黃瓜瓜把長(zhǎng)度的遺傳分析及其QTL定位研究.pdf

1、黃瓜是重要的蔬菜作物之一,與大眾生活密切相關(guān)。黃瓜的瓜把長(zhǎng)度是影響黃瓜品質(zhì)和商業(yè)價(jià)值的重要性狀之一。隨著人們消費(fèi)觀念的改變,新穎奇特的黃瓜品種(短瓜把或無瓜把)倍受消費(fèi)者的青睞。本研究以短瓜把溫室黃瓜品種“拉迪特Z9”為母本,長(zhǎng)瓜把黃瓜品種“東農(nóng)129”為父本,及其F6群體單株為研究材料,利用主基因+多基因混合遺傳模型對(duì)黃瓜瓜把長(zhǎng)度進(jìn)行了遺傳分析,并使用BSA(Bulked Segregant Analysis)法和SRAP(Seque

2、nce-Related Amplified Polymorphism)分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行黃瓜瓜把長(zhǎng)度的QTL定位,為黃瓜外觀品質(zhì)的改良和分子標(biāo)記輔助育種提供了理論基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.黃瓜瓜把長(zhǎng)度的最適遺傳模型為E-2-6,即兩對(duì)連鎖主基因+加性多基因模型,主基因表現(xiàn)為累加作用,加性效應(yīng)為0.36,上位效應(yīng)為0.69,主基因遺傳率為56.27％,多基因遺傳率為17.08％,表明瓜把長(zhǎng)度的遺傳主要為主基因的遺傳,受加性

3、效應(yīng)和上位性效應(yīng)的影響,環(huán)境因素對(duì)瓜把長(zhǎng)度的影響較大。
　　 2.對(duì)F6群體各單株瓜把長(zhǎng)度的分離情況進(jìn)行調(diào)查統(tǒng)計(jì),結(jié)果表明F6代瓜把長(zhǎng)度呈連續(xù)分布,符合正態(tài)分布,說明黃瓜瓜把長(zhǎng)度性狀是數(shù)量性狀。
　　 3.采用改良的CTAB法提取黃瓜基因組DNA,經(jīng)1％瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),結(jié)果顯示,提取的基因組DNA帶型整齊,質(zhì)量好。
　　 4.利用正交設(shè)計(jì)法,建立了穩(wěn)定可靠的黃瓜SRAP-PCR反應(yīng)體系(25μL):10×PC

4、R緩沖液2.5μL,25mMMgCl21.4μL,Takara產(chǎn)Taq酶(2.5U/μL)0.2μL,模板DNA30ng,引物(0.1μL)0.6μL,2.5mMdNTP2.5μL,ddH2O16.2μL。
　　 5.利用380對(duì)SRAP引物組合在雙親間進(jìn)行多態(tài)性篩選,共得到153對(duì)多態(tài)性好的引物組合,多態(tài)率為40.3％。構(gòu)建長(zhǎng)瓜把與短瓜把極值DNA池,利用篩選出的153對(duì)多態(tài)性引物組合在兩池中進(jìn)行多態(tài)性篩選,發(fā)現(xiàn)其中有27對(duì)引

5、物組合能擴(kuò)增出多態(tài)性條帶,多態(tài)率為17.6％。用這27對(duì)引物組合進(jìn)行兩池間各單株的多態(tài)性分析,共得到16個(gè)多態(tài)性標(biāo)記位點(diǎn),用于F6群體分析。利用這16個(gè)多態(tài)性標(biāo)記在F6群體各單株中進(jìn)行分析,共檢測(cè)到9個(gè)標(biāo)記產(chǎn)生多態(tài)性條帶。經(jīng)卡方適合性檢驗(yàn),有7個(gè)標(biāo)記符合1:1的理論比。
　　 6.采用復(fù)合區(qū)間作圖定位QTL進(jìn)行瓜把長(zhǎng)度的QTL定位,共定位到2個(gè)影響瓜把長(zhǎng)度的QTL在第1連鎖群的ME11-EM4和ME14-EM9之間檢測(cè)到一個(gè)QT