載左氧氟沙星介孔氧化硅微球-納米羥基磷灰石-聚氨酯復(fù)合材料治療兔脛骨感染性骨缺損的研究.pdf

1、第一部分：HPLC法檢測(cè)兔脛骨及骨髓中的左氧氟沙星
　　目的:建立反相高效液相色譜儀（ high performance liquid chromatography,HPLC）檢測(cè)兔脛骨及骨髓中左氧氟沙星的方法，用于評(píng)價(jià)納米微球載左氧氟沙星可控降解骨修復(fù)材料中的左氧氟沙星在兔局部骨組織及骨髓中的緩釋特點(diǎn)。
　　方法:分別將不同濃度左氧氟沙星加入空白脛骨、骨髓，以環(huán)丙沙星作為內(nèi)標(biāo)，采用Sepax BR-C18(250 mm×4

2、.6 mm5?m)色譜柱，流動(dòng)相為：0.01 mol/L磷酸二氫鉀—甲醇—0.5 mol/L四丁基溴化銨(75：25：4)，流速:1.0 ml/min，柱溫:40℃，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)290 nm。評(píng)價(jià)指標(biāo)為：專(zhuān)屬性、檢測(cè)線、定量線、回收率、穩(wěn)定性、精密度。
　　結(jié)果:當(dāng)脛骨中的左氧氟沙星濃度在0.05?g/ml～300?g/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.999)；低、中、高3個(gè)濃度的方法回收率分別為(108.81±1.14)％、(9

3、6.85±3.64)%、(114.38±0.27)%；提取回收率分別為(110.92±0.42)%、(110.48±0.97)%、(80.39±0.08)%；日內(nèi)精密度的 RSD分別為1.30%、0.23%、5.51%；日間精密度的 RSD分別為：7.09%、3.71%、2.55%，樣品穩(wěn)定性良好。骨髓中的左氧氟沙星濃度在0.01?g/ml～300?g/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.999)；低、中、高3個(gè)濃度的方法回收率分別為(91

4、.67±3.73)%、(101.77±0.26)%、(87.72±0.72)%；提取回收率分別為(102.97±0.81)%、(87±0.62)%、(99.97±1.15)%；日內(nèi)精密度的RSD分別為1.49%、1.06%、0.11%；日間精密度的RSD分別為：5.61%、2.56%、2.37%，樣品穩(wěn)定性良好。
　　結(jié)論:本方法操作簡(jiǎn)便、靈敏、穩(wěn)定、回收率高，適用于檢測(cè)新型載藥骨修復(fù)材料中的左氧氟沙星在兔局部骨組織中的分布。

5、r>　　第二部分：載左氧氟沙星介孔氧化硅微球/納米羥基磷灰石/聚氨酯復(fù)合材料治療兔脛骨感染性骨缺損的研究
　　目的：評(píng)價(jià)新型載左氧氟沙星介孔氧化硅微球/納米羥基磷灰石/聚氨酯復(fù)合材料治療兔脛骨慢性骨髓炎的療效。
　　方法：建立兔脛骨慢性骨髓炎動(dòng)物模型60只，將其分5組。A組動(dòng)物僅清創(chuàng)，作為空白對(duì)照組（ Blank control）；B組植入1mg Lev@PMMA；C組植入5mg Lev@PMMA；D組植入1mg Lev@M

6、SNs/n-HA/PU；E組植入5mg Lev@MSNs/n-HA/PU。在術(shù)后1W、3W、6W、12W觀察大體病理學(xué)、影響學(xué)、Micro CT、組織學(xué)。評(píng)價(jià)新型復(fù)合材料誘導(dǎo)成骨能力、材料有無(wú)降解，評(píng)價(jià)新型支架材料治療慢性骨髓炎的效果。
　　結(jié)果：1.大體病理學(xué) Blank control組的脛骨具有典型的骨髓炎表現(xiàn)，脛骨破壞嚴(yán)重、有死骨形成。其余四個(gè)載藥材料組表現(xiàn)為：骨修復(fù)材料與脛骨結(jié)合緊密，材料不易拔出。2.放射學(xué) Blank

7、 control組脛骨中上段骨組織明顯腫脹、骨密度降低、骨破壞明顯、骨皮質(zhì)呈“殼”樣隆起、死骨形成、邊界不清、溶骨性病灶、骨皮質(zhì)變薄。1 mg Lev@PMMA組、5mg Lev@PMMA組可見(jiàn)完整的PMMA材料。3.新骨生成量5mg Lev@MSNs/n-HA/PU組的成骨量與1mg Lev@MSNs/n-HA/PU組、5mg Lev@PMMA組、1mg Lev@PMMA組、Blank control組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）；

8、1mg Lev@MSNs/n-HA/PU組與1mg Lev@PMMA組及Blank control組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。4.VG染色 Blank control組骨質(zhì)較稀疏。在1mg Lev@PMMA組、5mg Lev@PMMA組材料表面，有新生骨小梁遷延生長(zhǎng)。在1mg Lev@MSNs/n-HA/PU組、5mg Lev@MSNs/n-HA/PU組材料的內(nèi)部，新生骨小梁沿著孔隙生長(zhǎng)。其中5mg Lev@MSNs/n-HA/PU