人心肌肌鈣蛋白I(cTnI)膠體金免疫層析分析法的研究.pdf
目前在工業(yè)化國家,心血管疾病是威脅人類生命的主要疾病之一,發(fā)病率和死亡率均很高,對此類疾病進行早期診斷和治療具有重大意義。心由于人心肌組織難以獲得,因此從組織中大量提取純化CTNI,把它作為研究或者診斷用的抗原是極其困難的,所以本實驗采用FMOC保護的氨基酸,用固相法人工合成多肽CTNI抗原,其特點是選擇合成天然CTNI蛋白上的一段氨基酸多肽,具有免疫原性、且水溶性好,經(jīng)高效液相層析純化和質(zhì)譜分析證實所合成多肽達到后續(xù)實驗的要求。同時為了加強這段多肽的免疫原性,把它和血藍蛋白KLH載體偶聯(lián),用該連接物免疫家兔,采用經(jīng)典的多克隆抗體制備技術(shù)制備CTNI合成多肽抗體,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法ELISA對CTNI抗體進行檢測,達到實驗要求。采用檸檬酸三鈉還原法制備金溶膠。用制備的抗體標記納米級的膠體金顆粒和包被微孔硝酸纖維素膜,并結(jié)合層析技術(shù)建立了CTNI的膠體金免疫層析分析法,獲得了滿意的結(jié)果。該方法具有較高的靈敏度和特異性。為急性心肌梗死AMI高危人群的普查和醫(yī)院輔助診斷AMI提供特異、靈敏、簡便、快速的診斷技術(shù),為制備國產(chǎn)化CTNI試劑盒奠定了基礎(chǔ)。
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編號:20190319134251229 類型:共享資源 大?。?span id="zfqrith" class="font-tahoma">2.19MB 格式:PDF 上傳時間:2024-01-05
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- 關(guān) 鍵 詞:
- 心肌肌鈣蛋白I 心肌損傷 多克隆抗體 膠體金 免疫層析
- 資源描述:
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目前在工業(yè)化國家,心血管疾病是威脅人類生命的主要疾病之一,發(fā)病率和死亡率均很高,對此類疾病進行早期診斷和治療具有重大意義。心由于人心肌組織難以獲得,因此從組織中大量提取純化cTnI,把它作為研究或者診斷用的抗原是極其困難的,所以本實驗采用Fmoc保護的氨基酸,用固相法人工合成多肽cTnI抗原,其特點是選擇合成天然cTnI蛋白上的一段氨基酸多肽,具有免疫原性、且水溶性好,經(jīng)高效液相層析純化和質(zhì)譜分析證實所合成多肽達到后續(xù)實驗的要求。同時為了加強這段多肽的免疫原性,把它和血藍蛋白(KLH)載體偶聯(lián),用該連接物免疫家兔,采用經(jīng)典的多克隆抗體制備技術(shù)制備cTnI合成多肽抗體,采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法(ELISA)對cTnI抗體進行檢測,達到實驗要求。采用檸檬酸三鈉還原法制備金溶膠。用制備的抗體標記納米級的膠體金顆粒和包被微孔硝酸纖維素膜,并結(jié)合層析技術(shù)建立了cTnI的膠體金免疫層析分析法,獲得了滿意的結(jié)果。該方法具有較高的靈敏度和特異性。為急性心肌梗死(AMI)高危人群的普查和醫(yī)院輔助診斷AMI提供特異、靈敏、簡便、快速的診斷技術(shù),為制備國產(chǎn)化cTnI試劑盒奠定了基礎(chǔ)。
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