岷山山系黑熊種群生存力分析及黑熊分子生物學(xué)初探.pdf

1、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文岷山山系黑熊種群生存力分析及黑熊分子生物學(xué)初探姓名：侯萬儒申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：任正隆20030501006l：4359只，09200064：4394只，09120073。15在近親繁殖、人類捕捉3％影響下，100年內(nèi)種群數(shù)量和基因雜合率動態(tài)分別為：2161只，099740002；2463只，097940015：2695只，O968003l：2893只，o9560041：2964只

2、，09440：051；3162只，0902006：3229只，0902006；3283只，091240074：3314只，090400793338只，08960079。16在近親繁殖、人類捕捉5％影響下。100年內(nèi)種群數(shù)量和基因雜合率動態(tài)分別為：1704只，09970002；1534只，0982440017；1374只，096340034：1200只，094340047：1028只，09210057；876只，089740073；729

3、只，08730088：607只，O8720058：487只，08560059：389只，08370067。17在近親繁殖、食物欠收和人類捕捉2％影響下，100年內(nèi)種群數(shù)量和基因雜合率動態(tài)分別為：2268只，09970002：2364只，09830014：2958只，09630029：3228只，095640037；3424只，09430049：3603只，09350052；3707只，09260057：3779只，091840036：3

4、825只09080076：3910只，086240077。18在近親繁殖、食物欠收和人類捕捉3％影響下100年內(nèi)種群數(shù)量和基因雜合率動態(tài)分別為：1905只，09970002；2039只，098240015：2142只，0966400302200只，095040042：2247只，09370048：2262只，09370048：2259只，091040065：2245只，08960069；2227只，08860071；2227只，0825

5、008l。19在近親繁殖、食物欠收和人類捕捉5％影響下，100年內(nèi)種群數(shù)量和基因雜合率動態(tài)分別為：1523只，O。997_40002；1301只，09820014；1081只，09580038：981只。09340050：713只，O9160047：555只，08800085；426只，08440116：319只，08190117；230只，08070114：162只，07890109。2黑熊分子生物學(xué)初步研究結(jié)果：本實驗采用人類x染色

6、體上的15對粗掃描微衛(wèi)星標記(GATAl75D03DXS9896GATAl44D04DXS6800GATAl82E04DXS9900DXS9895DXS6810DXS7132DXSl047DXYSl54DXS6797DX$6789GATAl65812DXSl068)引物和人類SSX、ALTE和IDH3G基因的序列位標(STSXSSX4stSG54512、ALTE—RH38668、IDH3GstSG47410)；J[物對黑熊總基因組(DN

7、A)進行了PCR擴增。15對粗掃描微衛(wèi)星標記中有4對引物能擴增出產(chǎn)物，這4對引物的名稱分別是DXS9900、DXS9895、GATAl82E04和DXYSl54，其中DXS9895、GATAl82E04引物在黑熊中能分別擴增出大小和結(jié)構(gòu)各異的兩個DNA片段。SSX4stSG54512、ALTERH38668、lDH3GstsG47410這3對引物均能在黑熊DNA中擴增出產(chǎn)物。對擴增產(chǎn)物分gⅡ進行聚丙烯酰胺凝膠電泳和銀染，然后從聚丙烯酰胺

8、凝膠電泳膠片上回收DNA，分別進行克隆和測序。通過對擴增產(chǎn)物序列比較分析和Blast檢索發(fā)現(xiàn)：21人類x染色體上這4對微衛(wèi)星標記引物在黑熊中所擴增的6個DNA片段，在性質(zhì)上不屬于重復(fù)序列。這6個DNA片段與相應(yīng)的標記模式序列相比，一是在長度上存在較大差異；二是在結(jié)構(gòu)上也存在很大差異，即除兩端引物序列同源外，在兩引物之問的序列同源性特別低。這6個DNA片段經(jīng)Blast檢索，未能找到其片段全序的同源序列。由此初步認為：人類X染色體上的這4對

9、微衛(wèi)星引物在黑熊中所擴增的6個DNA片段具有黑熊特異性，在對黑熊核基因組的認識尚處空白的狀態(tài)下，這6個DNA片段可以作為黑熊的標記序列。這6個序列：序列1、序列2、序列3、序列4、序列5和序列6可暫時分別命名為BlackbearDXS9900、BlackbearDXS98951、BlackbearDX898952、BlackbearGATAl82E04l、BlackbearG^M182E042和BlackbearDXSl54。22人類S