多殺菌素產(chǎn)生菌菌種選育及原生質(zhì)體制備.pdf

1、多殺菌素(spinosad)是由放線菌刺糖多孢菌(Saccharoplyspora spinosa)產(chǎn)生的新型大環(huán)內(nèi)酯類化合物，是一種綠色廣譜殺蟲劑，兼具生物農(nóng)藥的安全性和化學(xué)農(nóng)藥的快速效果。多殺菌素具有，以獲得高產(chǎn)菌株。以多殺菌素產(chǎn)生菌S. spinosa 5-11為出發(fā)菌株，經(jīng)紫外線誘變處理后，在含不同濃度的多殺菌素梯度平板上篩選多殺菌素抗性菌株，經(jīng)搖瓶發(fā)酵篩選得到一高產(chǎn)變異株107-2，其產(chǎn)量較出發(fā)菌株增加59.1％。將變株S.s

2、pinosa 107-2在3L發(fā)酵罐上進(jìn)行發(fā)酵試驗，其產(chǎn)量達(dá)到453mg/L。 考察了葡萄糖及無機(jī)磷酸鹽對刺糖多孢菌菌體生長及多殺菌素產(chǎn)量的影響。研究結(jié)果表明：在多殺菌素發(fā)酵過程中，葡萄糖濃度的提高(18.6～58.8g/L)促進(jìn)了菌體的生長，多殺菌素效價增加；葡萄糖濃度的進(jìn)一步提高(58.8～79.6g/L)，菌體生長保持相對穩(wěn)定，效價緩慢下降；葡萄糖濃度增加到115.3 g/L，菌體生長受到明顯抑制，效價大幅下降。磷酸鹽濃度

3、的提高(3.68～29.41mmol/L)菌體密度和多殺菌素效價增加，磷酸鹽濃度的進(jìn)一步提高(29.41～44.12 mmol/L)，菌體濃度緩慢增加，多殺菌素效價降低；當(dāng)磷酸鹽濃度增至57.62 mmol/L，菌體密度和多殺菌素效價均明顯下降。因此，在磷酸鹽濃度為29.41 mmol/L，葡萄糖濃度為58.8g/L條件下的發(fā)酵過程中，多殺菌素產(chǎn)量最高。將出發(fā)菌株S. spinosa107-2在5L發(fā)酵罐上進(jìn)行發(fā)酵試驗，培養(yǎng)基中葡萄糖濃