雙眼形覺(jué)剝奪對(duì)大鼠視皮層神經(jīng)元電生理學(xué)和形態(tài)學(xué)特性的影響.pdf

1、目的:該課題擬通過(guò)視皮層腦片膜片鉗全細(xì)胞記錄法,結(jié)合細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記技術(shù),觀察不同發(fā)育階段雙眼形覺(jué)剝奪大鼠視皮層神經(jīng)元興奮性突觸后電流(EPSCs)變化及突觸傳遞長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)現(xiàn)象(LTP),研究形覺(jué)剝奪對(duì)發(fā)育過(guò)程中視皮層神經(jīng)元突觸電生理學(xué)和形態(tài)學(xué)特性的影響,探索哺乳動(dòng)物視覺(jué)發(fā)育可塑性的細(xì)胞水平機(jī)制,為臨床相關(guān)視功能障礙的治療提供新的思路.方法:健康Wistar大鼠61只,分為正常組和雙眼形覺(jué)剝奪組:正常組中3周齡(20-22天齡)13只,4周齡

2、(27-29天齡)9只,5周齡(34-36天齡)10只;雙眼形覺(jué)剝奪組3周齡(20-22天齡)12只,4周齡(27-29天齡)9只,5周齡(34-36天齡)8只.形覺(jué)剝奪組于13天時(shí)縫合雙眼.制作腦片后利用盲法尋找細(xì)胞,獲得膜片鉗全細(xì)胞記錄,通過(guò)視皮層的雙極刺激電極給予0.07Hz的突觸前測(cè)試刺激,記錄視皮層神經(jīng)元的PSCs.然后給予1Hz的低頻刺激60~90個(gè),每個(gè)脈沖伴隨突觸后去極化至-20mV以誘發(fā)LTP.電生理記錄結(jié)束后對(duì)所記細(xì)

3、胞進(jìn)行免疫組化染色.結(jié)論:1、大鼠視皮層多突觸反應(yīng)型神經(jīng)元隨發(fā)育有逐漸升高的趨勢(shì),而雙眼形覺(jué)剝奪后大鼠視皮層無(wú)反應(yīng)型神經(jīng)元較正常大鼠顯著增多,提示靜息突觸的激活可能是視皮層神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)回路構(gòu)建的一個(gè)重要基礎(chǔ).2、視皮層神經(jīng)元電生理學(xué)特性和形態(tài)學(xué)特性緊密相關(guān).形覺(jué)剝奪后大鼠視皮層神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的幼稚狀態(tài)與功能上的不成熟是一致的.3、雙眼形覺(jué)剝奪后大鼠視皮層神經(jīng)元LTP誘出率顯著下降,提示形覺(jué)刺激是視皮層神經(jīng)元突觸正常發(fā)育的重要條件.4、雙眼形覺(jué)