AMSCs復(fù)合殼聚糖復(fù)合支架移植對兔退變早期椎間盤內(nèi)TNF-α、IL-1β的影響.pdf

1、目的：
　　 1.AMSCs（脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞）復(fù)合可注射溫敏型殼聚糖/β甘油磷酸鈉/Ⅰ型膠原支架移植對退變早期兔椎間盤內(nèi)TNF-α、IL-1β含量變化影響，并分析其意義。
　　 2.觀察BrdU標(biāo)記對AMSCs增殖作用影響，并對其標(biāo)記的AMSCs在椎間盤內(nèi)存活能力進(jìn)行觀察。
　　 方法：
　　 從兔脂肪組織中提取脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞，體外培養(yǎng)3代，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入終濃度為25μmol/L的BrdU，與未添加

2、培養(yǎng)的AMSCs行MTT試驗，觀察BrdU對細(xì)胞增殖影響，并行細(xì)胞免疫熒光染色，觀察細(xì)胞標(biāo)記情況。將BrdU的第三代標(biāo)記的AMSCs植入椎間盤體內(nèi)，術(shù)后2、4、8周行目標(biāo)椎間盤免疫組化染色，觀察AMSCs存活情況。選取24只新西蘭大白兔，雌雄不限，隨機分為髓核抽吸組、脂肪干細(xì)胞殼聚糖支架復(fù)合移植組、單純支架移植組以及單純椎間盤暴露組。每組動物都選擇L2-3、L3-4、L4-5、L5-6椎間盤為研究對象，造模的同時將第三代AMSCs與可注

3、射溫敏型殼聚糖/β甘油磷酸鈉/Ⅰ型膠原支架注入到椎間盤內(nèi)，于術(shù)后2、4、8周分別將每組兩只兔子處死，使用ELISA方法檢測L2-3、L3-4、L4-5、L5-6椎間盤內(nèi)TNF-α、IL-1β含量，并進(jìn)行組間比較。
　　 結(jié)果：
　　 25μmol/L Brdu對AMSCs生長情況與正常培養(yǎng)的AMSCs行MTT試驗未見明顯差異（P＞0.05）。2、4、8周椎間盤免疫熒光染色均見AMSCs，但8周時明顯降低。24只動物均存活

4、。
　　 標(biāo)準(zhǔn)對照組（髓核抽吸）與空白對照組（單純椎間盤暴露）相比較，TNF-α、IL-1β濃度均較高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；脂肪干細(xì)胞-殼聚糖支架復(fù)合移植組、單純殼聚糖支架植入組與標(biāo)準(zhǔn)對照組相比較，TNF-α、IL-1β濃度均降低，差異有顯著性（P＜0.05）；
　　 脂肪干細(xì)胞-殼聚糖支架復(fù)合移植組與單純殼聚糖支架植入組相比較，8周時，IL-β降低有顯著差異性。
　　 結(jié)論：
　　 1.B