法醫(yī)昆蟲種屬鑒定的分子生物學(xué)方法研究.pdf

1、[目的本課題旨在探索新的法醫(yī)昆蟲學(xué)種屬鑒定方法。方法利用引物設(shè)計(jì)軟件分別對(duì)法醫(yī)常見(jiàn)昆蟲的常染色體微衛(wèi)星區(qū)域和線粒體DNA(mtDNA)進(jìn)行引物設(shè)計(jì)，使用PCR技術(shù)分別對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增，用聚丙烯酰胺電泳對(duì)PCR產(chǎn)物分離、銀染。對(duì)于微衛(wèi)星(microsatellite)遺傳標(biāo)記直接進(jìn)行分型檢測(cè)。對(duì)于線粒體DNA通過(guò)銀染分離、檢測(cè)，利用DNA測(cè)序儀進(jìn)行測(cè)序分析。用系統(tǒng)進(jìn)化軟件(Mega2.1和PHYLIP3.06)進(jìn)行法醫(yī)常見(jiàn)昆蟲的親緣關(guān)系分析。

2、結(jié)果采用對(duì)線粒體16rsRNA基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增和DNA測(cè)序的方法，我們得到了中國(guó)9個(gè)地區(qū)6種不同法醫(yī)常見(jiàn)昆蟲的該基因測(cè)序結(jié)果。通過(guò)分子進(jìn)化關(guān)系分析，我們得到了他們之間的親緣關(guān)系圖。對(duì)于微衛(wèi)星遺傳標(biāo)記，我們發(fā)現(xiàn)了具有舍蠅種屬特異的微衛(wèi)星，并通過(guò)分子進(jìn)化關(guān)系分析了三個(gè)地區(qū)舍蠅的近緣關(guān)系。結(jié)論基于不同的遺傳標(biāo)記，我們建立了兩種用于法醫(yī)昆蟲學(xué)種屬鑒定的體系。比較了兩種遺傳標(biāo)記對(duì)法醫(yī)常見(jiàn)嗜尸性蒼蠅種屬鑒定的特點(diǎn)，提示兩種遺傳標(biāo)記可以用于法醫(yī)常見(jiàn)