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1、l107670分類號(hào)密級(jí)飛踴差≮夭等碩士學(xué)位論文單位代碼:10019學(xué)號(hào):B040407利用玉米原生質(zhì)體瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行CK2z亞基的功能研究StudyonthcFunctionofCK2qthroughMaizeProtoplastsTransientExpressionAssay研究生:武鵬指導(dǎo)教師:王國(guó)墓教援——申請(qǐng)學(xué)位門類級(jí)別:堡堂亟專業(yè)名稱:生業(yè)與公王生物堂研究方向:擅物基因工程所在學(xué)院:生物堂暄二零零七年六月Abstract
2、MaizeisoneoftheessentialcropsthroughouttheworldTherootandbasestempartsareoftenexposedtotheinfectiousthreatsfromPythiumstalkrot,asoilbomfungaldiseaseAccordingtocurrentknowledge,thechiefpathogeninmaizePythiumstalkrotisPyth
3、iuminflatumBycomparingmaizesamplesbeforeandafterPythiuminflatuminoculationthroughcDNAAFLPanalysis,ourresearchteamfinallyfoundthedifferentiallyexpressedfragmentsincludingtheDNAsequenceforCK2ctsubunitInordertofurtherverify
4、whethertheCK2usubunithasbeeninvolvedintheresistanceprocessofmaize,westudiedthefunctionofCK2ttsubunitintheresistanceprocessofmaizethroughNorthernblottingandTransientexpressionassayusingmaizeprotoplastsCK2isaproteinkinasec
5、ommonlyexistingineukaryoticcellsItisexpressedatmostgrowingphasesinplantsPreviousstudiesrevealthatCK2isplayingacertainroleinbiochemicalprocessessuchastumarformation,HIVIactivityapoptosis,cellrecessive,andcellcycle,etc。Our
6、studyadoptedthetransientexpressionassayusingmaizeprotoplaststodetecttheexpressionsofdiseaseresistancegenesafterthemaizewasn誼nsfelrmedwithCK2asubunitTheresultthatoverexpressionofCK2ainducedtheexpressionofRPRlwasdiscoverd,
7、whichindicatedthatCK2ctparticipatesactivelyinthediseaseresistanceprocessofmaizeTheresultgatheredfromNorthernblottingalsoshowedthat,afterbeinginfectedbypythiuminfiatumCK2ctsubunitinmaizeturnedouttobeinamodeofinducedexpres
8、sion,whichconfirmedthatCK2ttdoesactacertainroleinthediseaseresistanceprocessofmaizeTofurthergrasptheparticularroleCK2czisactinginthediseaseresistanceprocessofmaize,theCK2amutationofarabidopsiswasstudiedTheresultshowedtha
9、t,afterbeingtreatedbydifferentdensitiesofABA,IAA,SA,MJAmannit01etc,,nocleardifferenceapprearedbetweenphenotypesofmutationandwildtypeThenweextractedRNAfromSAtreatedCK2ctmutation,inverselytranscriptedittoeDNAtoformthetempl
10、ete,anddesignedprimerbyusingPRlandERFlasMARKgenesAfterthataRTPCRdetectionwasconductedOurconclusionis,withoutSAtreatment,PRlexpressioninmutationisobviouslydepressedHoweveraftertreatment,PRlexpressionrecoverstoacertainleve
11、l,thoughstilllowerthanthatinW丁AlltheseindicatethattheabsenceofCK2asubunitmaypartiallyblockthediseaseresistancesignalingpathwaysinducedbySAApartfromthiswehavealreadytranstbrmedCK2ttsubunitintomaizeandarabidopsisThenextste
12、pistoobservingthephenotypeofthetransformedplants,anddeeplystudytheinfluencesCK2ctsubunitcastsoverdiseaseresistancemechanisminmaizeKeywords:ProteinkinaseCK2ResistancemechanismAtransientexpressionassayusingmaizeprotoplasts
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