狗肝菜多糖P1D,P2D和P4D的結(jié)構(gòu)分析及其保肝活性初步研究.pdf

1、狗肝菜為爵床科植物狗肝菜屬狗肝菜（Dicliptera chinensis（L.）Ness）的干燥全草，主產(chǎn)于福建、臺(tái)灣、廣東、廣西等地。味甘、苦，性微寒。主要功效是清肝熱，涼血生津，除濕火骨痛，斑疹發(fā)熱。主要用于治療血尿，感冒發(fā)熱，肺熱咳嗽，結(jié)合膜炎，帶狀皰疹，黃疸，肝熱頭痛，無名腫毒。2004年，廣東省食品藥品監(jiān)督管理局首次將狗肝菜編入《廣東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》，正式把狗肝菜列入地方中藥標(biāo)準(zhǔn)。
　　實(shí)驗(yàn)室前期工作表明，狗肝菜多糖保肝

2、作用的活性部位為6000Da以下多糖部位，因此本文對(duì)狗肝菜多糖該活性部位進(jìn)行分離純化，并對(duì)分離得到的均一多糖組分進(jìn)行結(jié)構(gòu)解析以及保肝活性初步研究。
　　主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　1、狗肝菜多糖活性部位的分離純化
　　通過采用二乙胺基乙基DEAE-52纖維素離子交換柱層析法、葡聚糖凝膠G-50柱層析法對(duì)狗肝菜多糖活性部位進(jìn)行分離，采用凝膠滲透色譜法（GPC）進(jìn)行純度鑒定以及分子量測(cè)定。
　　2、狗肝菜多糖P1D、P2

3、D及P4D的初步結(jié)構(gòu)解析
　　采用紅外光譜法（IR）、氣相色譜法（GC）對(duì)狗肝菜多糖P1D、P2D及P4D的結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步分析。
　　3、狗肝菜多糖P1D、P2D及P4D對(duì)CCl4致L-02肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作
　　用研究
　　通過檢測(cè)L-02肝細(xì)胞的細(xì)胞存活率、培養(yǎng)上清液中ALT與AST的活性、肝細(xì)胞中MDA含量和SOD活力性等指標(biāo)來評(píng)價(jià)P1D、P2D及P4D對(duì)CCl4損傷L-02肝細(xì)胞的影響。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4、如下：
　　1、經(jīng)DEAE-52、G-50和GPC，最終得到三個(gè)均一多糖組分P1D、P2D和P4D，其分子量分別為12943Da、7261Da、15259Da。
　　2、由紅外光譜法和氣相色譜法得知P1D為多糖，并含有β-吡喃糖環(huán)，含有鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖，5種單糖摩爾比為1：0.82：0.27：0.33：0.99。P2D為多糖，含有鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-葡萄糖、D-半乳糖，4種單糖摩

5、爾比為1：3.20：0.99：1.32。P4D為多糖，含有鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖，5種單糖摩爾比為1：0.59：0.55：0.44：0.93。
　　3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明狗肝菜多糖P1D、P2D和P4D能顯著提高CCl4損傷L-02肝細(xì)胞存活率、降低ALT、AST水平，降低MDA含量，提高SOD活性，具有明顯的體外抗CCl4致L-02肝細(xì)胞損傷的作用。P1D、P2D和P4D均存在劑量效應(yīng)關(guān)系，即多糖濃度