擬南芥原生質(zhì)體制備及葡萄ERFs調(diào)控GCC-box的瞬時(shí)表達(dá)分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、乙烯響應(yīng)因子(ERF)參與植物的生物脅迫和非生物脅迫的應(yīng)答,是與植物抗逆應(yīng)答密切相關(guān)的一類轉(zhuǎn)錄因子。乙烯和病害都能誘導(dǎo)ERF類轉(zhuǎn)錄因子的基因表達(dá),它們多數(shù)通過與其下游基因的應(yīng)答元件GCC-box的相互作用來調(diào)節(jié)基因表達(dá),進(jìn)而提高植物的抗性。因此應(yīng)答元件GCC-box對研究ERF類轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控作用有著至關(guān)重要的意義。
   本研究從栽培葡萄中克隆了2個(gè)不同的ERF基因的全長的開放閱讀框,命名為VvERF4-2和VvERF2-1;

2、從野生夏葡萄中克隆了1個(gè)ERF基因的全長的開放閱讀框,命名為VaERF5。本文通過PEG-Ca2+共轉(zhuǎn)化擬南芥原生質(zhì)體瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng),對含有GCC-box的熒光素酶報(bào)告基因經(jīng)過ERF調(diào)節(jié)后的熒光檢測分析,分別對VvERF2-1、VvERF4-2和VaERF5對GCC-box的調(diào)控關(guān)系進(jìn)行了研究,目的是探討ERF轉(zhuǎn)錄因子是否通過GCC-box調(diào)節(jié)其下游的靶基因的表達(dá)。結(jié)果表明:①擬南芥原生質(zhì)體分離的最佳條件是:室內(nèi)土培3-4周的擬南芥,取中

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