增生和復雜性增生(P<0.05)。在子宮內膜腺癌中， G1級組織中EZH2蛋白陽性表達顯著高于G2+G3級組織(P<0.05)。 2 p130在不同性質子宮內膜組織中的表達p130為胞核陽性表達，呈棕黃色或棕褐色顆粒狀。p130在20例增殖期宮內膜中有18例(90.0％)陽性表

7、達，在20例子宮內膜單純性增生中有16例(80.0％)陽性表達，在20例復雜性增生中有14例(70.0％)陽性表達，在20例不典型增生中有11例(55.0％)及在43例子宮內膜腺癌中有21例(48.8％)陽性表達；p130蛋白的表達逐漸降低，差異有顯著性(P<0.05)。p130蛋白在子宮內膜腺癌中的表達顯著高于正常增殖期宮內膜、子宮內膜單純性增生(P<0.05)。在子宮內膜腺癌中，p130蛋白的表達與組織學分級有關，G2+G3級組織中

8、p130蛋白陽性表達率顯著低于G1級組織(P<0.05)，而與其他臨床病例參數(shù)無關(P>0.05)。 3 p16在不同性質子宮內膜組織中的表達p16陽性表達位于細胞核或/和細胞漿，呈棕黃色顆粒。從增殖期宮內膜→子宮內膜單純性增生→復雜性增生→不典型增生→子宮內膜腺癌癌變的過程中，p16蛋白的陽性表達率逐漸降低(90.0％、70.0％、70.0％、50.0％、46.5％)。p16蛋白在子宮內膜腺癌中的表達顯著高于正常增殖期宮內膜(

9、P<0.05)。在子宮內膜腺癌中，p16蛋白的表達與組織學分級有關，G2+G3級組織中p16蛋白陽性表達率顯著低于G1級組織(P<0.05)，p16蛋白在有淋巴結轉移者中的陽性表達率顯著低于無淋巴結轉移者(P<0.05)。 4 EZH2、p130及p16在子宮內膜癌變過程中的表達情況的相關性研究EZH2蛋白呈陽性表達的60例中有30例p130蛋白陽性表達，30例陰性表達；EZH2蛋白呈陰性表的63例中有50例p130蛋白陽性表達

10、，13例陰性表達。統(tǒng)計學分析結果表明，在子宮內膜癌變過程中EZH2與p130表達呈負相關(x<'2>=11.560，P<0.05)。 EZH2蛋白呈陽性表達的60例中有27例p16蛋白陽性表達，33例陰性表達；EZH2蛋白呈陰性表的63例中有49例p16蛋白陽性表達，14例陰性表達。EZH2與p16在子宮內膜癌變過程中的表達呈負相關(x<'2>=13.871，P<0.05)。 p130蛋白呈陽性表達的80例中有62例p16蛋白陽

11、性表達，18例陰性表達；p130蛋白呈陰性表的43例中有14例p16蛋白陽性表達，29例陰性表達。根據本實驗的結果，表明p130與p16在子宮內膜癌變的表達中呈正相關關系(x<'2>2=23.731，P<0.05)。 結論 1 從增殖期宮內膜、子宮內膜單純性增生、復雜性增生、不典型增生到子宮內膜腺癌，EZH2在蛋白水平上的表達逐級增高，而p130和p16蛋白的表達逐漸下降，提示在蛋白水平上EZH2表達上調和p130及p1