離子液體分散液相微萃取-高效液相色譜法測(cè)定生物檢材中的溴敵隆.pdf

1、背景與目的：溴敵?。˙romadiolone），屬第二代香豆素類抗凝血?dú)⑹髣?，因其滅鼠效果好、?duì)人畜毒性低，近年來(lái)在我國(guó)得到認(rèn)同并普遍使用。但由于使用管理不當(dāng)，造成了該類鼠藥中毒、甚至死亡事件的增加。因此，建立快速高效的生物樣品中溴敵隆的檢測(cè)方法十分必要。
　　樣品前處理是法醫(yī)毒物分析的關(guān)鍵步驟，直接影響毒物的檢出率。傳統(tǒng)的樣品前處理方法如固相萃取、液液萃取等，存在操作繁瑣費(fèi)時(shí)、提取率低、需要使用大量對(duì)人體和環(huán)境有毒害作用的有機(jī)溶

2、劑等問(wèn)題。分散液相微萃取是由Rezaee等于2006年首次報(bào)道的一種新型樣品前處理方法，該方法集采樣、萃取和濃縮于一體，操作簡(jiǎn)便快速、成本低、富集效率高且環(huán)境友好，是一種很有應(yīng)用前景的樣品前處理技術(shù)。
　　方法：本研究將離子液體分散液相微萃取技術(shù)引入生物檢材尿液和血漿中的溴敵隆前處理中，通過(guò)考察萃取劑和分散劑體積、樣品 pH、鹽濃度、萃取時(shí)間和離心時(shí)間等因素，優(yōu)化前處理?xiàng)l件，獲得較好的前處理結(jié)果。采用 HPLC對(duì)前處理樣品進(jìn)行檢測(cè)

3、。
　　結(jié)果：選用離子液體1-己基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽（[C6MIM][PF6]）為萃取劑，甲醇為分散劑，提取樣品中的溴敵隆。優(yōu)化后的溴敵隆分散液相微萃取操作條件為：萃取劑[C6MIM][PF6]50μL，分散劑甲醇100μL，樣品溶液pH值5.0，萃取時(shí)間5min，離心時(shí)間8 min。
　　本研究建立了溴敵隆的高效液相色譜分析方法。方法采用Symmetry C18反相柱分離，流動(dòng)相由甲醇（A）、25 mmol/L磷酸鹽

4、緩沖液（pH=3.0）（B）組成，等度洗脫，A+B=85+15（v/v），流量1.0 mL/min，柱溫30℃，檢測(cè)波長(zhǎng)260 nm。溴敵隆在1.0~500.0μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）小于5％，方法靈敏度高、重現(xiàn)性佳。
　　在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，尿液中溴敵隆的檢出限為1.1 ng/mL（S/N＞3），線性范圍為0.01~5.0μg/mL，線性相關(guān)系數(shù)r=0.9997?？瞻讟悠分械?、中、高濃度加標(biāo)回收率分別

5、為82.4%、93.0%、95.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）分別為6.63%、3.89%、3.86%；血漿中檢出限為1.1 ng/mL（ S/N＞3），線性范圍為0.01~5.0μg/mL，線性相關(guān)系數(shù)r=0.9988。空白樣品中低、中、高濃度加標(biāo)回收率分別為76.4%、82.6%、92.1%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）分別為4.17%、2.99%、1.67%。
　　結(jié)論：方法可滿足中毒樣品分析的需要，已成功應(yīng)用于尿液和血漿中溴敵隆的