越橘原生質(zhì)體分離純化研究.pdf

1、吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文越橘原生質(zhì)體分離純化研究姓名：盧明艷申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：果樹學(xué)指導(dǎo)教師：張志東20060601S t u d i e so n P r o t o p l a s tI s o l a t i o na n dP u r i f i c a t i o n o f B l u e b e r r yA b s t r a c tT h e f a c t o r s t h a t a f I 融p r o

2、t o p l a s t i s o l a t i o n a n dp 砸：E i c a 矗o n j n c l u d i l l g E 1 1 剮1 l e ，i s o l 撕o nt l m e ，p Hv a l u e o fe n z y m el i q u i d ，0 s m o 吐cs t a b i l i h c s ，p h y s i o l o g i c a ls t a t e ，p r

3、c - n ℃a t m e n t s 撂e n o t y p e s ，s p e e dm l d 血l e ，d 叫sa n dg c n e r a h o n so f c u b c u I t t l r ec a n l l si n d u c e d 如ml e a V e s ，w e r es t I l ‘l i e d 澌m吐l r c eb l m b e ∞r(nóng)c u l n v 缸s ‘S u n r

4、 i s c ’，‘N o n h l 鋤d ’a n d ‘F l l l l d y ’i I lv i 咖T h e m a i nr e s u l t s w e r c a sf o l l d w i n g ：lT h e f h n d 鋤e n t a lc o n d i 6 0 n so f p r o t o p l a s ti s o l a 娃o n 、v i t hl e a v e si nv i t

5、 mw e r es a m e a st h a to fc a l l u si n d u c e d 丹o ml c 8 v e s ．1 kb a s i cc o n d i d o f I sw e r e1 ．5 ％C d l u l a s eR - 1 0 + 1 ．5 ％M a c e r o z v m eR _ 1 0 + 0 ．7 m o l 幾m a 曲j t o l + 5 m m o l 幾M E S

6、，i s o J a t i n g 血n e l 5 h ra n d p H 6 5o f 嗣l z y m e ．2 T h e r e s u l to f 腫C O p l a s ti s o l a d o n w a sd i ￡f 醯e n t b e c 卸s eo f d i 婦鳧r e mm a t c r i a l s L e a f i nv i 扛Dw a s b e c t e rt h 孤c a l

7、l u s ．Y i e I d0 f v i g o f o l l sp m t o p I a s t o f l e a v e sw a s2 ．0 7 ×1 0 4 個(gè)／gF w ，w I l e r a 8∞1 1 u s w a s l ，5 7 ×1 0 5 個(gè)／g 硎Y i d d a n d v i g o r o f p m t o p l ∞t o f c a l l I l s w e r

8、 e l5 7 ×1 0 5 個(gè)／g 岡a l l d7 96 4 ％8 n c r s u b c u 】n Ⅱ弓d1 4 d ，w h i c h w e 豫b e t t e r 血鋤t h a to f 7 d ，2 l d ，2 8 d ．T h e t h i r dg e n e r a t i o 舾o fs u b c l l l t u r c dc a l l u sc o 珂d p r o d u ∞m

9、 o 鶘v i g o r o l l sp r o t o p l a s t 山a nt 1 1 a to f t h cf i r s t ，s e c o n do r t h ef b r t hg e ∞r(nóng) a h O n s ．3 Y i e l d0 fv i g 吖o u sp r o I o p l a s t 丘o ml ·弛l e a v 懿w 鸛h i 對嘧也a n 血a t 矗o m4 - 5 m

10、l e a v 船，s e p a r a 々e l y 2 0 7 ×1 0 5 個(gè)／g 雕∞d O ．7 7 ×1 0 3 個(gè)／g 研．44 ℃c o I d 觚斌m 咖0 r 3 h rd a d c 扛怕刪c o m d i m p r o v ey i e l d 鋤d v i 9 0 ro f p r o t o p l a s ti ns o m ee 咖n t ，b u td i v e r s i

11、t y i sn o t r 鈿a r k a b l c ．5 1 1 1 er e 汕s o f 呻甜o p l 拈ti s o l 撕0 nb e h 黼n g c n o 呻e sw e r e 叫I b r e n t ．Y i e l do f v i g o r o u sp r o t o p I a s t 丹o m ‘N o r I l l l a n d ’w 如缸l l i g l I c rm 鋤‘S u n

12、r i s e ’a n d ‘F 皿d y ’6n e c o n d i t i o 璐0 f p r 礬巾l 酗tp u r i f i c 撕o n w e ∞s t I l ‘l i e di nt l l i s p 印e r 誦1 h 。F I l l l d y ’I e a v e si n 、，i 昀．Ap l c n 妙o f v i g o r o 嘴舯喲p l a s t c o u l d b c 0 b t

13、 a j n e dw h e n c e 曲{ f 她a t e7 m i n 誦血8 0 0 r ／I n i n7 p H v a l u eo f e 崎哪b e f b r c 岫刪a s t i s o l a t e d 柚d a f h i s o l a t e d w e r e t e s t e d ．T h e p Hv a l u ed e c l i l 增da f b e ri s o I a t c d

14、 ’b u tt l 】屺啪窯e 、Ⅳa sd j Ⅱ昭叫8T h ev _ 缸i 姆a n dc o n c c m r a 缸a no f 潞越o d c s t a b 詛i 鑼a l ∞疆b a t c dt I 埠r e s u l t so f p r o t o p l a s ti s o l a d o n ．M 舯l I i t 0 1w a sm o r c6 t f b r p r 0 I o p l a s t