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文檔簡(jiǎn)介
1、黃瓜花葉病毒(CMV)是辣椒病毒病的主要毒源之一,既影響辣椒的產(chǎn)量又影響辣椒的品質(zhì),主要表現(xiàn)為使辣椒果實(shí)畸形,果實(shí)商品性喪失,嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致絕產(chǎn)。因此,辣椒抗CMV育種已成為辣椒抗病育種的主要目標(biāo)之一。
開展辣椒抗CMV育種前,必須首先明確當(dāng)?shù)夭《痉蛛x物亞組分化情況,才能有針對(duì)性的開展辣椒抗CMV育種工作。應(yīng)用RT-PCR技術(shù)能夠快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)植株體內(nèi)CMV分離物亞組歸屬。利用分子標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建辣椒遺傳連鎖圖譜,并利用QT
2、L分析軟件鑒定抗病相關(guān)位點(diǎn),能夠大大提高育種中對(duì)數(shù)量性狀基因型選擇的準(zhǔn)確性和預(yù)見性,加速育種進(jìn)程。
本研究對(duì)湖北地區(qū)侵染辣椒CMV分離物亞組進(jìn)行鑒定;篩選辣椒抗CMV苗期接種鑒定方法,并進(jìn)行抗(耐)CMV辣椒材料的鑒定;以抗CMV辣椒材料P0747和感CMV的材料P0630及其雜交的后代分離群體為材料,對(duì)其抗性遺傳規(guī)律進(jìn)行研究,并應(yīng)用SSR和ISSR兩種分子標(biāo)記技術(shù)構(gòu)建了辣椒分子遺傳連鎖圖譜,對(duì)CMV抗性基因進(jìn)行了QTL定
3、位分析,對(duì)辣椒抗CMV育種具有重要的指導(dǎo)意義。主要研究結(jié)果如下:
(1)根據(jù)已報(bào)道的CMV外殼蛋白(CP)基因序列設(shè)計(jì)引物,應(yīng)用RT-PCR方法,對(duì)湖北地區(qū)侵染辣椒的CMV分離物的病毒外殼蛋白基因進(jìn)行基因擴(kuò)增和序列分析。結(jié)果表明,湖北省內(nèi)不同辣椒主產(chǎn)區(qū)采集到的樣品CP基因之間的核苷酸同源率高達(dá)98.2%~99.2%,分離物均屬于亞組IB成員。
(2)篩選出辣椒抗CMV苗期人工接種鑒定最佳條件為:在辣椒苗齡為4
4、片真葉,采用摩擦接種法、接種溫度30℃環(huán)境條件下,可以達(dá)到最佳的鑒定結(jié)果;應(yīng)用苗期人工接種鑒定方法從供試的74份辣椒種質(zhì)資源中篩選出抗CMV材料2份,耐CMV材料26份。
(3)利用6份對(duì)CMV抗感程度不同的辣椒材料通過Griffing的完全雙列雜交法對(duì)辣椒抗CMV的遺傳規(guī)律進(jìn)行了研究,明確了辣椒對(duì)CMV優(yōu)勢(shì)育種中親本的選擇和選配原則;再利用采用植物數(shù)量性狀主基因+多基因混合遺傳的世代聯(lián)合分析方法,對(duì)辣椒抗CMV材料的抗性
5、遺傳規(guī)律進(jìn)行分析,明確了辣椒對(duì)CMV的抗性受“兩對(duì)加性-顯性-上位性主基因+加性-顯性多基因”控制,并對(duì)各遺傳模型中抗性表現(xiàn)的主基因遺傳率和多基因遺傳率以及基因間的互作效應(yīng)進(jìn)行了詳細(xì)解析。
(4)應(yīng)用SSR和ISSR兩種分子標(biāo)記方法構(gòu)建了辣椒遺傳連鎖圖譜,該圖譜包括17個(gè)連鎖群,共有140個(gè)標(biāo)記進(jìn)入連鎖群,總長(zhǎng)度為1420.5cM,標(biāo)記間平均圖距為10.1 cM。
(5)應(yīng)用構(gòu)建的辣椒分子遺傳連鎖圖譜,結(jié)合復(fù)
6、合區(qū)間作圖法對(duì)辣椒抗CMV-HB相關(guān)QTL進(jìn)行分析,共定位了6個(gè)QTL,分別為qcmv.hb-4.1、qcmv.hb-7.1、qcmv.hb-8.1、qcmv.hb-8.2、qcmv.hb-8.3和 qcmv.hb-16.1,位于4個(gè)連鎖群上,能夠解釋表型變異的2.8~43.5%,其中qcmv.hb-4.1和qcmv.hb-8.2在夏季和秋季接種試驗(yàn)中均能夠被檢測(cè)到,其中qcmv.hb-8.2能夠解釋37.7~43.5%的表型變異,可以
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