細胞周期素D-,1-、p16蛋白在子宮內膜癌中的表達及臨床意義.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文細胞周期素D、p16蛋白在子宮內膜癌中的表達及臨床意義姓名：白華申請學位級別：碩士專業(yè)：婦產科學指導教師：曲陸榮20000301級)12例，低分化(I級)18例。按FIGO標準臨床分期分為I期28例，Ⅱ期11例，I期11例，Ⅳ期2例。選取同期因子宮肌瘤(漿膜下)行子宮切除術標本26例為對照組，其中增殖期、分泌期內膜各13例。對照組術前月經周期規(guī)律，兩組術前均未接受化療、放療及性激素類藥物治療。實驗方法采用免疫組織

2、化學方法(SP法)檢測CyclinD1、p16蛋白在52例子宮內膜癌內膜組織(實驗組)和26例正常子宮內膜(對照組)中的表達。所選標本均經10％中性甲醛常規(guī)固定，石蠟包埋。所有蠟塊均行4微米厚度連續(xù)切片，經常規(guī)HE染色重新確診分級后進行CyclinD，、p16免疫組化染色。染色步驟(SP法)操作如下：(1)石蠟切片常規(guī)脫蠟入水，(2)3％H。O。室溫孵育，(3)蒸餾水沖洗，PBS浸泡，(4)高壓煮沸修復抗原，(5)10％正常血清室溫孵育

3、，(6)滴加一抗(工作濃度為CyclinD。1：150，p161：150)，4“C過夜，(7)滴an抗工作液，37℃孵育，(8)滴加辣根酶標記的鏈霉卵白素工作液，37“C孵育，(9)DAB顯色劑顯色，(10)蘇木素復染，流水返蘭，樹脂明膠封片，(11)在(6)、(7)、(8)步驟后用PBS沖洗3次。同時設陽性、陰性對照。結果判定標準：陽性染色為棕黃色顆粒，CyclinD，蛋白表達位于細胞核內，p16蛋白表達位于胞漿及胞核內。鏡下觀察細胞